Reaction Mix: Template and PrimersT

Reaction Mix: Template and Primers
The proportions of the reaction mixture have a huge influence of the quality of PCR results. There is a general formula for concentrations of template, enzyme, primers and nucleotides to use, but this can be tweaked a little bit. Optimal primer concentrations are between 0.1 and 0.6 micromoles/L. The amount of template varies depending on the type of DNA (human, bacterial, plasmid). With very low amounts of template there are other strategies to improve results, like increased cycle numbers or use of "hot start". Always test new primers with a positive control reaction, to be sure they work under your specific experimental conditions.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผสมปฏิกิริยา: แม่และไพรเมอร์
สัดส่วนของผสมปฏิกิริยาที่มีอิทธิพลอย่างมากของคุณภาพของผล pcr มีสูตรทั่วไปความเข้มข้นของแม่เอนไซม์ไพรเมอร์และนิวคลีโอที่จะใช้ แต่นี้สามารถ tweaked เล็กน้อย ความเข้มข้นของไพรเมอร์ที่ดีที่สุดอยู่ระหว่าง 0.1 และ 0.6 micromoles / ลิตร จำนวนของแม่แบบแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับชนิดของดีเอ็นเอ (มนุษย์แบคทีเรียพลาสมิด) มีจำนวนที่ต่ำมากของแม่แบบมีกลยุทธ์อื่น ๆ ที่จะปรับปรุงผลเช่นเพิ่มจำนวนวงจรหรือการใช้ "เริ่มร้อน" เสมอทดสอบไพรเมอร์ใหม่ที่มีการควบคุมการเกิดปฏิกิริยาเชิงบวกเพื่อให้แน่ใจว่าพวกเขาทำงานภายใต้เงื่อนไขการทดลองที่เฉพาะเจาะจงของคุณ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ผสมปฏิกิริยา: แม่แบบและไพรเมอร์
สัดส่วนของส่วนผสมปฏิกิริยามีอิทธิพลมากของคุณภาพของผล PCR มีสูตรทั่วไปสำหรับความเข้มข้นของแม่ เอนไซม์ ไพรเมอร์ และนิวคลีโอไทด์เพื่อใช้ แต่นี้สามารถสามารถ tweaked หน่อย รองพื้นดีที่สุดความเข้มข้นอยู่ระหว่าง 0.1 ถึง 0.6 micromoles L. จำนวนแม่ที่แตกต่างกันไปตามชนิดของดีเอ็นเอ (มนุษย์ แบคทีเรีย plasmid) มีจำนวนต่ำมากแบบ มีกลยุทธ์อื่น ๆ เพื่อปรับปรุงผลลัพธ์ เช่นวงจรเพิ่มหมายเลขหรือการใช้ "เริ่มร้อน" ทดสอบใหม่ไพรเมอร์ ด้วยปฏิกิริยาบวกควบคุม ให้แน่ใจว่าพวกเขาทำงานภายใต้เงื่อนไขการทดลองที่เฉพาะ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผสมให้เข้ากันเทมเพลตการตอบสนอง primers สัดส่วน
ซึ่งจะช่วยได้และมีการผสมผสานกันระหว่างปฏิกริยาที่มีอิทธิพลขนาดใหญ่ที่มี คุณภาพ ของผล pcr. มีสูตรทั่วไปสำหรับความเข้มข้นของเอนไซม์มีเทมเพลต primers และกว้างขวางในการใช้แต่ในส่วนนี้สามารถต่างๆได้แก่เพียงเล็กน้อย สาขาวิชาเชื้อปะทุอย่างมี ประสิทธิภาพ จะอยู่ระหว่าง 0.1 และ 0.6 micromoles / L . จำนวนของแม่แบบจะแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับ ประเภท ของดีเอ็นเอ(ของมนุษย์plasmid ฆ่าเชื้อแบคมีเรีย) พร้อมด้วยปริมาณต่ำเป็นอย่างมากของเทมเพลตมีกลยุทธ์อื่นๆเพื่อปรับปรุงผลเหมือนใช้งานหรือหมายเลขการเพิ่มขึ้นของ"เริ่มร้อน" จะทดสอบปฏิกิริยา primers พร้อมด้วยการควบคุมในเชิงบวกที่จะแน่ใจว่าพวกเขาต้องทำงาน ภายใต้ เงื่อนไขทดลองเฉพาะของคุณ