4. Motile export sitesIt has been s

4. Motile export sites

It has been suggested that in certain plant tissues, due to the close proximity of Golgi and ER ( Brandizzi et al., 2002b), that the individual Golgi stacks may be directly associated with the















Fig. 4 Fluorescence recovery after photobleaching shows transport of ST-GFP into a bleached Golgi stack in a tobacco leaf epidermal cell. Time is given in seconds on the micrographs and on the x-axis.



ER, thus forming a motile secretory complex that can move over the surface of, or within the ER membrane (Neumann et al., 2003). Recently we have shown that a Sar1p fluorescent protein chimera when expressed in tobacco leaves locates on the ER surface together with individual Golgi stacks and moves in tandem with the Golgi over the ER (daSilva et al.,
2004). Interestingly, a GTP-bound mutant of Sar1p tagged with GFP, which is predicted to cycle more slowly from the export sites, located to motile punctate structures associated with the ER and colocalised with coexpressed Golgi targeted constructs. Over expression of this construct both inhibited export of a secretory form of GFP from the ER and also resulted in the disappearance of fluorescent protein labelled Golgi, again suggesting that membrane proteins in the Golgi cycle from the organelle.
Being the first protein to associate at sites of COPII coat formation, Sar1p is a good indicator of export sites which appear to be spatially located in the vicinity of the Golgi. The conclusion from this work is that perhaps in plants COPII coat components are needed for cargo accumulation and maybe for regulating export out of the ER, but not necessarily for forming discrete transport vesicles. However, the exact molecular architecture of the ER /Golgi interface has yet to be determined.


5. The making of a Golgi stack

The events at the ER exit site may become clearer if consideration is given to the nature of Golgi stack formation. The biogenesis of individual Golgi stacks and the Golgi apparatus as a whole has, to say the least, been a controversial topic. Does the Golgi divide prior to mitosis and cell division or can the cell generate new Golgi from the ER? A detailed study of exit sites on the ER has provided us with some clues.
In mammalian cells two schools of thought exist as to the partioning of the Golgi during mitosis. It is clear that the peri- nuclear Golgi ribbon is dispersed around the cell, but whether this is as vesicles distributed in the cytosol or whether the

whole structure is reabsorbed into the ER is still a contentious issue (Shorter & Warren, 2002). The latter theory then depends on the Golgi reforming from the activity of specific exit sites on the ER which produces vesicular tubular clusters which in turn migrate in a microtubule dependent manner to the perinuclear region where they form the new Golgi ribbon (Zaal et al., 1999). However, in plants it is clear that the indi- vidual stacks remain intact during all phases of the cell cycle and that they partition between daughter cells during mitosis (Nebenführ et al., 2000), although it is not clear at what stage during the cell cycle the Golgi stacks duplicate or increase in number.
The ability of the mammalian ER to generate Golgi de novo, has become clear from experiments based on the disrup- tion of the Golgi ribbon with the microtubule depolymerising drug nocodazole (Cole et al., 1996; Yang & Storrie, 1998). On depolymerisation of the cytoplasmic microtubules it is well known that the mammalian Golgi ribbon breaks down and appears to become dispersed throughout the cytoplasm in the form of mini-cisternal stacks, resembling the plant Golgi apparatus. However, it has been demonstrated that these mini-stacks are not directly formed from the breakdown of the perinuclear Golgi ribbon. In an elegant experiment, Zaal et al. (1999) photobleached the Golgi ribbon in CHO cells expressing a galactosyl transferasease-GFP (GalTase-GFP) soon after nocodazole treatment. Under these conditions fluorescent mini-stacks formed at ER exit sites and there was no recovery of fluorescence of the main Golgi ribbon. This suggests that Golgi can assemble de novo at ER exit sites by the production of Golgi intermediates and in the absence of microtubules these can no longer be transported to the perinuclear ribbon.
De novo biogenesis of Golgi stacks has also been observed in the yeast Pichia pastoris where ER exit sites marked by the COPII coat protein Sec13 tagged with GFP were observed to grow from small fluorescent spots on the ER. It is thought that new Golgi cisternae are formed from budding vesicles at these exit sites (Bevis et al., 2002). It has also been shown that in the



absence of the actin cytoskeleton, ER in a young P. pastoris bud can generate a Golgi stack (B. Glick, pers. comm.). Thus partitioning of the existing Golgi apparatus is not necessary for successful bud formation in this yeast. It is interesting to note that in P. pastoris the proteins necessary for the formation of ER exit sites, including the Sar1p exchange factor Sec12p, colocate near the Golgi stacks which are relatively immobile in the cell.
In higher plants, as described previously, the ER has the capacity to regenerate Golgi after BFA treatment, even in the absence of any cytoskeleton and protein synthesis (Saint-Jore et al., 2002), and the Golgi appear to be intimately associated with the ER export sites (daSilva et al., 2004). The main dif- ference between the yeast P. pastoris and the plant Golgi appears to be the high mobility of the latter, which is perhaps reflected in the distribution of a transiently expressed Sec12- GFP construct over the whole surface of the ER, so that Sar1p activation can occur when necessary (daSilva et al., 2004). Interestingly, in the yeast Saccharomyces cerevisiae, which has dispersed individual Golgi cisternae, Sec12 is also distributed over the whole ER network (Rossanese et al., 1999). As in yeast and mammalian cells Golgi can arise de novo from the ER, it is tempting to speculate that the biogenesis of plant Golgi stacks may be by a similar mechanism. Thus, when a cell needs to increase its secretory activity or double its Golgi stack complement premitosis, new stacks can be generated from the ER by the formation of new exit sites.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

4. อเมริกาส่งออก motileมันได้ถูกแนะนำว่า ในบางเนื้อเยื่อพืช จากชิดของ Golgi และ ER (Brandizzi et al., 2002b), ว่า Golgi แต่ละกองอาจจะเชื่อมโยงโดยตรงกับการ Fig. 4 Fluorescence กู้หลังจาก photobleaching แสดงขนส่ง ST GFP เป็นกอง Golgi เซลในเซลล์ epidermal ใบยาสูบ ได้เวลาเป็นวินาที micrographs และ บนแกน x เอ้อ จึงขึ้นรูปซับซ้อน secretory motile ที่สามารถเคลื่อนย้ายผ่านพื้นผิวของ หรือภาย ในเมมเบรน ER (Neumann et al., 2003) เมื่อเร็ว ๆ นี้ เราได้แสดง Sar1p ชิเมร่าโปรตีนเรืองแสงเมื่อแสดงในยาสูบใบตั้งอยู่บนพื้นผิวของ ER พร้อมกอง Golgi ละ และย้ายคือ Golgi ที่ผ่าน ER (ฎะซิลวา et al.,2004) นั้นเป็นเรื่องน่าสนใจ mutant GTP ผูกของแท็ก มี GFP ซึ่งคาดว่า จะวนช้าลงจากอเมริกาส่งออก ตั้งอยู่ในโครงสร้าง punctate motile สัมพันธ์กับ ER และ colocalised กับ coexpressed Golgi Sar1p เป้าหมายโครงสร้าง ผ่านของโครงสร้างนี้ ทั้งห้ามส่งออกฟอร์ม secretory ของ GFP จาก ER และยัง มีผลในการสูญหายของโปรตีนมัน Golgi อีก แนะนำว่า โปรตีนเมมเบรนใน Golgi วนจากออร์แกเนลล์เรืองแสงเป็นโปรตีนแรกการเชื่อมโยงที่เว็บไซต์ของผู้แต่งตรา COPII, Sar1p เป็นตัวบ่งชี้ที่ดีของอเมริกาส่งออกซึ่งจะอยู่ตั้ง Golgi spatially บทสรุปจากการทำงานนี้อยู่ที่บางทีพืช COPII ตราคอมโพเนนต์จำเป็น สำหรับสินค้าสะสม และอาจควบคุมการส่งออกจาก ER แต่ไม่จำเป็น สำหรับขึ้นรูปแยกกันขนส่งอสุจิ อย่างไรก็ตาม สถาปัตยกรรมโมเลกุลแน่นอนของอินเทอร์เฟซ ER /Golgi ยังสามารถกำหนด5.ทำกองซ้อน Golgiเหตุการณ์ที่ ER ออกไซต์อาจพิจารณาให้ธรรมชาติของ Golgi กองก่อตัวชัดเจน Biogenesis Golgi แต่ละกองและลจิทั้งหมด จะ ได้หัวข้อแย้ง ไม่ Golgi แบ่งก่อนไมโทซิสและการแบ่งเซลล์ หรือเซลล์สร้าง Golgi ใหม่จาก ER การศึกษารายละเอียดของไซต์ออกจาก ER ได้ให้เรา มีปมบางอย่างในเซลล์ mammalian สองโรงเรียนคิดอยู่กับ partioning ของ Golgi ที่ในไมโทซิส เป็นที่ชัดเจนว่า peri - นิวเคลียร์ Golgi ribbon เป็นกระจายทั่วเซลล์ แต่ว่านี่เป็นอสุจิที่กระจายในไซโตซอล หรือว่า โครงสร้างทั้งหมดเป็น reabsorbed เป็น ER ยังคงเป็นปัญหาโต้เถียง (Shorter และวอร์เรน 2002) ทฤษฎีหลังจากนั้นขึ้นอยู่กับ Golgi ปฏิรูปจากกิจกรรมของอเมริกาออกเฉพาะใน ER ซึ่งสร้างคลัสเตอร์ท่อ vesicular ซึ่งจะย้ายได้อย่างอิสระไมโครทิวบูลมา perinuclear ที่พวกเขาฟอร์มใหม่ Golgi ribbon (Zaal et al., 1999) อย่างไรก็ตาม ในพืช เป็นที่ชัดเจนว่า กอง indi vidual ยังคงเหมือนเดิมในระหว่างขั้นตอนทั้งหมดของวงจรเซลล์ และว่า จะแบ่งพาร์ติชันระหว่างลูกสาวเซลล์ในไมโทซิส (Nebenführ et al., 2000), แม้ว่าจะไม่ชัดเจนในขั้นตอนใดในระหว่างวงจรการเซลล์กอง Golgi ซ้ำ หรือเพิ่มจำนวนความสามารถของ mammalian ER สร้าง Golgi de novo กลายเป็นชัดเจนจากทดลองตาม disrup-สเตรชันของ Golgi ribbon ด้วยการไมโครทิวบูล depolymerising ยา nocodazole (โคล et al., 1996 ยาง & Storrie, 1998) บน depolymerisation cytoplasmic microtubules ได้รู้จักว่า mammalian Golgi ribbon แบ่ง และปรากฏเป็นกระจายทั่วไซโทพลาซึมในรูปของกอง cisternal มินิ คล้ายพืชกอลจิคอมเพล็กซ์ อย่างไรก็ตาม มันได้ถูกแสดงว่า กองขนาดเล็กเหล่านี้จะไม่โดยตรงเกิดขึ้นจากการแบ่ง perinuclear Golgi ริบบิ้น ในการทดลองบริการ photobleached Zaal et al. (1999) ribbon Golgi ในช่อเซลล์แสดงเป็น galactosyl transferasease-GFP (GalTase-GFP) เร็ว ๆ นี้หลังจากรักษา nocodazole ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้เรืองแสงขนาดเล็กกองเกิดที่ ER ออกจากอเมริกา และมีการฟื้นตัวของ fluorescence ริบบิ้น Golgi หลัก แนะนำว่า Golgi สามารถประกอบ de novo ที่ ER ออกไซต์ โดยผลิต ของ Golgi intermediates และของ microtubules นี้สามารถไม่สามารถขนส่งไป perinuclear ribbonนอกจากนี้ยังได้พบ de novo biogenesis ของ Golgi กองในยีสต์ Pichia pastoris ที่มีไซต์ออกจาก ER ที่ทำเครื่องหมาย โดยโปรตีนตรา COPII Sec13 แท็ก มี GFP สุภัคเติบโตจากจุดเล็ก ๆ เรืองแสงบน ER มันเป็นความคิดที่ว่า cisternae Golgi ใหม่จะเกิดขึ้นจากโตอสุจิที่เหล่านี้ออกจากเว็บไซต์ (Bevis et al., 2002) มันมีแล้วแสดงว่าการ การขาดงานของ cytoskeleton แอกติน ER ในดอกตูม P. pastoris หนุ่มสามารถสร้างกอง Golgi (Glick B. อาทิสื่อ) พาร์ทิชันของลจิอยู่จึง ไม่จำเป็นต้องก่อตาประสบความสำเร็จในยีสต์นี้ น่าสนใจให้ทราบว่า ใน P. pastoris โปรตีนจำเป็นสำหรับการก่อตัวของ ER ออก ไซต์ รวมทั้งอัตราแลกเปลี่ยน Sar1p Sec12p, colocate ใกล้กอง Golgi ซึ่งค่อนข้าง immobile ในเซลล์ได้ในพืชที่สูง ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ER มีความสามารถในการสร้าง Golgi หลังรักษา BFA แม้ในการขาดงานของสังเคราะห์ใด ๆ cytoskeleton และโปรตีน (Jore เซนต์เอ็ด al., 2002), และ Golgi ปรากฏจึงเชื่อมโยงกับเว็บไซต์ส่ง ER (ฎะซิลวา et al., 2004) Dif-ference หลักระหว่างยีสต์ P. pastoris และพืช Golgi ปรากฏจะ เคลื่อนสูงของหลัง ซึ่งอาจจะสะท้อนออกมาในการกระจายการสร้าง Sec12 - GFP transiently แสดงผ่านพื้นผิวทั้งหมดของ ER เพื่อให้เปิดใช้งาน Sar1p สามารถเกิดขึ้นได้เมื่อจำเป็น (ฎะซิลวา et al., 2004) เป็นเรื่องน่าสนใจ ในยีสต์ Saccharomyces cerevisiae ซึ่งได้กระจายแต่ละ Golgi cisternae, Sec12 ยังกระจายเครือข่าย ER ทั้ง (Rossanese et al., 1999) ในยีสต์และเซลล์ mammalian Golgi สามารถเกิด de novo จาก ER จะดึงดูดการคาดการณ์ว่า biogenesis Golgi กองโรงงานอาจ โดยกลไกคล้ายกัน ดังนั้น เมื่อเซลล์ต้องการเพิ่มกิจกรรมของ secretory หรือคู่ของ Golgi กองเสริม premitosis กองใหม่สามารถสร้างได้จาก ER ที่ โดยการก่อตัวของอเมริกาออกใหม่นั้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

4. การส่งออก Motile เว็บไซต์จะได้รับการชี้ให้เห็นว่าในเนื้อเยื่อพืชบางอย่างเนื่องจากใกล้กอลไจและ ER (Brandizzi et al., 2002b) ที่กองกอลไจแต่ละคนอาจจะมีความสัมพันธ์โดยตรงกับรูป 4 การกู้คืนเรืองแสงหลังจาก photobleaching แสดงให้เห็นว่าการขนส่งของ ST-GFP เป็นกองกอลไจฟอกขาวในใบยาสูบเซลล์ผิวหนัง เวลาจะได้รับในวินาทีบนกล้องจุลทรรศน์และแกน x. ER จึงสร้างที่ซับซ้อนหลั่งเคลื่อนที่ที่สามารถย้ายไปพื้นผิวของหรือภายในเยื่อ ER (นอยมันน์ et al., 2003) เมื่อเร็ว ๆ นี้เราได้แสดงให้เห็นว่าความฝันโปรตีนเรืองแสง Sar1p เมื่อแสดงในใบยาสูบตั้งอยู่ที่บนพื้นผิว ER ร่วมกับกองกอลไจบุคคลและการเคลื่อนไหวควบคู่ไปกับกอลไจกว่า ER (Dasilva et al., 2004) ที่น่าสนใจกลายพันธุ์ฉี่ผูกพันของ Sar1p ติดแท็กด้วย GFP ซึ่งคาดว่าจะรอบช้ากว่าการส่งออกจากเว็บไซต์ที่ตั้งอยู่ทางเคลื่อนที่โครงสร้าง punctate เกี่ยวข้องกับ ER และ colocalised กับ coexpressed กอลไจกำหนดเป้าหมายสร้าง กว่าการแสดงออกของทั้งสองนี้สร้างยับยั้งการส่งออกของแบบฟอร์มการหลั่งของ GFP จาก ER และยังส่งผลในการหายตัวไปของโปรตีนเรืองแสงกอลไจที่มีข้อความอีกครั้งบอกว่าโปรตีนในรอบกอลไจจาก organelle. เป็นโปรตีนแรกที่จะเชื่อมโยงที่เว็บไซต์ ของ COPII ก่อเสื้อ Sar1p เป็นตัวบ่งชี้ที่ดีของสถานที่การส่งออกที่ปรากฏที่จะตั้งอยู่เชิงพื้นที่ในบริเวณใกล้เคียงของกอลไจ ข้อสรุปจากการทำงานนี้คือว่าบางทีในโรงงานเด็กเสื้อส่วนประกอบที่จำเป็นสำหรับการสะสมสินค้าและบางทีในการควบคุมการส่งออกจาก ER แต่ไม่จำเป็นต้องสำหรับการขึ้นรูปถุงขนส่งที่ไม่ต่อเนื่อง แต่ที่แน่นอนสถาปัตยกรรมโมเลกุลของ ER / อินเตอร์เฟซกอลไจยังไม่ได้รับการพิจารณา. 5 การทำสแต็คกอลไจเหตุการณ์ที่เว็บไซต์ออก ER อาจจะกลายเป็นที่ชัดเจนหากพิจารณาถึงลักษณะของการก่อสแต็คกอลไจ biogenesis ของกองกอลไจบุคคลและกอลไจอุปกรณ์โดยรวมมีการบอกว่าอย่างน้อยเป็นหัวข้อที่ถกเถียงกัน ไม่แบ่งกอลไจก่อนที่จะมีเซลล์และการแบ่งเซลล์หรือเซลล์สามารถสร้างกอลไจใหม่จาก ER? ศึกษารายละเอียดของสถานที่ออกใน ER ได้ให้เรามีปมบางอย่าง. ในเซลล์สัตว์สองโรงเรียนที่คิดอยู่ในฐานะที่จะ partioning ของกอลไจระหว่างเซลล์ เป็นที่ชัดเจนว่าริบบิ้นกอลไจนิวเคลียร์ของเหลวก็แยกย้ายกันไปรอบเซลล์ แต่ไม่ว่านี้จะเป็นถุงกระจายอยู่ในเซลล์หรือว่าโครงสร้างทั้งหมดถูกดูดซึมกลับเข้าไปใน ER ยังคงเป็นประเด็นที่ถกเถียงกัน (สั้นและวอร์เรน, 2002) ทฤษฎีหลังนั้นขึ้นอยู่กับกอลไจปฏิรูปจากการดำเนินกิจกรรมของเว็บไซต์ทางออกที่เฉพาะเจาะจงใน ER ซึ่งเป็นผู้ผลิตกลุ่มท่อตุ่มซึ่งจะโยกย้ายใน microtubule ลักษณะขึ้นอยู่กับภูมิภาค perinuclear ที่พวกเขาในรูปแบบริบบิ้นกอลไจใหม่ (ซาว์ et al., 1999) อย่างไรก็ตามในพืชเป็นที่ชัดเจนว่ากองของบุคคลยังคงเหมือนเดิมในระหว่างการทุกขั้นตอนของวงจรมือถือและที่พวกเขาแบ่งพาร์ติชันระหว่างเซลล์ลูกสาวระหว่างเซลล์ (Nebenführ et al., 2000) ถึงแม้ว่ามันจะไม่ชัดเจนในสิ่งที่เวทีระหว่าง วัฏจักรของเซลล์กองกอลไจซ้ำหรือเพิ่มขึ้นในจำนวน. ความสามารถในการเลี้ยงลูกด้วยนม ER เพื่อสร้างกอลไจโนโวได้กลายเป็นที่ชัดเจนจากการทดลองอยู่บนพื้นฐานของการ disrup- ของริบบิ้นกอลไจกับ microtubule depolymerising ยาเสพติด nocodazole (โคล et al., 1996; & ยาง Storrie, 1998) ใน depolymerisation ของ microtubules นิวเคลียสเป็นที่รู้จักกันดีว่าการแบ่งริบบิ้นกอลไจเลี้ยงลูกด้วยนมลงและดูเหมือนจะกลายเป็นที่แพร่ระบาดไปทั่ว cytoplasm ในรูปแบบของกองมินิ cisternal คล้ายพืชกอลไจอุปกรณ์ แต่จะได้รับการแสดงให้เห็นว่าสิ่งเหล่านี้กองขนาดเล็กจะไม่ได้เกิดขึ้นโดยตรงจากการสลายของริบบิ้นกอลไจ perinuclear ในการทดลองที่สง่างาม, ซาว์และคณะ (1999) photobleached ริบบิ้นกอลไจในเซลล์ CHO แสดง galactosyl transferasease-GFP (GalTase-GFP) เร็ว ๆ นี้หลังการรักษา nocodazole ภายใต้เงื่อนไขเหล่ากองมินิเรืองแสงที่เกิดขึ้นที่เว็บไซต์ ER ออกและมีการฟื้นตัวของการเรืองแสงของริบบิ้นกอลไจหลักไม่มี นี้แสดงให้เห็นว่าสามารถรวบรวมกอลไจโนโวที่ ER เว็บไซต์ออกจากการผลิตของตัวกลางกอลไจและในกรณีที่ไม่มี microtubules เหล่านี้ไม่สามารถจะส่งไปยังริบบิ้น perinuclear. โนโวเด biogenesis ของกองกอลไจยังได้รับการตั้งข้อสังเกตในยีสต์ Pichia pastoris ที่ ER เว็บไซต์ออกจากการทำเครื่องหมายด้วยเสื้อโปรตีน COPII Sec13 ติดแท็กด้วย GFP ถูกตั้งข้อสังเกตว่าจะเติบโตจากจุดเรืองแสงเล็ก ๆ บน ER มันเป็นความคิดที่ cisternae กอลไจใหม่จะถูกสร้างขึ้นมาจากถุงรุ่นที่เว็บไซต์เหล่านี้ออกจาก (Bevis et al., 2002) นอกจากนี้ยังได้รับการแสดงให้เห็นว่าในกรณีที่ไม่มีโครงร่างโปรตีน, ER ในหนุ่ม P. pastoris ตาสามารถสร้างสแต็คกอลไจ (บีกลิก, ข่าวสาร. COMM.) ดังนั้นการแบ่งของกอลไจอุปกรณ์ที่มีอยู่แล้วไม่จำเป็นสำหรับการก่อตาประสบความสำเร็จในยีสต์นี้ เป็นที่น่าสนใจที่จะทราบว่าใน P. pastoris โปรตีนที่จำเป็นสำหรับการก่อตัวของเว็บไซต์ออก ER รวมทั้งปัจจัยแลกเปลี่ยน Sar1p Sec12p, colocate ใกล้กองกอลไจซึ่งจะค่อนข้างนิ่งในเซลล์. ในพืชที่สูงขึ้นตามที่กล่าวไว้ก่อนหน้านี้ ER มีความสามารถในการงอกใหม่กอลไจหลังการรักษา BFA แม้ในกรณีที่ไม่มีโครงร่างใด ๆ และการสังเคราะห์โปรตีน (Saint-Jore et al., 2002) และกอลไจปรากฏที่จะเชื่อมโยงอย่างใกล้ชิดกับสถานที่การส่งออก ER (Dasilva และคณะ , 2004) คำาต่างที่สำคัญระหว่างยีสต์ P. pastoris และกอลไจพืชที่ดูเหมือนจะเป็นความคล่องตัวสูงของหลังซึ่งสะท้อนให้เห็นบางทีในการกระจายของแสดงความ transiently Sec12- GFP สร้างกว่าพื้นผิวทั้งหมดของ ER เพื่อให้ ยืนยันการใช้งาน Sar1p สามารถเกิดขึ้นได้เมื่อมีความจำเป็น (Dasilva et al., 2004) ที่น่าสนใจในยีสต์ Saccharomyces cerevisiae ซึ่งได้แยกย้ายกันไปแต่ละกอลไจ cisternae, Sec12 ยังมีการกระจายผ่านเครือข่ายทั้ง ER (Rossanese et al., 1999) ในขณะที่ยีสต์และเซลล์สัตว์กอลไจสามารถเกิดขึ้นเดอโนโวจาก ER ก็เป็นที่ดึงดูดที่จะคาดเดาว่า biogenesis ของกองกอลไจพืชอาจจะโดยกลไกที่คล้ายกัน ดังนั้นเมื่อเซลล์ต้องการที่จะเพิ่มกิจกรรมหลั่งหรือสองเท่าของสแต็คกอลไจสมบูรณ์ premitosis, กองใหม่สามารถสร้างขึ้นจาก ER โดยการก่อตัวของเว็บไซต์ที่ออกใหม่

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

4 . มือถือเว็บไซต์

มันส่งออกได้ พบว่าในเนื้อเยื่อพืชบางอย่าง เนื่องจากการใกล้ชิดของกอลจิเอร์ ( brandizzi et al . , 2002b ) ที่กองกอลจิ บุคคลอาจจะโดยตรงเกี่ยวข้องกับ















รูปที่ 4 โดยการฟื้นตัวหลังจาก photobleaching แสดงการขนส่ง st-gfp ในกองซ้อน กอลจิฟอกขาวในใบ ยาสูบ epidermal cell .เวลาจะได้รับในวินาทีที่ micrographs และบนแกน x .



เอ้อจึงสร้าง secretory ซับซ้อนที่สามารถเคลื่อนที่ย้ายไปตามพื้นผิวหรือภายใน ER เมมเบรน ( Neumann et al . , 2003 )เมื่อเร็วๆ นี้ เราได้แสดงให้เห็นว่าโปรตีนเรืองแสง sar1p คิเมร่าเมื่อแสดงในใบยาสูบ ตั้งอยู่บนพื้นผิวพร้อมกับกองบุคคล ER กอลจิและย้ายควบคู่กับไป ER กอลจิ (
/ N เดซิลวา et al . , 2004 ) ทั้งนี้ sar1p แท็กด้วย GTP ผูกพันกลายพันธุ์ของ GFP ซึ่งคาดว่ารอบช้าจากการส่งออกเว็บไซต์ตั้งอยู่ในมือถือ punctate โครงสร้างที่เกี่ยวข้องกับ ER และ colocalised กับ coexpressed กอลจิเป้าหมายสร้าง . ผ่านการแสดงออกของนี้สร้างทั้งยับยั้งการส่งออกรูปแบบหลั่ง GFP จาก ER และยังส่งผลในการหายตัวไปของโปรตีนเรืองแสง ป้าย กอลจิ อีกครั้งบอกว่าโปรตีนบนผิวเซลล์ในวัฏจักรกอลจิจากออร์แกเนลล์ .
เป็นโปรตีนที่แรกที่จะเชื่อมโยงเว็บไซต์เกิดกับเด็ก sar1p เสื้อ , เป็นตัวบ่งชี้ที่ดีของการส่งออกเว็บไซต์ที่ปรากฏเป็นเชิงพื้นที่ ตั้งอยู่ในบริเวณใกล้เคียงของกอลจิ . ข้อสรุปจากงานนี้คือ บางทีในพืชเป็นส่วนประกอบที่จำเป็นสำหรับการขนส่งสินค้ากับเด็กขนสะสมและอาจจะควบคุมการส่งออกของ ER แต่ไม่จําเป็นสําหรับการขึ้นรูปเล็กขนส่งแบบไม่ต่อเนื่องอย่างไรก็ตาม การออกแบบโมเลกุลที่แน่นอนของอินเตอร์เฟซที่ ER / กอลจิ ยังตัดสินไม่ได้


5 ทําของกอลจิกอง

เหตุการณ์ที่ ER ออกจากเว็บไซต์อาจจะกลายเป็นที่ชัดเจนว่า การพิจารณาจะให้ธรรมชาติของการสร้างกองซ้อนกอลจิ . และเครื่องกรองอากาศ ของแต่ละกอง และกอลจิแอพพาราตัส ทั้งมีการบอกว่าอย่างน้อยเป็นหัวข้อขัดแย้งไม่ กอลจิแบ่งก่อนกองเซลล์และเซลล์หรือเซลล์ที่สร้างใหม่จาก ER กอลจิ ? ศึกษารายละเอียดของเว็บไซต์ออกจาก ER ได้ให้เบาะแสบางอย่าง ในเซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม
โรงเรียนสองของความคิดที่มีอยู่เป็นเพื่อ partioning ของกอลจิในระหว่างไมโตซิส เป็นที่ชัดเจนว่าเปริ - นิวเคลียร์ กอลจิริบบิ้นกระจายทั่วเซลล์แต่ไม่ว่าจะเป็นเล็กกระจายในไซโตซอลหรือ

โครงสร้างทั้งหมดจะดูดซึมกลับเข้าไปในห้องฉุกเฉิน ยังคงเป็นปัญหาที่ถกเถียง ( สั้น&วอร์เรน , 2002 )ทฤษฎีหลังจากนั้นขึ้นอยู่กับกอลจิปฏิรูปจากกิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงออกจากเว็บไซต์ใน ER ซึ่งผลิตท่อี่ซึ่งเป็นตุ่มพองกลุ่มซึ่งจะอยู่ในลักษณะที่สัมพันธ์กับไมโครทิวบูลเยื่อเขตที่พวกเขารูปแบบริบบิ้นกอลจิใหม่ ( zaal et al . , 1999 ) อย่างไรก็ตามในพืชที่เป็นที่ชัดเจนว่า indi - vidual กองยังคงเหมือนเดิมในทุกระยะของวัฏจักรเซลล์และที่กั้นระหว่างเซลล์ลูกสาวระหว่างเซลล์ ( nebenf ü HR et al . , 2000 ) , แม้ว่าจะไม่ชัดเจนในสิ่งที่เวทีระหว่างเซลล์วงจรกอลจิ กองซ้ำหรือเพิ่มจำนวน .
ความสามารถ ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมเพื่อสร้าง ER กอลจิอีกครั้ง ,ได้กลายเป็นที่ชัดเจนจากการทดลองตาม disrup - tion ของกอลจิริบบิ้นกับสัณญาณภาพดีพอลิเมอร์ไรซิ่งยา nocodazole ( โคล et al . , 1996 ; ยาง&สตอร์รี่ , 1998 ) ใน depolymerisation ของไมโครทิวบูลนี้ก็เป็นที่รู้จักกันดีว่า ) กอลจิริบบิ้นแบ่งลงและปรากฏเป็นกระจายทั่วไซโทพลาสซึมในรูปแบบของมินิ cisternal กองซ้อนคล้ายพืชกอลจิ คอมเพล็กซ์ . อย่างไรก็ตาม มันได้ถูกแสดงให้กองขนาดเล็กเหล่านี้จะไม่ขึ้นตรงจากสลายของเนื้อเยื่อกอลจิ ริบบิ้น ในการทดลองที่หรูหรา zaal et al . ( 1999 ) photobleached ที่กอลจิ ริบบิ้น โช เซลล์ แสดง galactosyl transferasease GFP ( galtase nocodazole GFP ) หลังจากการรักษาภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้เรืองแสงขนาดเล็กกองขึ้นที่ ER ออกไซต์ และ ไม่มีการนำการเรืองแสงของริบบิ้นกอลจิ หลัก นี้แสดงให้เห็นว่า กอลจิสามารถรวบรวมอีกครั้งที่เว็บไซต์ออกจาก ER โดยการผลิตของกอลจิตัวกลางและในการขาดของเส้นใยเหล่านี้จะไม่ถูกส่งไปยังเยื่อ
ริบบิ้นเดอโนโวไบโอเจเนซิสของกอลจิกองยังถูกพบในยีสต์ pichia pastoris ที่ ER ออกจากเว็บไซต์กำหนดกับเด็ก เสื้อ sec13 แท็กด้วยโปรตีน GFP ได้เติบโตขึ้นจากจุดเรืองแสงเล็กๆใน ER มันเป็นความคิดที่ cisternae กอลจิใหม่จะเกิดขึ้นจากรุ่นเล็กที่เว็บไซต์เหล่านี้ออก ( เบวิส et al . , 2002 ) มันยังแสดงให้เห็นว่าใน



การขาดงานของ actin ขาดตอน , ER ในหนุ่มหน้า pastoris บัดสามารถสร้างกอง ( ข. กอลจิ Glick ได้ที่ . การสื่อสาร ) จึงแบ่งพาร์ทิชันที่มีอยู่ของมะระขี้นกไม่จําเป็นสําหรับการประสบความสำเร็จในยีสต์ บัดนี้ เป็นที่น่าสนใจที่จะทราบว่าในหน้า pastoris โปรตีนที่จำเป็นสำหรับการสร้างเว็บไซต์เอ้อออก รวมทั้งปัจจัย sar1p sec12p แลกเปลี่ยน ,colocate ใกล้กับกอลจิกองซึ่งค่อนข้างนิ่งในเซลล์ .
ในพืชที่สูงขึ้นตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ คือ มีความสามารถในการงอกใหม่ กอลจิหลังจาก BFA รักษา แม้ในกรณีที่ ไม่มีขาดตอน และการสังเคราะห์โปรตีน ( นักบุญ jore et al . , 2002 ) , และกอลจิ ปรากฏเป็นอย่างใกล้ชิดที่เกี่ยวข้องกับ เอ้อส่งออกเว็บไซต์ ( / N เดซิลวา et al . , 2004 )หลัก DIF - ฟีเรนซีระหว่างยีสต์หน้า pastoris และพืชกอลจิ ปรากฏเป็น ความคล่องตัวสูง หลัง ซึ่งอาจจะสะท้อนให้เห็นในการกระจายของบุคคลหรือสิ่งที่อยู่ชั่วคราวแสดง sec12 - GFP สร้างผ่านพื้นผิวทั้งหมดของห้องฉุกเฉิน เพื่อให้ sar1p กระตุ้นสามารถเกิดขึ้นได้เมื่อจำเป็น ( / N เดซิลวา et al . , 2004 ) ที่น่าสนใจในยีสต์ Saccharomyces cerevisiae ,ซึ่งมีกระจาย cisternae กอลจิ บุคคล sec12 ก็กระจายไปทั่วทั้งเครือข่าย ( rossanese เอ้อ et al . , 1999 ) ในยีสต์เซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมและกอลจิสามารถเกิดขึ้นอีกครั้งจาก ER , มันจะยั่วใจที่จะคาดการณ์ว่าเครื่องกรองอากาศของสแต็คกอลจิ พืชอาจจะโดยกลไกที่คล้ายกัน ดังนั้นเมื่อเซลล์ต้องการเพื่อเพิ่มกิจกรรม secretory หรือคู่ของกอลจิกองเสริม premitosis กองใหม่สามารถสร้างขึ้นจาก ER โดยการก่อตัวของเว็บไซต์ออกใหม่