with 15N-glycine (99 at % 15N, Aldrich Chemical Company, Inc.,
Delaware, USA) at a dose of 10 mg/kg BW through a fistula.
Barrows were maintained in metabolism cages for a 3-d
collection of urine under the same conditions as the N balance
period. Prior to isotope infusion, a urine sample was also
collected from each barrow for 12 h to determine background
enrichment of 15N in urinary urea.
2.3. Sample analysis
Feces collected during the N balance period were pooled,
freeze-dried and stored at 4 °C for N determination. Urine
collected was stored at−20 °C until analysis for N. Samples of
diet, urine and feces were analyzed for N content by Kjeldahl
method (AOAC, 1998). The N-retention was calculated by
minus N excretion (via feces and urine) from N intake. To
measure the 15N enrichment of urinary urea, a 10 ml urine
sample was converted into (NH4)2SO4 solution by Kjeldahl
method (AOAC, 1998). Then (NH4)2SO4 solution was transferred
to a titer plate, dried with a food dehydrator, recorded
and submitted for analysis of 15N enrichment by automated
mass spectrometry (Isotope Mass Spectrometer, Finnigan-
MAT 251).
2.4. Calculation of protein turnover
Whole-body protein turnover was calculated according to
the method used by Zhang et al. (2008). In brief, the
parameters were calculated using Plath's open three-pool
model with total nitrogen in urine as the end-product. In this
กับ 15N-ไกลซีน (99% ที่ 15N, ดิชเคมิคอล จำกัด , Inc,
เดลาแวร์, USA) ในขนาด 10 mg / kg BW ผ่านทวาร.
Barrows ถูกเก็บรักษาอยู่ในกรงสำหรับการเผาผลาญอาหารที่ 3-d
คอลเลกชันของปัสสาวะภายใต้ เงื่อนไขเดียวกับยอดเงินที่ยังไม่มี
ระยะเวลา ก่อนที่จะมีไอโซโทปแช่ตัวอย่างปัสสาวะก็ยัง
เก็บมาจากรถเข็นแต่ละเวลา 12 ชั่วโมงในการตรวจสอบพื้นหลัง
เพิ่มคุณค่าของ 15N ในยูเรียในปัสสาวะ.
2.3 การวิเคราะห์ตัวอย่าง
อุจจาระที่เก็บรวบรวมได้ในช่วงระยะเวลาสมดุลไนโตรเจนได้ถูกรวบรวม
แห้งและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสสำหรับความมุ่งมั่นไม่มี ปัสสาวะ
ที่เก็บรวบรวมเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 20 องศาเซลเซียสจนการวิเคราะห์ตัวอย่างของ N.
อาหารปัสสาวะและอุจจาระที่ได้มาวิเคราะห์เนื้อหาโดยไม่มี Kjeldahl
วิธี (AOAC, 1998) N-การเก็บรักษาที่คำนวณได้จาก
ลบขับถ่าย N (ผ่านทางอุจจาระและปัสสาวะ) จากการบริโภคยังไม่มี ในการ
วัดการตกแต่ง 15N ยูเรียในปัสสาวะ, ปัสสาวะ 10 มิลลิลิตร
ตัวอย่างถูกดัดแปลงเป็น (NH4) 2SO4 แก้ปัญหาโดย Kjeldahl
วิธี (AOAC, 1998) จากนั้น (NH4) 2SO4 วิธีการแก้ปัญหาที่ถูกย้าย
ไปยังจาน titer แห้งด้วยการขจัดน้ำออกอาหาร, บันทึก
และส่งสำหรับการวิเคราะห์การตกแต่ง 15N โดยอัตโนมัติ
มวลสาร (ไอโซโทปมวล Spectrometer, Finnigan-
MAT 251).
2.4 การคำนวณมูลค่าการซื้อขายโปรตีน
โปรตีนมูลค่าการซื้อขายทั้งร่างกายที่คำนวณตาม
วิธีการที่ใช้โดย Zhang et al, (2008) ในช่วงสั้น ๆ
พารามิเตอร์จะถูกคำนวณโดยใช้แพลเปิดสามสระว่ายน้ำ
รูปแบบที่มีไนโตรเจนทั้งหมดในปัสสาวะเป็น end ผลิตภัณฑ์ ในการนี้
การแปล กรุณารอสักครู่..
กับ 15 ไกลซีน ( 99 ที่อัลดริชเคมี 15N % , บริษัท , อิงค์ ,
เดลาแวร์ สหรัฐอเมริกา ) ในขนาด 10 มก. / กก. ที่ผ่านมี .
barrows ถูกเก็บรักษาไว้ในกรงการเผาผลาญสำหรับ 3-D
การเก็บปัสสาวะภายใต้เงื่อนไขเดียวกับ N สมดุล
ระยะเวลา ก่อนฉีดไอโซโทปตัวอย่างปัสสาวะยัง
เก็บจากแต่ละรถเข็นเป็นเวลา 12 ชั่วโมง เพื่อศึกษาภูมิหลังของยูเรียในปัสสาวะค่า 15N
.
2.3การเก็บตัวอย่างอุจจาระการวิเคราะห์
N ระยะเวลาในดุลเป็นพู
แช่แข็งและเก็บไว้ที่ 4 ° C N ความมุ่งมั่น เก็บปัสสาวะ
ถูกเก็บไว้ที่ 20 ° C ถึง−การวิเคราะห์ , ตัวอย่าง
อาหาร ปัสสาวะ และอุจจาระ วิเคราะห์ สำหรับ ความ โดยวิธีเจลดาห์ล
( โปรตีน , 1998 ) การ n-retention ถูกคำนวณโดย
ลบ N ( ผ่านการขับถ่ายอุจจาระและปัสสาวะ ) จาก N บริโภค
มาตรการเสริมใน 15 ของยูเรีย 10 มิลลิลิตร ลงในแปลงตัวอย่างปัสสาวะ
( NH4 ) โซลูชั่น 2so4 โดยวิธีเจลดาห์ล
( โปรตีน , 1998 ) แล้ว ( NH4 ) โซลูชั่น 2so4 โอน
เป็นจานชนิดแห้งกับอาหารแห้ง , บันทึกและวิเคราะห์ 15
ส่งเสริม โดยมวลสารอัตโนมัติ
( มวลไอโซโทปสเปกโตรมิเตอร์ ฟินนิกัน -
เสื่อ 251 ) .
2.4 . การคำนวณ
การหมุนเวียนโปรตีนการหมุนเวียนของโปรตีนทั้งร่างกายคำนวณตามวิธีที่ใช้โดย
Zhang et al . ( 2008 ) ในช่วงสั้น ๆ ,
พารามิเตอร์ถูกคำนวณโดยใช้แพลทเปิดสามสระ
นางแบบกับไนโตรเจนในปัสสาวะเป็นสินค้าที่สิ้นสุด ในนี้
การแปล กรุณารอสักครู่..