2. Materials and methods
2.1. Meat sample
Fifteen birds (72 week old, White Leghorn spent hens) were
obtained separately for each batch. A total of 45 birds were used for
this study. Fifteen birds were used for each replication. Fresh breast
muscles were obtained from spent hens slaughtered by the traditional
halal method, deboned manually in a commercial poultry processing
unit and brought to the lab within half an hour.
2.2. Preparation of pomegranate fruit juice phenolics (PFJP)
Fresh pomegranate fruits (Punica granatum) (Kabul variety)
obtained from local super markets were washed and cut into four
pieces. The seeds/arils were separated manually and the pulp was
separated from seed. The pulp was mixed with 70% ice cold acetone
(acetone:water; 70:30 v/v) in the ratio of 1:5 and extracted by
homogenizing for three times with 30 s bursts at 10,000 rpm and
filtered through 4 layers of muslin cloth. The filtrate was placed in
separating funnel and was extracted with equal amount of diethyl
ether to remove lipids and other pigmets. The aqueous extract
containing phenolics was collected in lower portion and the
procedure was repeated 4-times. The acetone in aqueous phase was
evaporated in vacco (Model: HS 3001, Hahnshin Scientific Co., South
Korea) and then the aqueous extract was used in the dipping solution
after determining the antioxidant and protein precipitating capacity
of PFJP in the extract.
2.2.1. Measurement of total phenolics
The total phenolics in PFJP were quantified by the method
described by Makkar (2003). Briefly, suitable aliquots of extracts
were taken in a test tube and the volume was made to 0.5 ml with
distilled water followed by the addition of 0.25 ml Folin-Ciocalteu
(1 N) reagent and 1.25 ml sodium carbonate solution (20%). The tubes
were vortexed and the absorbance was recorded at 725 nm (Model:
UV–VIS 1700 Shimadzu, Japan) after 40 min. The amount of total
phenolics was calculated as tannic acid equivalent from the
calibration curve using standard tannic acid solution (0.1 mg/ml).
2.2.2. Measurement of reducing power
The reducing power was quantified by the method described by
Jayaprakasha, Singh, and Sakariah (2001). The 50–250 μg phenolics
from PFJP was mixed with 2.5 ml phosphate buffer (200 μM, pH 6.6)
and incubated with 2.5 ml potassium ferricyanide (1% w/v) at 50 ° C
for 20 min. At the end of incubation, 2.5 ml of 10% trichloroacetic acid
solution was added and the samples were centrifuged at 9700 g for
10 min. The supernatant (2.5 ml) was mixed with 2.5 ml distilled
water and 0.5 ml ferric chloride (0.1% w/v) solution. The absorbance
was measured at 700 nm (Model: Model: UV–VIS1700 Shimadzu,
Japan). Increase in absorbance of the reaction indicated the reducing
power of the sample.
2.2.3. DPPH radical scavenging activity
The ability to scavenge 1,1-diphenyl 1-2-picrylhydrazyl (DPPH)
radical by PFJP was estimated by the method of Singh, Murthy, and
Jayaprakasha (2002). The PFJP 50–250 μg diluted with 0.1 M Tris–HCl
buffer (pH 7.4) was mixed with 1 ml of DPPH (250 lM) with vigorous
shaking. The reaction mixture was stored in the dark at room
temperature for 20 min and the absorbance was measured at 517 nm
2. วัสดุและวิธีการ
2.1 ตัวอย่างเนื้อสัตว์สิบห้านก (72 สัปดาห์เก่าสีขาวฮอนใช้เวลาไก่) กำลังได้รับแยกต่างหากสำหรับแต่ละชุด ทั้งหมด 45 นกถูกนำมาใช้สำหรับการศึกษาครั้งนี้ สิบห้านกถูกนำมาใช้สำหรับการจำลองแบบแต่ละ เต้านมสดกล้ามเนื้อได้รับจากแม่ไก่ฆ่าโดยการใช้จ่ายแบบดั้งเดิมวิธีการฮาลาล, แยกกระดูกด้วยตนเองในการประมวลผลสัตว์ปีกเชิงพาณิชย์หน่วยและนำไปห้องปฏิบัติการภายในครึ่งชั่วโมง. 2.2 เตรียมความพร้อมของฟีนอลน้ำผลไม้ทับทิม (PFJP) ผลไม้สดทับทิม (Punica granatum) (กรุงคาบูลหลากหลาย) ที่ได้รับจากตลาดซุปเปอร์ท้องถิ่นถูกล้างและหั่นเป็นสี่ชิ้น เมล็ด / arils ถูกแยกออกด้วยตนเองและเยื่อกระดาษที่ถูกแยกออกมาจากเมล็ด เยื่อกระดาษที่ได้รับการผสมกับน้ำแข็ง 70% อะซีโตนเย็น(อะซิโตน: น้ำ 70:30 v / v) ในอัตราส่วน 1: 5 และสกัดโดยการผสมยางสามครั้งด้วยระเบิด30 วินาทีที่ 10,000 รอบต่อนาทีและกรองผ่านชั้น4 ของมัสลิน ผ้า. กรองถูกวางไว้ในการแยกช่องทางและถูกสกัดด้วยเงินจำนวนเท่ากัน diethyl อีเทอร์เพื่อเอาไขมันและ pigmets อื่น ๆ สารสกัดที่มีฟีนอลที่ถูกเก็บรวบรวมในส่วนล่างและขั้นตอนซ้ำ4 ครั้ง อะซีโตนในเฟสน้ำได้ระเหยใน vacco (แบบ: HS 3001, Hahnshin วิทยาศาสตร์ Co. , ใต้เกาหลี) และจากนั้นสารสกัดน้ำถูกนำมาใช้ในการแก้ปัญหาจุ่มหลังจากระบุว่าสารต้านอนุมูลอิสระและโปรตีนทำให้เกิดความวุ่นวายกำลังการผลิต. ของ PFJP ในสารสกัด 2.2 1 วัดฟีนอลรวมฟีนอลรวมใน PFJP ถูกวัดโดยวิธีการอธิบายโดยMakkar (2003) สั้น ๆ , aliquots ที่เหมาะสมของสารสกัดถูกถ่ายในหลอดทดลองและปริมาณที่จะ0.5 มล. กับน้ำกลั่นตามด้วยนอกเหนือจาก0.25 มล. Folin-Ciocalteu (1 N) น้ำยาและ 1.25 มิลลิลิตรสารละลายโซเดียมคาร์บอเนต (20%) หลอดได้รับการ vortex และการดูดกลืนแสงที่ถูกบันทึกไว้ที่ 725 นาโนเมตร (แบบ: UV-VIS 1700 Shimadzu, ญี่ปุ่น) หลังจาก 40 นาที จำนวนเงินของการรวมฟีนอลที่คำนวณได้เท่ากับกรดแทนนิคจากกราฟมาตรฐานใช้วิธีกรดแทนนิคมาตรฐาน(0.1 mg / ml). 2.2.2 วัดของการลดการใช้พลังงานพลังงานลดถูกวัดโดยวิธีการที่อธิบายโดยJayaprakasha ซิงห์และ Sakariah (2001) 50-250 ไมโครกรัมฟีนอลจากPFJP ผสมกับฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 2.5 มล. (200 ไมครอนมีค่า pH 6.6) และบ่ม 2.5 มล. โพแทสเซียม ferricyanide (1% w / v) ที่ 50 องศาเซลเซียสเป็นเวลา20 นาที ในตอนท้ายของการบ่ม 2.5 มล. 10% กรดไตรคลอโรทางออกที่ถูกเพิ่มเข้ามาและตัวอย่างที่ถูกหมุนเหวี่ยงที่9,700 กรัมสำหรับ10 นาที สารละลาย (2.5 มล.) ผสมกับ 2.5 มลกลั่นน้ำและ0.5 มล. เฟอริกคลอไรด์ (0.1% w / v) การแก้ปัญหา ดูดกลืนแสงวัดที่ 700 นาโนเมตร (รุ่น: รุ่น: UV-VIS1700 Shimadzu, ญี่ปุ่น) การเพิ่มขึ้นของการดูดกลืนแสงของการเกิดปฏิกิริยาที่ระบุลดอำนาจของกลุ่มตัวอย่าง. 2.2.3 DPPH กิจกรรมต้านอนุมูลความสามารถในการไล่1,1-diphenyl 1-2-picrylhydrazyl (DPPH) จากเดิมอย่างสิ้นเชิงโดย PFJP เป็นที่คาดกันโดยวิธีการซิงห์ Murthy และJayaprakasha (2002) PFJP 50-250 ไมโครกรัมเจือจางด้วย 0.1 M Tris-HCl บัฟเฟอร์ (pH 7.4) ผสมกับ 1 มิลลิลิตรของ DPPH (250 LM) มีพลังสั่น ผสมปฏิกิริยาถูกเก็บไว้ในที่มืดที่ห้องอุณหภูมิ 20 นาทีและการดูดกลืนแสงที่ถูกวัดที่ 517 นาโนเมตร
การแปล กรุณารอสักครู่..
