3.2. Determination of molecular masses for olive proteins by CGE
The twenty different varietal samples included in Table 1 were
analyzed by the CGE method optimized to determine the molecular
masses of the olive proteins. The analysis of the protein profiles
obtained by CGE showed seven peaks that were observed in most of
the olive varieties studied. Table 2 shows the migration times for
these seven peaks, the UV spectra, the number of olive varieties that
present the peak, the abundance of the peak considering the seven
selected peaks, the molecular masses calculated using CGE data, and
their tentative assignment to proteins already reported in literature.
Identification of some electrophoretic signals could be performed by comparison with the molecular masses previously
reported when using SDS-PAGE. Nevertheless, it is important to
highlight that the correspondence between SDS-PAGE and
SDS-CGE is tentative due to the different migration behavior of
proteins in both techniques. Just four signals with molecular
masses of 22.1 7 0.6, 307 1, 48 7 1, and 53 7 2 kDa, could be
assigned to proteins previously observed by SDS-PAGE. Indeed,
the fourth peak observed by SDS-CGE analysis showed a molecular mass of 22.1 7 0.6 kDa that could be related to a polypeptide
found by Alche´ [4] and derived from the precursor of 41 kDa. This
peak was present in 18 of the 20 analyzed varieties although its
abundance was very low (only 4.4%). The peak with a molecular
mass of 307 1 kDa could be attributed to a polypeptide of 30.0 kDa
[4,20]. The last two peaks had the worst resolution and could be
assigned to the same protein, an oleosin of 50 kDa reported by Ross
[9] and Esteve [20]. The rest of peaks were never observed using
SDS-PAGE with traditional extraction methodologies. Only a recent
work of the group using protein extraction with peptide ligand
libraries [15] enabled the detection of more SDS-PAGE bands that
could be correlated with the additional three signals observed in this
work by SDS-CGE. Finally, the last peak appearing at 17.7 min
presented the highest area (35.0%). Fig. 2 shows, as example, the
electropherogram corresponding to the olive variety ‘Alamen˜o de
Cabra’, presenting all common peaks, compared with the size
standards used to determine the different molecular masses.
3.2. การกำหนดมวลโมเลกุลสำหรับโปรตีนมะกอกโดย CGEมีตัวอย่างพันธุ์อื่นยี่สิบรวมอยู่ในตารางที่ 1วิเคราะห์ โดยวิธี CGE ที่เพิ่มประสิทธิภาพในการตรวจสอบในระดับโมเลกุลมวลของโปรตีนมะกอก การวิเคราะห์ในรูปโปรตีนได้ โดยแสดงให้เห็นยอดเขาเจ็ดที่ถูกตั้งข้อสังเกตในส่วนของ CGEศึกษาพันธุ์มะกอก ตารางที่ 2 แสดงเวลาของการโยกย้ายสเปกตรัมรังสียูวี จำนวนพันธุ์มะกอก ยอดเขาเจ็ดเหล่านี้ที่ปัจจุบันสูงสุด ความอุดมสมบูรณ์ของจุดสูงสุดที่พิจารณาเซเว่นเลือกยอด มวลโมเลกุลคำนวณโดยใช้ข้อมูล CGE และหมายไม่แน่นอนกับโปรตีนแล้วรายงานในวรรณคดีรหัสของสัญญาณ electrophoretic บางอย่างอาจทำได้โดยเปรียบเทียบมวลโมเลกุลก่อนหน้านี้รายงานเมื่อใช้ SDS-หน้า แต่ มันเป็นสิ่งสำคัญที่จะเน้นที่การติดต่อระหว่างหน้า SDS และSDS-CGE คือไม่แน่นอนเนื่องจากพฤติกรรมการย้ายที่แตกต่างกันโปรตีนในทั้งสองเทคนิค สัญญาณเพียงสี่กับโมเลกุลมวลของ 22.1 7 0.6, 307 1, 48 7 1 และ 53 7 2 kDa อาจจะกำหนดให้โปรตีนก่อนหน้านี้ สังเกต โดย SDS-หน้า แน่นอนจุดสูงสุดสี่สังเกต โดย SDS CGE วิเคราะห์แสดงให้เห็นว่ามวลโมเลกุลของ 22.1 kDa 7 0.6 ที่อาจเกี่ยวข้องกับ polypeptideโดย Alche´ [4] และได้มาจากสารตั้งต้นของ 41 kDa นี้สูงสุดคืออยู่ใน 18 ที่ 20 วิเคราะห์พันธุ์แม้ว่าการความอุดมสมบูรณ์ได้ต่ำมาก (เพียง 4.4%) พีคกับโมเลกุลที่mass of 307 1 kDa could be attributed to a polypeptide of 30.0 kDa[4,20]. The last two peaks had the worst resolution and could beassigned to the same protein, an oleosin of 50 kDa reported by Ross[9] and Esteve [20]. The rest of peaks were never observed usingSDS-PAGE with traditional extraction methodologies. Only a recentwork of the group using protein extraction with peptide ligandlibraries [15] enabled the detection of more SDS-PAGE bands thatcould be correlated with the additional three signals observed in thiswork by SDS-CGE. Finally, the last peak appearing at 17.7 minpresented the highest area (35.0%). Fig. 2 shows, as example, theelectropherogram corresponding to the olive variety ‘Alamen˜o deCabra’, presenting all common peaks, compared with the sizestandards used to determine the different molecular masses.
การแปล กรุณารอสักครู่..
