2.5. Biocontrol experiments on deta

2.5. Biocontrol experiments on detached grape berries
For each yeast strain, four grape (cv. Italia) bunches, each bearing five mature berries, were prepared, disinfected with 1% sodium hypochlorite for 10 min and rinsed twice with sterile distilled water. Berries were wounded with a sterile needle (2 mm diameter, 1 wound/berry) and whole bunches were dipped into a 50 mL suspension of each antagonist (108 CFU/mL). Bunches were then air-dried and subsequently sprayed until runoff (1 mL/bunch) with an A. carbonarius spore suspension (107 conidia/mL) by using a hand sprayer. After inoculation, grape bunches were placed in plastic boxes (16 × 26 × 10 cm) for 6 days and incubated at 25 °C in the dark under high relative humidity (95 ± 5%). After 6 days berries were checked and a 0–100 disease index was assigned to them according to the percentage (0, 25, 50, 75 and 100%) of berry surface covered by mold.

2.6. VOC experiments on artificially inoculated grape berries
To check whether VOCs produced by the antagonistic yeast strains may inhibit A. carbonarius growth on grape berries, bunches were prepared, wounded and inoculated with the pathogen as previously described. The grape bunches were then placed into plastic boxes whose lids were internally supplied with three open YPD agar (2%) plates inoculated by streaking 100 μL of yeast cell suspension (108 CFU/mL) and previously incubated for 24 h at 25 °C. Plastic boxes were sealed with Parafilm® and cellophane and stored for 6 days at 25 °C under high relative humidity (95 ± 5%). A disease index was then assigned to inoculated berries as previously reported.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5. Biocontrol ทดลองบนองุ่นครบเดี่ยวสำหรับแต่ละต้องใช้ยีสต์ สี่องุ่น (พันธุ์อิตาเลีย) ช่อ แต่ละเรือง 5 ผู้ใหญ่ครบ เตรียม ฆ่าเชื้อ ด้วย 1% ฟอกขาวใน 10 นาที และ rinsed สอง ด้วยน้ำกลั่นฆ่าเชื้อ ครบได้รับบาดเจ็บ ด้วยเข็มกอซ (เส้นผ่าศูนย์กลาง 2 มม. รี่ 1 แผล) และช่อทั้งหมดถูกสอดเข้าระงับละปฏิปักษ์ (108 CFU/mL) 50 mL Bunches ถูก air-dried แล้วมาฉีดพ่นจนกว่าสปอร์ไหลบ่า (1 mL/พวง) กับ carbonarius A. การระงับ (107 conidia/mL) โดยใช้กระบอกฉีดที่มือ หลังจาก inoculation ช่อองุ่นถูกวางในกล่องพลาสติก (16 × 26 × 10 ซม.) 6 วัน และ incubated ที่ 25 ° C ในมืดภายใต้ความชื้นสัมพัทธ์สูง (95 ± 5%) หลังจากได้ตรวจสอบครบ 6 วันและ 0 – 100 ดัชนีโรคถูกกำหนดไปตามเปอร์เซ็นต์ (0, 25, 50, 75 และ 100%) ของพื้นผิวเบอร์รี่รวมแม่พิมพ์2.6. VOC ทดลองบนองุ่นครบสมยอม inoculatedการตรวจสอบว่า VOCs ผลิตโดย ยีสต์ต่อต้านอาจยับยั้งการเติบโต A. carbonarius ในองุ่นครบ ช่อเตรียม ได้รับบาดเจ็บ และ inoculated มีอธิบายไว้ก่อนหน้านี้เป็น การศึกษา ช่อองุ่นถูกวางลงในกล่องพลาสติกที่มีฝาภายในได้ให้กับสามเปิด YPD agar (2%) แผ่น inoculated โดย μL 100 streaking ของระงับเซลล์ยีสต์ (108 CFU/mL) และก่อนหน้านี้ incubated ใน 24 ชมที่ 25 องศาเซลเซียส กล่องพลาสติกปิดผนึก Parafilm ®และ cellophane และเก็บไว้ 6 วันที่ 25 ° C ภายใต้ความชื้นสัมพัทธ์สูง (95 ± 5%) แล้วได้กำหนดดัชนีโรคให้ครบ inoculated รายงานว่า ก่อนหน้านี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 การทดลอง Biocontrol ในผลเบอร์รี่องุ่นเดี่ยว
สำหรับแต่ละสายพันธุ์ยีสต์สี่องุ่น (พันธุ์. อิตาเลีย) bunches แต่ละแบกห้าเบอร์รี่สุกที่เตรียมฆ่าเชื้อด้วยโซเดียมไฮโปคลอไรต์ 1% เป็นเวลา 10 นาทีและล้างสองครั้งด้วยน้ำกลั่นผ่านการฆ่าเชื้อ เบอร์รี่ได้รับบาดเจ็บด้วยเข็มผ่านการฆ่าเชื้อ (2 มิลลิเมตรเส้นผ่าศูนย์กลาง 1 แผล / เบอร์รี่) และอัดแน่นทั้งถูกจุ่มลงไปในการระงับ 50 มิลลิลิตรของแต่ละศัตรู (108 โคโลนี / มิลลิลิตร) ที่อัดแน่นอยู่แล้วอากาศแห้งและพ่นต่อมาจนไหลบ่า (1 มิลลิลิตร / พวง) กับเอสปอร์แขวนลอย carbonarius (107 conidia / มิลลิลิตร) โดยใช้เครื่องพ่นสารเคมีมือ หลังจากการฉีดวัคซีน, พวงองุ่นถูกวางไว้ในกล่องพลาสติก (16 × 26 × 10 ซม.) เป็นเวลา 6 วันและบ่มที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสในที่มืดภายใต้ความชื้นสัมพัทธ์สูง (95 ± 5%) หลังจากที่ผลเบอร์รี่ 6 วันที่ได้รับการตรวจสอบและดัชนีโรค 0-100 ได้รับมอบหมายให้พวกเขาตามสัดส่วน (0, 25, 50, 75 และ 100%) ของพื้นผิวผลไม้เล็ก ๆ ปกคลุมด้วยแม่พิมพ์. 2.6 การทดลอง VOC ในผลเบอร์รี่องุ่นเทียมเชื้อเพื่อตรวจสอบว่าสารอินทรีย์ระเหยที่ผลิตโดยสายพันธุ์ยีสต์ปฏิปักษ์อาจยับยั้งการเจริญเติบโตของเอ carbonarius ในผลเบอร์รี่องุ่นอัดแน่นได้จัดทำ, ได้รับบาดเจ็บและเชื้อด้วยเชื้อโรคตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ช่อองุ่นถูกวางไว้แล้วลงในกล่องพลาสติกที่มีฝาปิดถูกจัดจำหน่ายภายในสามเปิด YPD วุ้น (2%) แผ่นเชื้อโดยพุ่ง 100 ไมโครลิตรของการระงับเซลล์ยีสต์ (108 โคโลนี / มิลลิลิตร) และบ่มก่อนหน้านี้เป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่ 25 ° C กล่องพลาสติกที่ถูกปิดผนึกด้วยParafilm®และกระดาษแก้วและเก็บไว้สำหรับ 6 วันที่ 25 ° C ภายใต้ความชื้นสัมพัทธ์สูง (95 ± 5%) ดัชนีการเกิดโรคได้รับมอบหมายจากนั้นไปที่ผลเบอร์รี่เชื้อตามที่รายงานก่อนหน้านี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 ไบโอคอนโทรลการทดลองแยกองุ่นเบอร์รี่
แต่ละยีสต์สายพันธุ์องุ่น 4 พันธุ์ อิตาลี ) มัดละห้าผู้ใหญ่แบกเบอร์รี่ พร้อมฆ่าเชื้อด้วยสารละลายโซเดียมไฮโปคลอไรท์ , 1% เป็นเวลา 10 นาทีและล้างด้วยน้ำกลั่นสองครั้งเป็นหมัน . เบอร์รี่ได้รับบาดเจ็บด้วยเข็มปลอดเชื้อ ( เส้นผ่านศูนย์กลาง 2 มิลลิเมตร1 แผล / เบอรี่ ) และจำนวนมากถูกจุ่มลงใน 50 ml ช่วงล่างของแต่ละปฏิปักษ์ ( 108 CFU / ml ) มัดแล้วอากาศแห้งและภายหลังฉีดพ่นจนน้ำท่า ( / พวง 1 มิลลิลิตร ) กับ A carbonarius สปอร์แขวนลอย ( 107 conidia / ml ) โดยใช้มือ เครื่องพ่นสารเคมี หลังจากที่ได้รับพวงองุ่นอยู่ในกล่องพลาสติก ( 16 × 26 × 10 ซม. ) สำหรับ 6 วันและบ่มที่อุณหภูมิ 25 ° C ในที่มืดภายใต้ความชื้นสัมพัทธ์สูง ( 95 ± 5% ) หลังจากที่ 6 วันเบอร์รี่ถูกตรวจสอบและ 0 – 100 ดัชนีของโรคได้รับมอบหมายให้ตามเปอร์เซ็นต์ ( 0 , 25 , 50 , 75 และ 100 เปอร์เซ็นต์ของพื้นผิวปกคลุมด้วยเบอร์รี่ปั้น

2.6 สำหรับการทดลองปลูกองุ่นเบอร์รี่
เทียมเพื่อตรวจสอบว่า สารผลิตโดยเชื้อยีสต์ปฏิปักษ์อาจยับยั้งการเจริญเติบโต carbonarius A ในเบอร์รี่องุ่น พวงพร้อม บาดเจ็บและหัวเชื้อกับเชื้อโรคตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้องุ่นพวงแล้ววางลงในกล่องพลาสติกที่มีฝาปิดอยู่ภายในให้กับวุ้น ypd เปิดสาม ( 2% ) แผ่นเชื้อ streaking 100 μลิตรระงับเซลล์ยีสต์ ( 108 CFU / ml ) และก่อนหน้านี้ บ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 25 ° C กล่องพลาสติกถูกผนึกด้วย®พาราฟิล์มและกระดาษแก้วและเก็บไว้เป็นเวลา 6 วัน ที่อุณหภูมิ 25 ° C ภายใต้ความชื้นสัมพัทธ์สูง ( 95 ± 5% )เป็นดัชนีของโรคจึงมอบหมายให้ปลูกเบอร์รี่ตามที่รายงานก่อนหน้านี้