Adult worms were obtained from Dr. J. Grassle ŽRutgers University. and maintained in our laboratory for multiple generations at about 30‰ salinity on a diet of fine mud J.A. Pechenik et al.rJ. Exp. Mar. Biol. Ecol. 264 (2001) 101–114 103 collected from the Little Sippewissett salt marsh on Cape Cod, Massachusetts, USA, where members of this species occur naturally. The mud was forced through a 1-mm sieve to remove debris and then frozen for at least several days to kill animal residents before use ŽCohen and Pechenik, 1999.. Two experiments ŽCad-1 and Cad-2. were conducted at 23 8C, both using static exposures to toxicant. Approximately 600 larvae released from brood tubes by four females were pooled and subsampled for the first experiment. The larvae were distributed among plastic cups containing 50 ml of either 0.45-mm-filtered seawater or CdCl seawater solution. Seven CdCl concentrations were tested, up to a nominal 2 2
concentration of 1000 mg ly1, plus control seawater, with three replicates per treatment and 12 larvae per replicate. Survival and incidence of metamorphosis were assessed after 24 and 48 h; individuals were observed at 100= using a compound microscope to confirm loss of larval cilia. Metamorphosed individuals were discarded. Remaining larvae were then transferred to cups of seawater with mud to stimulate natural metamorphosis ŽButman et al., 1988; Dubilier, 1988; Pechenik and Cerulli, 1991; Cohen and Pechenik, 1999., and maintained at 20 8C for 2–2.5 weeks to assess juvenile
survival and growth, and adult fecundity. At the end of the experiment we retrieved all surviving juveniles and measured the length and width of each individual at 8–20= using a dissecting microscope equipped with an ocular micrometer. Worms were anesthetized in 0.36 M MgCl before measure- 2 ments were taken. Worm volumes were calculated assuming that each individual was cylindrical. The second experiment was conducted about 1 week later, subsampling from 310
larvae pooled from two females. The experiment was similar to the first one, except that we added one higher nominal CdCl concentration Ž2000 mg ly1 ., and examined larvae 2 only after 48 h. Again, we tested three replicates at each concentration Žincluding seawater controls., with 12 larvae per replicate.
หนอนผู้ใหญ่ได้รับมาจากดร.เจ Grassle ŽRutgers มหาวิทยาลัย และรักษาไว้ในห้องปฏิบัติการของเราในหลายรุ่นที่เกี่ยวกับ 30‰ เค็มในอาหารของไฟน์โคลนโรงแรมเจเอ Pechenik et al.rJ Exp. 264 Ecol. Biol. มี.ค. (2001) 101-114 103 รวบรวมจากมาร์ชเกลือ Sippewissett น้อยบน Cape Cod รัฐแมสซาชูเซตส์ สหรัฐอเมริกา ที่เกิดขึ้นตามธรรมชาติของสมาชิกของนกชนิดนี้ โคลนถูกบังคับให้เอาเศษผ่านตะแกรง 1 มม. และแช่แข็งแล้ว น้อยหลายวันฆ่าสัตว์คนก่อนใช้ ŽCohen และ Pechenik, 1999 ... ทดลอง ŽCad 1 และ Cad-2 ได้ดำเนินการใน 23 8C ทั้งใช้ภาพคงจะ toxicant ประมาณ 600 ตัวอ่อนที่ออกจากท่อ brood สี่ฉันถูกทางถูกพู และ subsampled ในการทดลองครั้งแรก ตัวอ่อนได้ถูกกระจายถ้วยพลาสติกที่ประกอบด้วย 50 ml 0.45-mm-กรองน้ำทะเลหรือโซลูชันทะเล CdCl ความเข้มข้น CdCl เจ็ดทดสอบ ถึง 2 2 ระบุความเข้มข้นของ ly1 1000 mg ควบคุมทะเล สามเหมือนกับต่อการรักษาและตัวอ่อน 12 ต่อจำลอง อยู่รอดและอุบัติการณ์ของการเปลี่ยนสัณฐานถูกประเมินหลัง 24 และ 48 h บุคคลที่ถูกสังเกตที่ 100 =ใช้กล้องจุลทรรศน์สารประกอบเพื่อยืนยันการสูญเสียของ larval cilia Metamorphosed บุคคลถูกละทิ้ง ตัวอ่อนที่เหลือถูกแล้วโอนย้ายไปที่ถ้วยน้ำทะเลด้วยโคลนเพื่อกระตุ้นการเปลี่ยนสัณฐานธรรมชาติ ŽButman et al., 1988 Dubilier, 1988 Pechenik และ Cerulli, 1991 โคเฮนและ Pechenik, 1999 และรักษาที่ 8C 20 สัปดาห์ 2 – 2.5 การประเมินเด็กอยู่รอด และเจริญเติบโต และ fecundity ผู้ใหญ่ เมื่อสิ้นสุดการทดลองเราดึง juveniles รอดตายทั้งหมด และวัดความยาวและความกว้างของแต่ละคนที่ 8 – 20 =ใช้กล้องจุลทรรศน์ dissecting พร้อมไมโครมิเตอร์เป็นแนว หนอนมีด้วยใน 0.36 M MgCl ก่อน ments 2 วัดที่ถ่าย มีคำนวณปริมาณหนอนสมมติว่าแต่ละคนมีทรงกระบอก การทดลองที่ 2 ได้ดำเนินการประมาณ 1 สัปดาห์ต่อมา subsampling จาก 310ตัวอ่อนทางถูกพูจากหญิงสอง การทดลองเป็นคล้ายกับครั้งแรก ยกเว้นว่าเราได้เพิ่มหนึ่งสูงระบุ CdCl เข้มข้น Ž2000 mg ly1., และตรวจสอบตัวอ่อน 2 หลังจาก 48 h อีก เราทดสอบเหมือนกับสามที่แต่ละความเข้มข้น Žincluding ทะเลควบคุม มี 12 ตัวอ่อนต่อการจำลองแบบ
การแปล กรุณารอสักครู่..
