Bacterial cells from a 24-h culture

Bacterial cells from a 24-h culture were aseptically
harvested by centrifugation at 3600
g for 5 min at 20jC
and washed twice in sterile 15 mM Tris–HCl buffer (pH
7.0) and resuspended in the same buffer to an OD 600 nm of
0.4 [5]. One microliter of the fluorescent membrane probe,
1,6-diphenyl-1,3,5-hexatriene (DPH, Molecular Probes,
Eugene, Oregon, USA) (12 mM stock solution in tetrahydrofuran),
was added to 3 ml of each resuspended culture in
a quartz cuvette and incubated for 10 min in the dark at
room temperature to allow probe incorporation into the
cytoplasmic membrane [4,5].

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มีเซลล์แบคทีเรียจากวัฒนธรรม 24 h asepticallyเก็บเกี่ยว โดย centrifugation ที่ 3600 g ใน 5 นาทีที่ 20jCและหินสองในกอซ 15 มม.ตรี – HCl บัฟเฟอร์ (pH7.0) และ resuspended ในบัฟเฟอร์ nm OD 600 มีของแบบเดียวกัน0.4 [5] หนึ่งไมโครลิตรของโพรบเรืองแสงเมมเบรน1,6-ฟีนิลได-1,3,5-hexatriene (ดีพีเอช คลิปปากตะเข้โมเลกุลEugene ออริกอน สหรัฐอเมริกา) (12 มม.หุ้นโซลูชันใน tetrahydrofuran),เพิ่มให้ 3 ml ของแต่ละวัฒนธรรม resuspendedcuvette ควอตซ์ และ incubated สำหรับ 10 นาทีในมืดที่อุณหภูมิห้องให้ประสานโพรบเข้าcytoplasmic เยื่อ [4,5]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เซลล์แบคทีเรียจากวัฒนธรรมตลอด 24 ชั่วโมงได้รับการปลอดเชื้อ
เก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 3600? กรัมเวลา 5 นาทีที่ 20JC
และล้างครั้งที่สองในการฆ่าเชื้อ 15 มิลลิบัฟเฟอร์ Tris-HCl (pH
7.0) และ resuspended ในบัฟเฟอร์เดียวกันกับ OD 600 นิวตันเมตร
0.4 [5] หนึ่งไมโครลิตรของหัวเมมเบรนเรืองแสง,
1,6-diphenyl-1,3,5-hexatriene (DPH, Probes โมเลกุล,
ออริกอนสหรัฐอเมริกา) (12 มมโซลูชั่นหุ้นใน tetrahydrofuran)
ถูกบันทึกอยู่ใน 3 มลของแต่ละ resuspended วัฒนธรรมใน
cuvette ควอตซ์และบ่มเป็นเวลา 10 นาทีในที่มืดที่
อุณหภูมิห้องเพื่อให้การรวมตัวกันแสดงความคิดเห็นลงใน
เยื่อหุ้มนิวเคลียส [4,5]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เซลล์แบคทีเรียจาก 24-h วัฒนธรรมเป็น aseptically
เก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 3600
G สำหรับ 5 นาทีที่ 20jc
และล้างสองครั้งเป็นหมัน 15 มม. โดย– HCl บัฟเฟอร์ pH
7.0 ) และ resuspended ในบัฟเฟอร์เดียวกันกับ OD 600 nm ของ
0 [ 5 ] หนึ่งไมโครลิตร ด้วยแผ่นเรืองแสง ,
1,6-diphenyl-1,3,5-hexatriene ( Inc โมเลกุลโพรบ
Eugene , Oregon , USA ) ( โซลูชั่นหุ้น 12 มม. ในเตตระไฮโดรฟแรน )
เพิ่ม 3 ml ของวัฒนธรรมในแต่ละ resuspended
ควอตซ์พิทยาพลบ่มเป็นเวลา 10 นาทีในที่มืดที่อุณหภูมิ
ห้องเพื่อให้แหย่เข้าไปในเยื่อนี้
[ 4 , 5 ]