isolationAfter purification, the EL

isolationAfter purification, the ELP-rich fraction (Fig. 1C, lane 1) wasresuspended in different pH cleavage solutions and incubatedunder different conditions for C-terminal cleavage analysis (Fig. 2).Total intein activation, represented by an increase in ELP bandmigration, was observed in 24 h for pH 5.5 at 25 and 30◦C. In48 h activation was complete at pH 5 and 5.5 at 19, 25 and 30◦C,and at pH 6.5 and 7 at 30◦C. The condition of pH 5.5, 25◦C for24 h was chosen to be applied to the subsequent analysis since inthose conditions intein self-cleavage was achieved faster and atroom temperature. After intein activation 3 M NaCl was added tosamples followed by incubation at 30◦C/10 min and spun for ELPremoval. The supernatant containing residual-free Pa-MAP 2 wasthen lyophilized and analyzed by mass spectrometry, where a peakof 2,517.95 m/z was observed (Fig. 3).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

isolationAfter ฟอก wasresuspended เศษส่วน (รูปที่ 1C เลน 1) ELP ริชในแก้ปัญหาความแตกแยกค่า pH แตกต่างกันและเงื่อนไขแตกต่างกัน incubatedunder สำหรับการวิเคราะห์ความแตกแยกขั้ว C (2 รูป) เปิดใช้งาน intein รวม แสดง โดยการเพิ่ม ELP bandmigration พบว่า ใน 24 ชั่วโมงสำหรับค่า pH 5.5 ที่ 25 และ 30◦C เปิดใช้งาน In48 h เสร็จที่ pH 5 และ 5.5 ที่ 19, 25 และ 30◦C และ ที่ pH 6.5 และ 7 ที่ 30◦C สภาพของ pH 5.5, 25◦C for24 h เลือกที่จะใช้กับการวิเคราะห์ตามมาตั้งแต่ inthose เงื่อนไข intein ตนเองความแตกแยกสำเร็จได้เร็วและอุณหภูมิ atroom หลังจากเปิดใช้งาน intein 3 M NaCl ถูก tosamples ตาม ด้วยการบ่มที่ 30◦C 10 นาที และปั่นสำหรับ ELPremoval Supernatant ที่ประกอบด้วยฟรีเหลือ 2 Pa-แผนที่ wasthen lyophilized และวิเคราะห์ โดยรเมท peakof 2,517.95 m/z พบว่า (3 รูป)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

isolationAfter บริสุทธิ์ที่ ELP ที่อุดมไปด้วยส่วน (รูป. 1C เลน 1) wasresuspended ในการแก้ปัญหาค่า pH ความแตกแยกแตกต่างกันและ incubatedunder เงื่อนไขที่แตกต่างสำหรับการวิเคราะห์ความแตกแยก c- ขั้ว (รูปที่. 2) .Total intein เปิดใช้งานแทนโดยการเพิ่มขึ้นของ ELP bandmigration, พบว่าใน 24 ชั่วโมงสำหรับค่า pH 5.5 ที่ 25 และ30◦C การเปิดใช้งาน H In48 เสร็จสมบูรณ์ที่ pH 5 และ 5.5 ณ วันที่ 19, 25 และ30◦Cและที่ pH 6.5 และ 7 ใน30◦C สภาพของค่า pH 5.5 25◦C for24 H ได้รับเลือกให้นำไปใช้ในการวิเคราะห์ที่ตามมาตั้งแต่เงื่อนไข inthose intein ตนเองความแตกแยกก็ประสบความสำเร็จได้เร็วขึ้นและอุณหภูมิ atroom หลังจากที่เปิดใช้งาน intein 3 M NaCl ถูกเพิ่ม tosamples ตามด้วยการบ่มที่30◦C / 10 นาทีและปั่น ELPremoval สารละลายที่มีเหลือฟรี Pa-MAP 2 wasthen แห้งและวิเคราะห์โดยมวลสารที่ peakof 2,517.95 M / z เป็นข้อสังเกต (รูปที่. 3)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

isolationafter บริสุทธิ์ , ELP รวยเศษส่วน ( ภาพที่ 1c ซอย 1 ) wasresuspended ในการแก้ปัญหาความแตกแยก pH ที่แตกต่างกันและแตกต่างกัน incubatedunder เงื่อนไขสำหรับการวิเคราะห์การ ( รูปที่ 2 ) ซึ่งการเปิดใช้งานอินทีอินทั้งหมดแทนโดยการเพิ่ม bandmigration ELP , 24 ชั่วโมงพบว่า pH 5.5 ที่ 25 และ 30 ◦ C in48 H กระตุ้นคือสมบูรณ์ ที่พีเอช 5 และ 5.5 ที่ 20 , 25 และ 30 ◦ C และที่พีเอช 6.5 และ 7 ที่ 30 ◦ C สภาพ pH 5.5 , 25 ◦ C for24 H ก็เลือกที่จะใช้กับการวิเคราะห์ที่ตามมาตั้งแต่ inthose เงื่อนไขด้วยตนเองมีความเร็วและการอินทีอิน atroom อุณหภูมิ หลังจากเปิดใช้งานอินทีอิน 3 M NaCl เป็น tosamples เพิ่มตามบ่มที่ 30 ◦ C / 10 นาทีปั่นสำหรับ elpremoval . ที่นำแผนที่ที่มีป่าฟรีที่เหลือ 2 และแห้งและนำมวลสารที่ peakof 2517.95 M / Z ) ( รูปที่ 3 )