Brewing and sampling
Fig. 1. Schematic vertical sectional view of the fermentation pot. A, ceramic lid;
B, cover paper; C, ceramic pot; D, floating koji at the initiation of fermentation;
E, fermentation broth.
Three pots (pots 1, 2, and 3) were initiated for brewing on 17
June, 2003 at Fukuyama-cho. The daily mean air temperature
during the fermentation process in this region was 20–25 °C
(maximum: 33 °C; minimum: 17 °C). The following materials
were mixed in a ceramic pot (total volume: 54 l; Fig. 1): steamed
rice (97% yield rice, approximately 36% of the moisture
content), 7.6kg; rice koji, 3.0kg; and natural water, 32 l.
Additionally, 0.3 to 0.4kg of rice koji were spread evenly across
the entire surface of the liquid (floating koji). The mouth of the
pot was covered with a sheet of paper and a ceramic lid, as shown
in Fig. 1. The pots were placed outdoors for 90 days. Approximately
300ml of the fermentation broth were taken from a depth
of 15cm at appropriate time intervals. The freshly collected
samples were subjected to cultivation at the on-site laboratory at
Fukuyama-cho. For the other experiments, the collected samples
were fractioned by centrifugation (13,000 ×g, 10min) into
precipitates (solid fraction, including microbial cells) and
supernatants (liquid fraction). The suspended solid fractions,
in DNA extraction buffer (100mM Tris–HCl pH 9.0, 40mM
EDTA), and the liquid fractions were transferred to a laboratory
in Tokyo at a temperature below 10 °C within 2 days after
collection, and were stored at −20 °C until use. Unless otherwise
stated, all reagents employed in this study were reagent grade
เบียร์และสุ่มตัวอย่างรูปที่ 1 แผนผังแนวตั้งตัดมุมมองของหมักหม้อ เซรามิคฝาปิดB กระดาษปก C กระถางเซรามิค D ลอยโคจิที่เริ่มต้นของการหมักE น้ำซุปหมักขึ้นสามหม้อ (หม้อ 1, 2 และ 3) สำหรับเบียร์ใน 17มิถุนายน 2003 ที่ฟุคุยาม่า-โจ อุณหภูมิอากาศเฉลี่ยประจำวันระหว่างการหมัก กระบวนการในภูมิภาคนี้ได้ 20 – 25 ° C(สูงสุด: 33 ° C ต่ำสุด: 17 ° C) วัสดุต่อไปนี้ถูกผสมในหม้อเซรามิค (รวมปริมาณ: 54 l รูปที่ 1): นึ่งข้าวผลผลิต 97% ประมาณ 36% ของความชื้นเนื้อหา), 7.6 กก. ข้าวโคจิ 3.0 กก. และ น้ำธรรมชาติ 32 lนอกจากนี้ 0.3 0.4 กก.ข้าวโคจิถูกเกลี่ยให้ทั่วพื้นผิวทั้งหมดของของเหลว (ลอยโคจิ) ปากหม้อถูกปกคลุม ด้วยแผ่นของกระดาษและฝาปิดเซรามิค ดังที่แสดงในรูปที่ 1 หม้อวางอยู่กลางแจ้งสำหรับ 90 วัน ประมาณถ่าย 300ml ของน้ำซุปหมักได้ลึก15 ซม.ในช่วงเวลาที่เหมาะสม เก็บสดใหม่ตัวอย่างถูกเพาะปลูกในห้องปฏิบัติการในสถานที่ฟุคุยาม่า-โจ สำหรับการทดลอง ตัวอย่างเก็บรวบรวมถูก fractioned โดยการหมุนเหวี่ยง (13,000 × g, 10 นาที) ลงในprecipitates (ไม้เศษส่วน รวมทั้งเซลล์จุลินทรีย์) และsupernatants (เศษของเหลว) เศษไม้แขวนในบัฟเฟอร์สกัดดีเอ็นเอ (100mM ทริสเรทติ้ง – HCl pH 9.0, 40 มม.EDTA), และเศษของเหลวถูกโอนย้ายไปห้องปฏิบัติการในโตเกียวที่อุณหภูมิ 10 ° C ภายใน 2 วันหลังจากคอลเลกชัน และถูกเก็บไว้ที่ −20 ° C จนกว่าจะใช้ เว้นแต่ว่ามิฉะนั้นระบุ เปื้อนทั้งหมดที่ใช้ในการศึกษานี้ได้เกรดรีเอเจนต์
การแปล กรุณารอสักครู่..

การหมักและการสุ่มตัวอย่างรูปที่ 1 แผนผังแนวตั้งมุมมองส่วนของหมักหม้อ , ฝาเซรามิคB , กระดาษปก ; C , กระถางเซรามิก ; D ลอยโคจิที่เริ่มต้นของกระบวนการหมัก ;E , น้ำหมัก .สามหม้อ ( หม้อที่ 1 , 2 และ 3 ) โดยเริ่มต้มที่ 17มิถุนายน 2546 ใน FUKUYAMA โช ทุกวันหมายถึงอุณหภูมิอากาศในระหว่างกระบวนการหมักในภูมิภาคนี้คือ 20 – 25 ° C( สูงสุด : 33 ° C ; ต่ำสุด : 17 ° C ) วัสดุดังต่อไปนี้ถูกผสมในหม้อเซรามิก ( เล่ม 54 ล. รูปที่ 1 ทั้งหมด ) : นึ่งข้าว ( ข้าว ผลผลิต 97% ประมาณ 36% ของความชื้นเนื้อหา ) , 7.6kg ข้าวโคจิ 3.0kg ; และในแหล่งน้ำธรรมชาติขนาด 32 ลิตรนอกจากนี้ 0.4kg 0.3 ข้าวโคจิก็กระจายไปทั่วพื้นผิวทั้งหมดของของเหลว ( ลอย โคจิ ) ปากของกระถางที่ถูกปกคลุมด้วยแผ่นกระดาษและเป็นฝาเซรามิคในรูปที่ 1 หม้ออยู่กลางแจ้งเป็นเวลา 90 วัน ประมาณ300 มล. ของน้ำหมักที่ได้จากความลึกของ 15 ซม. ในช่วงเวลาที่เหมาะสม เก็บสด ๆตัวอย่างจะถูกปลูกในสถานที่ที่ห้องปฏิบัติการฟูโช สำหรับการทดลองอื่น ๆที่รวบรวมตัวอย่างเป็นแฟรกชันโดยการเหวี่ยงแยก ( 13000 ×กรัม 10min )( เศษตะกอนแข็ง รวมทั้งจุลินทรีย์เซลล์ ) และsupernatants ( เศษเหลว ) เศษส่วนที่ถูกของแข็งในการสกัดดีเอ็นเอจากบัฟเฟอร์ ( 100 ) พีเอช 9.0 40mm HCL ,EDTA ) และส่วนของเหลวที่ถูกโอนไปยังห้องปฏิบัติการในโตเกียวที่อุณหภูมิต่ำกว่า 10 องศา C ได้ภายใน 2 วัน หลังจากเก็บรวบรวมและเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 20 ° C −จนใช้ ถ้าไม่อย่างนั้นกล่าวว่า สารเคมีที่ใช้ในการศึกษามีทั้งหมด 3 เกรด
การแปล กรุณารอสักครู่..
