The myokine irisin is supposed to b

The myokine irisin is supposed to be cleaved from a transmembrane precursor, FNDC5 (fibronectin type III domain containing 5), and to mediate beneficial effects of exercise on human metabolism. However, evidence for irisin circulating in blood is largely based on commercial ELISA kits which are based on polyclonal antibodies (pAbs) not previously tested for cross-reacting serum proteins. We have analyzed four commercial pAbs by Western blotting, which revealed prominent cross-reactivity with non-specific proteins in human and animal sera. Using recombinant glycosylated and non-glycosylated irisin as positive controls, we found no immune-reactive bands of the expected size in any biological samples. A FNDC5 signature was identified at ~20 kDa by mass spectrometry in human serum but was not detected by the commercial pAbs tested. Our results call into question all previous data obtained with commercial ELISA kits for irisin, and provide evidence against a physiological role for irisin in humans and other species.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Myokine irisin ควรจะถูกแบ่งออกจากสารตั้งต้นรน FNDC5 (fibronectin ชนิด III โดเมนที่ประกอบด้วย 5), และ การไกล่เกลี่ยผลประโยชน์ของการออกกำลังกายเผาผลาญมนุษย์ อย่างไรก็ตาม หลักฐาน irisin ที่ไหลเวียนในเลือดส่วนใหญ่อยู่บนชุด ELISA เชิงพาณิชย์ซึ่งเป็นไปตามโพลีแอนติบอดี้ (pAbs) ไม่เคย ผ่านทดสอบ cross-reacting โปรตีนเซรั่ม เราได้วิเคราะห์ pAbs พาณิชย์สี่ โดย blotting วิธีตะวันตก ซึ่ง cross-reactivity โดดเด่น ด้วยไม่ใช่เฉพาะโปรตีนในมนุษย์ และสัตว์จะ เราใช้ recombinant glycosylated และปลอด glycosylated irisin เป็นตัวควบคุมเชิงบวก พบแถบขนาดที่คาดไว้ไม่มีปฏิกิริยาภูมิคุ้มกันในตัวอย่างทางชีวภาพ ลายเซ็น FNDC5 ระบุที่ kDa ~ 20 โดยรเมทในซีรั่มมนุษย์ แต่ตรวจไม่พบ โดย pAbs พาณิชย์ที่ทดสอบ ผลของเราโทรไปถามข้อมูลก่อนหน้านี้ทั้งหมดได้รับจากการค้า ELISA ชุดสำหรับ irisin และแสดงหลักฐานกับบทบาททางสรีรวิทยาสำหรับ irisin ในมนุษย์และสายพันธุ์อื่น ๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

irisin myokine ควรจะแยกจากสารตั้งต้นรน, FNDC5 (ชนิด fibronectin III โดเมนที่มี 5) และเพื่อเป็นสื่อกลางในผลประโยชน์ของการออกกำลังกายในการเผาผลาญของมนุษย์ อย่างไรก็ตามหลักฐานสำหรับ irisin ในเลือดส่วนใหญ่จะขึ้นในเชิงพาณิชย์ชุด ELISA ซึ่งอยู่บนพื้นฐานแอนติบอดีโพลี (PABS) ไม่ได้ทดสอบก่อนหน้านี้สำหรับโปรตีนข้ามปฏิกิริยาซีรั่ม เราได้วิเคราะห์สี่ PABS เชิงพาณิชย์โดยซับตะวันตกซึ่งเผยให้เห็นโดดเด่นปฏิกิริยาข้ามกับโปรตีนที่ไม่เฉพาะเจาะจงในมนุษย์และสัตว์ซีรั่ม ใช้ recombinant irisin glycosylated และไม่ glycosylated เป็นตัวควบคุมในเชิงบวกเราพบว่าไม่มีวงดนตรีภูมิคุ้มกันปฏิกิริยาขนาดคาดว่าในตัวอย่างทางชีวภาพใด ๆ ลายเซ็น FNDC5 ถูกระบุว่าประมาณ 20 กิโลดาลตันโดยมวลสารในซีรั่มของมนุษย์ แต่ยังไม่ได้ตรวจพบโดยการทดสอบ PABS เชิงพาณิชย์ ผลของเราโทรเข้ามาถามข้อมูลก่อนหน้านี้ทั้งหมดได้รับกับชุด ELISA เชิงพาณิชย์สำหรับ irisin และให้หลักฐานกับบทบาททางสรีรวิทยาสำหรับ irisin ในมนุษย์และสายพันธุ์อื่น ๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การ myokine irisin ควรจะถูกตัดทอนจากหัว fndc5 ( ประเภทโปรตีนไฟโบรเนกติน 3 โดเมนที่มี 5 ) , และการไกล่เกลี่ยผลประโยชน์ของการออกกำลังกายที่เผาผลาญมนุษย์ อย่างไรก็ตาม หลักฐาน irisin หมุนเวียนในเลือดส่วนใหญ่จะขึ้นอยู่กับชุดพาณิชย์ ) ซึ่งจะขึ้นอยู่กับใช้แอนติบอดี ( pabs ) ก่อนหน้านี้ไม่ทดสอบปฏิกิริยาข้ามโปรตีนเซรั่ม เราได้วิเคราะห์สี่พาณิชย์ pabs โดย Western blotting ซึ่งพบขอประทานที่โดดเด่นเฉพาะโปรตีนในมนุษย์และสัตว์ตามลำดับ ใช้คอมอื่นอื่นและไม่ irisin เป็นตัวควบคุมบวก เราไม่พบภูมิคุ้มกันปฏิกิริยาแถบคาดขนาดในตัวอย่างทางชีวภาพ . เป็น fndc5 ลายเซ็นถูกระบุที่ ~ 20   ) โดยมวลสารในซีรัมของมนุษย์ แต่ไม่ได้ตรวจพบโดยพาณิชย์ pabs ทดสอบ ผลของเรา โทรเข้ามาถามข้อมูลก่อนหน้านี้ทั้งหมดกับพาณิชย์ชุด ELISA สำหรับ irisin และให้หลักฐานกับบทบาททางสรีรวิทยาเพื่อ irisin ในมนุษย์และชนิดอื่น ๆ