- ข้อความ
- ประวัติศาสตร์
2.1. Pathogen inoculumB. cinerea wa
2.1. Pathogen inoculum
B. cinerea was isolated from a grape berry showing typical gray mold and stored on potato dextrose agar (PDA, 200mL extract of boiled potatoes, 20g dextrose and 20g agar in 1000mL distilled water) at 4◦C. Before use, B. cinerea was freshly cultured on PDA plates at 23◦C Spore suspensions were prepared by removing the spores from a 7-day old culture with a sterile inoculator and then suspending in sterile distilled water to the required concentration of 1×105 spores mL−1,which was estimated using a hemacytometer (XB-K-25; Shanghai, China).
2.2. Antagonist
The antagonist yeast was isolated from the surface of strawberries and identified as H. uvarum based on the similarity analysis of its morphologies,physiological–biochemical characteristics and 26S rDNA D1/D2 domain sequence (GenBank accession number: JX125041). The yeast was cultured in 250mL Erlenmeyer flasks with 100mL potato dextrose (PDB, 200mL extract of boiled potatoes,20g dextrose in 1000mL distilled water)on a gyratory shaker at 180rmin−1, 28 ◦C for 24h. The yeast cells were acquired by centrifuging at 6000×g for 15min(at4◦C)and then re-suspended in sterile distilled water. The yeast concentrations were adjusted as needed for different experiments using a hemacytometer.
2.3. Fruit
Grape berries (Vitis vinifera L. cv. Kyoho) were harvested early in the morning from a vineyard in Jiangxin Zhou, Nanjing City, China,and selected depending on the size and the absence of physical injuries or infection. Grapes were surface-disinfected with 2% sodium hypochlorite for 2min, rinsed with tap water and dried in air before use.
2.4. Efficacy of H.uvarum combined with different concentrations of SA (or SBC) on control of gray mold in grape fruit
Grapes berries were divided into 5 groups. Three groups of berries were immersed in SA solutions with concentration of 1, 2 and 4mmolL−1 for 2min, respectively. The fourth group was not treated.The last group that was immersed in sterile distilled water
was used as the control. After air-drying, the treated fruit were stored at 25◦C, RH 90–95% condition for 1 day. A uniform wound of 4mm deep and 3mm wide was made at the equator of each fruit using the tip of sterile dissecting needle. Aliquots (10L) of 1×108 CFUmL−1 yeast suspension were pipetted into the wound site, except for the control group which was treated with sterile water. After 2h, 10L of the 1×105 sporesmL−1 suspension of B. cinerea was inoculated into each wound. All these fruit were airdried again and then stored at 25◦C, RH 90–95% for 3 days. The lesion diameters and disease incidence were determined after incubation. Thirty fruit constituted a single replicate. The experiment was repeated twice with three replicates per treatment. The effect of H.uvarum combined with different concentrations of SBC on grape lesion diameter and disease incidence of B. cinerea infection was studied using the similar procedure as for SA.The SBC solutions of 1, 2 and 4% concentrations were used.
2.5. Effects of H. uvarum in combination with SA or SBC on postharvest quality and enzyme activities of intact fruit during cold storage
The intact fruit were sprayed with: Control – sterile distilled water as the control, H – the cell suspension of H. uvarum (1×108 CFUmL−1),H+SA−SA(2mmolL−1)after 2h firstandthen in combination with H. uvarum suspension (1×108 CFUmL−1), H+SBC−SBC (2%) after 2h first and then in combination with H. uvarum suspension(1×108 CFUmL−1).The fruit were air-dried and sealed in polyethylene-lined plastic boxes at 2±1◦C,RH90–95%to retain high humidity. Postharvest quality and enzyme activities of the fruit were evaluated at intervals of 10 days. 100 fruit constituted a single replicate. The experiment was repeated twice with three replicates per treatment.
2.6. Quality analysis of grapes
2.6.1. Browning index Browning index (BI) of spike-stalk and pedicel was assessed according to the different browning of scales as follows: 0, no browning; 1, browning of scales less than a quarter of browning area;2,browning of scales less than 1/2 of browning area;3,browning of scales less than three-quarters of browning area; 4, more than 3/4 of browning area. The browning index was calculated by the formula, BI=(df)/ND, where d is the browning of scales on the grape and f is its respective quantity; N is the total number of grapes examined and D is the highest browning of scales.
2.6.2. Decay incidence and weight loss The number of decayed fruit (A) against the number of all fruit (B)was calculated as the decay incidence(A/B).Results were shown as percentage of fruit with decay.The mass of the grapes was measured by an MP2000-2 balance(±0.001g)before treatment(a)and after storage (b). The mass loss was calculated as (a−b)/a.
2.6.3. Firmness The firmness value of each individual grape was measured at the point of the equatorial region using the TA-XT2i Texture Analyser (Stable Micro Systems Ltd, UK) equipped with a 6mm diameter flat probe.The probe descended to ward the sample at the speed of 1mms−1 and the maximum force (N) was defined (Castillo et al., 2010).
B. cinerea was isolated from a grape berry showing typical gray mold and stored on potato dextrose agar (PDA, 200mL extract of boiled potatoes, 20g dextrose and 20g agar in 1000mL distilled water) at 4◦C. Before use, B. cinerea was freshly cultured on PDA plates at 23◦C Spore suspensions were prepared by removing the spores from a 7-day old culture with a sterile inoculator and then suspending in sterile distilled water to the required concentration of 1×105 spores mL−1,which was estimated using a hemacytometer (XB-K-25; Shanghai, China).
2.2. Antagonist
The antagonist yeast was isolated from the surface of strawberries and identified as H. uvarum based on the similarity analysis of its morphologies,physiological–biochemical characteristics and 26S rDNA D1/D2 domain sequence (GenBank accession number: JX125041). The yeast was cultured in 250mL Erlenmeyer flasks with 100mL potato dextrose (PDB, 200mL extract of boiled potatoes,20g dextrose in 1000mL distilled water)on a gyratory shaker at 180rmin−1, 28 ◦C for 24h. The yeast cells were acquired by centrifuging at 6000×g for 15min(at4◦C)and then re-suspended in sterile distilled water. The yeast concentrations were adjusted as needed for different experiments using a hemacytometer.
2.3. Fruit
Grape berries (Vitis vinifera L. cv. Kyoho) were harvested early in the morning from a vineyard in Jiangxin Zhou, Nanjing City, China,and selected depending on the size and the absence of physical injuries or infection. Grapes were surface-disinfected with 2% sodium hypochlorite for 2min, rinsed with tap water and dried in air before use.
2.4. Efficacy of H.uvarum combined with different concentrations of SA (or SBC) on control of gray mold in grape fruit
Grapes berries were divided into 5 groups. Three groups of berries were immersed in SA solutions with concentration of 1, 2 and 4mmolL−1 for 2min, respectively. The fourth group was not treated.The last group that was immersed in sterile distilled water
was used as the control. After air-drying, the treated fruit were stored at 25◦C, RH 90–95% condition for 1 day. A uniform wound of 4mm deep and 3mm wide was made at the equator of each fruit using the tip of sterile dissecting needle. Aliquots (10L) of 1×108 CFUmL−1 yeast suspension were pipetted into the wound site, except for the control group which was treated with sterile water. After 2h, 10L of the 1×105 sporesmL−1 suspension of B. cinerea was inoculated into each wound. All these fruit were airdried again and then stored at 25◦C, RH 90–95% for 3 days. The lesion diameters and disease incidence were determined after incubation. Thirty fruit constituted a single replicate. The experiment was repeated twice with three replicates per treatment. The effect of H.uvarum combined with different concentrations of SBC on grape lesion diameter and disease incidence of B. cinerea infection was studied using the similar procedure as for SA.The SBC solutions of 1, 2 and 4% concentrations were used.
2.5. Effects of H. uvarum in combination with SA or SBC on postharvest quality and enzyme activities of intact fruit during cold storage
The intact fruit were sprayed with: Control – sterile distilled water as the control, H – the cell suspension of H. uvarum (1×108 CFUmL−1),H+SA−SA(2mmolL−1)after 2h firstandthen in combination with H. uvarum suspension (1×108 CFUmL−1), H+SBC−SBC (2%) after 2h first and then in combination with H. uvarum suspension(1×108 CFUmL−1).The fruit were air-dried and sealed in polyethylene-lined plastic boxes at 2±1◦C,RH90–95%to retain high humidity. Postharvest quality and enzyme activities of the fruit were evaluated at intervals of 10 days. 100 fruit constituted a single replicate. The experiment was repeated twice with three replicates per treatment.
2.6. Quality analysis of grapes
2.6.1. Browning index Browning index (BI) of spike-stalk and pedicel was assessed according to the different browning of scales as follows: 0, no browning; 1, browning of scales less than a quarter of browning area;2,browning of scales less than 1/2 of browning area;3,browning of scales less than three-quarters of browning area; 4, more than 3/4 of browning area. The browning index was calculated by the formula, BI=(df)/ND, where d is the browning of scales on the grape and f is its respective quantity; N is the total number of grapes examined and D is the highest browning of scales.
2.6.2. Decay incidence and weight loss The number of decayed fruit (A) against the number of all fruit (B)was calculated as the decay incidence(A/B).Results were shown as percentage of fruit with decay.The mass of the grapes was measured by an MP2000-2 balance(±0.001g)before treatment(a)and after storage (b). The mass loss was calculated as (a−b)/a.
2.6.3. Firmness The firmness value of each individual grape was measured at the point of the equatorial region using the TA-XT2i Texture Analyser (Stable Micro Systems Ltd, UK) equipped with a 6mm diameter flat probe.The probe descended to ward the sample at the speed of 1mms−1 and the maximum force (N) was defined (Castillo et al., 2010).
0/5000
2.1. Pathogen inoculumB. cinerea was isolated from a grape berry showing typical gray mold and stored on potato dextrose agar (PDA, 200mL extract of boiled potatoes, 20g dextrose and 20g agar in 1000mL distilled water) at 4◦C. Before use, B. cinerea was freshly cultured on PDA plates at 23◦C Spore suspensions were prepared by removing the spores from a 7-day old culture with a sterile inoculator and then suspending in sterile distilled water to the required concentration of 1×105 spores mL−1,which was estimated using a hemacytometer (XB-K-25; Shanghai, China).2.2. AntagonistThe antagonist yeast was isolated from the surface of strawberries and identified as H. uvarum based on the similarity analysis of its morphologies,physiological–biochemical characteristics and 26S rDNA D1/D2 domain sequence (GenBank accession number: JX125041). The yeast was cultured in 250mL Erlenmeyer flasks with 100mL potato dextrose (PDB, 200mL extract of boiled potatoes,20g dextrose in 1000mL distilled water)on a gyratory shaker at 180rmin−1, 28 ◦C for 24h. The yeast cells were acquired by centrifuging at 6000×g for 15min(at4◦C)and then re-suspended in sterile distilled water. The yeast concentrations were adjusted as needed for different experiments using a hemacytometer.2.3. FruitGrape berries (Vitis vinifera L. cv. Kyoho) were harvested early in the morning from a vineyard in Jiangxin Zhou, Nanjing City, China,and selected depending on the size and the absence of physical injuries or infection. Grapes were surface-disinfected with 2% sodium hypochlorite for 2min, rinsed with tap water and dried in air before use.2.4. Efficacy of H.uvarum combined with different concentrations of SA (or SBC) on control of gray mold in grape fruitGrapes berries were divided into 5 groups. Three groups of berries were immersed in SA solutions with concentration of 1, 2 and 4mmolL−1 for 2min, respectively. The fourth group was not treated.The last group that was immersed in sterile distilled waterwas used as the control. After air-drying, the treated fruit were stored at 25◦C, RH 90–95% condition for 1 day. A uniform wound of 4mm deep and 3mm wide was made at the equator of each fruit using the tip of sterile dissecting needle. Aliquots (10L) of 1×108 CFUmL−1 yeast suspension were pipetted into the wound site, except for the control group which was treated with sterile water. After 2h, 10L of the 1×105 sporesmL−1 suspension of B. cinerea was inoculated into each wound. All these fruit were airdried again and then stored at 25◦C, RH 90–95% for 3 days. The lesion diameters and disease incidence were determined after incubation. Thirty fruit constituted a single replicate. The experiment was repeated twice with three replicates per treatment. The effect of H.uvarum combined with different concentrations of SBC on grape lesion diameter and disease incidence of B. cinerea infection was studied using the similar procedure as for SA.The SBC solutions of 1, 2 and 4% concentrations were used.2.5. Effects of H. uvarum in combination with SA or SBC on postharvest quality and enzyme activities of intact fruit during cold storageThe intact fruit were sprayed with: Control – sterile distilled water as the control, H – the cell suspension of H. uvarum (1×108 CFUmL−1),H+SA−SA(2mmolL−1)after 2h firstandthen in combination with H. uvarum suspension (1×108 CFUmL−1), H+SBC−SBC (2%) after 2h first and then in combination with H. uvarum suspension(1×108 CFUmL−1).The fruit were air-dried and sealed in polyethylene-lined plastic boxes at 2±1◦C,RH90–95%to retain high humidity. Postharvest quality and enzyme activities of the fruit were evaluated at intervals of 10 days. 100 fruit constituted a single replicate. The experiment was repeated twice with three replicates per treatment.2.6. Quality analysis of grapes2.6.1. Browning index Browning index (BI) of spike-stalk and pedicel was assessed according to the different browning of scales as follows: 0, no browning; 1, browning of scales less than a quarter of browning area;2,browning of scales less than 1/2 of browning area;3,browning of scales less than three-quarters of browning area; 4, more than 3/4 of browning area. The browning index was calculated by the formula, BI=(df)/ND, where d is the browning of scales on the grape and f is its respective quantity; N is the total number of grapes examined and D is the highest browning of scales.2.6.2. Decay incidence and weight loss The number of decayed fruit (A) against the number of all fruit (B)was calculated as the decay incidence(A/B).Results were shown as percentage of fruit with decay.The mass of the grapes was measured by an MP2000-2 balance(±0.001g)before treatment(a)and after storage (b). The mass loss was calculated as (a−b)/a.2.6.3. Firmness The firmness value of each individual grape was measured at the point of the equatorial region using the TA-XT2i Texture Analyser (Stable Micro Systems Ltd, UK) equipped with a 6mm diameter flat probe.The probe descended to ward the sample at the speed of 1mms−1 and the maximum force (N) was defined (Castillo et al., 2010).
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.1 เชื้อโรคเชื้อ
B. cinerea แยกได้จากเบอร์รี่องุ่นแสดงราสีเทาทั่วไปและเก็บไว้ในอาหารเลี้ยงเชื้อเดกซ์โทรสมันฝรั่ง (PDA, สารสกัดจาก 200mL ของมันฝรั่งต้ม dextrose 20 กรัมและ 20 กรัมวุ้นในส 1000ml น้ำกลั่น) ที่4◦C ก่อนที่จะใช้ซีเนเรียบีเป็นสดเพาะเลี้ยงบนแผ่น PDA ที่แขวนลอย23◦Cสปอร์ได้จัดทำขึ้นโดยการเอาสปอร์จาก 7 วันวัฒนธรรมเก่ากับ Inoculator ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วระงับในน้ำกลั่นปลอดเชื้อมีความเข้มข้นต้องการ 1 × 105 สปอร์ ML-1 ซึ่งเป็นที่คาดกันโดยใช้ hemacytometer (XB-K-25; เซี่ยงไฮ้, จีน).
2.2 ศัตรู
ศัตรูยีสต์ที่แยกได้จากพื้นผิวของสตรอเบอร์รี่และเอ็ดสายการระบุเป็นเอช uvarum อยู่บนพื้นฐานของการวิเคราะห์ความคล้ายคลึงกันของรูปร่างลักษณะของลักษณะทางสรีรวิทยาและชีวเคมี 26S rDNA D1 / D2 ลำดับโดเมน (จำนวนภาคยานุวัติ GenBank: JX125041) ยีสต์เป็นที่เลี้ยงใน 250mL รูปกรวยชั้นถามกับเดกซ์โทรสมันฝรั่ง 100mL (PDB, สารสกัดจาก 200mL ของมันฝรั่งต้ม dextrose 20 กรัมในน้ำกลั่นส 1000ml) ในเครื่องปั่นแบบหมุนที่ 180rmin-1, 28 ◦Cสำหรับ 24 ชั่วโมง เซลล์ยีสต์ได้มาจากการปั่นแยกที่ 6000 ×กรัม 15 นาที (at4◦C) และจากนั้นอีกครั้งที่ลอยอยู่ในน้ำกลั่นผ่านการฆ่าเชื้อ ความเข้มข้นของยีสต์มีการปรับตามความจำเป็นที่แตกต่างกันสำหรับการทดลองใช้ hemacytometer.
2.3 ผลไม้
เบอร์รี่องุ่น (Vitis vinifera พันธุ์ L. . Kyoho) ได้รับการเก็บเกี่ยวในช่วงเช้าจากไร่องุ่นใน Jiangxin โจว, เมืองหนานจิงประเทศจีนและเลือกขึ้นอยู่กับขนาดและการขาดการบาดเจ็บทางร่างกายหรือการติดเชื้อ องุ่นถูกผิวฆ่าเชื้อด้วยโซเดียมไฮโปคลอไรต์ 2% สำหรับ 2min, ล้างด้วยน้ำประปาและแห้งในอากาศก่อนการใช้งาน.
2.4 cacy Fi Ef ของ H.uvarum รวมที่มีความเข้มข้นแตกต่างกันของ SA (หรือ SBC) ในการควบคุมของราสีเทาในผลไม้องุ่น
เบอร์รี่องุ่นถูกแบ่งออกเป็น 5 กลุ่ม กลุ่มที่สามของผลเบอร์รี่ถูกแช่อยู่ในการแก้ปัญหา SA ที่มีความเข้มข้นของ 1, 2 และ 4mmolL-1 สำหรับ 2min ตามลำดับ กลุ่มที่สี่ไม่ได้ treated.The กลุ่มสุดท้ายที่ถูกแช่อยู่ในน้ำกลั่นปลอดเชื้อ
ถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุม หลังจากที่อากาศแห้ง, ผลไม้ที่เก็บไว้ได้รับการรักษาที่25◦C, RH สภาพ 90-95% เป็นเวลา 1 วัน แผลเครื่องแบบกว้าง 4 มมลึกและ 3mm ถูกสร้างขึ้นที่เส้นศูนย์สูตรของแต่ละผลไม้โดยใช้ปลายเข็มผ่าตัดปลอดเชื้อ aliquots (10? L) 1 × 108 CFUmL-1 ระงับยีสต์ถูกปิเปตในเว็บไซต์แผลยกเว้นกลุ่มควบคุมที่ได้รับการรักษาด้วยน้ำหมัน หลังจาก 2H, 10? ลิตร 1 × 105 sporesmL-1 ระงับการ cinerea บีได้รับเชื้อเป็นแผลแต่ละ ผลไม้ทั้งหมดเหล่านี้ถูก airdried อีกครั้งและเก็บไว้แล้วที่25◦C, RH 90-95% เป็นเวลา 3 วัน เส้นผ่าศูนย์กลางแผลและเกิดโรคได้รับการพิจารณาหลังจากบ่ม สามสิบผลไม้ประกอบด้วยซ้ำเดียว ทดลองซ้ำเป็นครั้งที่สองกับสามซ้ำต่อการรักษา ผลกระทบของการ H.uvarum รวมที่มีความเข้มข้นแตกต่างกันของ SBC ในเส้นผ่าศูนย์กลางแผลองุ่นและการเกิดโรคของเชื้อ B. cinerea ได้ศึกษาโดยใช้ขั้นตอนเช่นเดียวกับการแก้ปัญหา SA.The SBC ของ 1, 2 และ 4% ความเข้มข้นถูกนำมาใช้.
2.5 ผลกระทบจากเอช uvarum ร่วมกับ SA หรือ SBC ต่อคุณภาพหลังการเก็บเกี่ยวและกิจกรรมของเอนไซม์ของผลไม้เหมือนเดิมในช่วงเย็นเก็บ
ผลไม้เหมือนเดิมถูกพ่นด้วย: การควบคุม - น้ำกลั่นปลอดเชื้อเป็นตัวควบคุม, H - เซลล์แขวนลอยของเอช uvarum (1 × 108 CFUmL-1), H + SA-SA (2mmolL-1) หลังจาก rstandthen Fi 2H ร่วมกับระบบกันสะเทือน H. uvarum (1 × 108 CFUmL-1), H + SBC-SBC (2%) หลังแรก Fi 2H แล้ว ร่วมกับเอชระงับ uvarum (1 × 108 CFUmL-1) ผลไม้ได้โดยเริ่มต้นที่ถูกอากาศแห้งและปิดผนึกในเอทิลีนเรียงรายกล่องพลาสติกที่ 2 ±1◦C, RH90-95% เพื่อรักษาความชื้นสูง ที่มีคุณภาพหลังการเก็บเกี่ยวและการทำงานของเอนไซม์ของผลไม้ที่ได้รับการประเมินในช่วงเวลา 10 วัน 100 ผลไม้ประกอบด้วยซ้ำเดียว ทดลองซ้ำเป็นครั้งที่สองกับสามซ้ำต่อการรักษา.
2.6 การวิเคราะห์คุณภาพขององุ่น
2.6.1 ดัชนีบราวนิ่งบราวนิ่ง (BI) ของเข็ม-ก้านและก้านดอกได้รับการประเมินตามการเกิดสีน้ำตาลที่แตกต่างกันของเครื่องชั่งดังต่อไปนี้: 0, ไม่มีการเกิดสีน้ำตาล; 1, การเกิดสีน้ำตาลของเครื่องชั่งน้ำหนักน้อยกว่าหนึ่งในสี่ของพื้นที่การเกิดสีน้ำตาล 2, สีน้ำตาลเกล็ดน้อยกว่า 1/2 ของพื้นที่สีน้ำตาล 3, สีน้ำตาลเกล็ดน้อยกว่าสามในสี่ของพื้นที่การเกิดสีน้ำตาล; 4 กว่า 3/4 ของพื้นที่สีน้ำตาล ดัชนีการเกิดสีน้ำตาลที่คำนวณได้จากสูตร, BI = (DF) / ND, โดย d เป็นสีน้ำตาลของเครื่องชั่งในองุ่นและ F คือปริมาณของแต่ละ; N คือจำนวนรวมขององุ่นการตรวจสอบและ D คือการเกิดสีน้ำตาลที่สูงที่สุดของเครื่องชั่ง.
2.6.2 การเกิดการสลายตัวและน้ำหนักลดจำนวนของผลไม้ผุ (A) กับจำนวนของผลไม้ทั้งหมด (B) ที่คำนวณเป็นอัตราการเกิดการสลายตัว (A / B) .Results ที่แสดงเป็นร้อยละของผลไม้ที่มีมวลขององุ่น decay.The เป็น โดยวัดจากความสมดุล MP2000-2 (± 0.001g) ก่อนการรักษา (ก) และหลังการเก็บรักษา (ข) การสูญเสียมวลที่คำนวณได้เป็น (ข) /.
2.6.3 ความแน่น rmness ค่าไฟของแต่ละองุ่นแต่ละวัดที่จุดของภูมิภาคแถบเส้นศูนย์สูตรใช้ TA-XT2i Texture Analyser (เสถียร Micro Systems Ltd สหราชอาณาจักร) พร้อมกับชั้นขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 6 มมที่สอบสวน probe.The ลงไปปัดตัวอย่างที่ความเร็ว ของ 1mms-1 และแรงสูงสุด (N) เป็นนิยาม (ติล et al., 2010)
B. cinerea แยกได้จากเบอร์รี่องุ่นแสดงราสีเทาทั่วไปและเก็บไว้ในอาหารเลี้ยงเชื้อเดกซ์โทรสมันฝรั่ง (PDA, สารสกัดจาก 200mL ของมันฝรั่งต้ม dextrose 20 กรัมและ 20 กรัมวุ้นในส 1000ml น้ำกลั่น) ที่4◦C ก่อนที่จะใช้ซีเนเรียบีเป็นสดเพาะเลี้ยงบนแผ่น PDA ที่แขวนลอย23◦Cสปอร์ได้จัดทำขึ้นโดยการเอาสปอร์จาก 7 วันวัฒนธรรมเก่ากับ Inoculator ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วระงับในน้ำกลั่นปลอดเชื้อมีความเข้มข้นต้องการ 1 × 105 สปอร์ ML-1 ซึ่งเป็นที่คาดกันโดยใช้ hemacytometer (XB-K-25; เซี่ยงไฮ้, จีน).
2.2 ศัตรู
ศัตรูยีสต์ที่แยกได้จากพื้นผิวของสตรอเบอร์รี่และเอ็ดสายการระบุเป็นเอช uvarum อยู่บนพื้นฐานของการวิเคราะห์ความคล้ายคลึงกันของรูปร่างลักษณะของลักษณะทางสรีรวิทยาและชีวเคมี 26S rDNA D1 / D2 ลำดับโดเมน (จำนวนภาคยานุวัติ GenBank: JX125041) ยีสต์เป็นที่เลี้ยงใน 250mL รูปกรวยชั้นถามกับเดกซ์โทรสมันฝรั่ง 100mL (PDB, สารสกัดจาก 200mL ของมันฝรั่งต้ม dextrose 20 กรัมในน้ำกลั่นส 1000ml) ในเครื่องปั่นแบบหมุนที่ 180rmin-1, 28 ◦Cสำหรับ 24 ชั่วโมง เซลล์ยีสต์ได้มาจากการปั่นแยกที่ 6000 ×กรัม 15 นาที (at4◦C) และจากนั้นอีกครั้งที่ลอยอยู่ในน้ำกลั่นผ่านการฆ่าเชื้อ ความเข้มข้นของยีสต์มีการปรับตามความจำเป็นที่แตกต่างกันสำหรับการทดลองใช้ hemacytometer.
2.3 ผลไม้
เบอร์รี่องุ่น (Vitis vinifera พันธุ์ L. . Kyoho) ได้รับการเก็บเกี่ยวในช่วงเช้าจากไร่องุ่นใน Jiangxin โจว, เมืองหนานจิงประเทศจีนและเลือกขึ้นอยู่กับขนาดและการขาดการบาดเจ็บทางร่างกายหรือการติดเชื้อ องุ่นถูกผิวฆ่าเชื้อด้วยโซเดียมไฮโปคลอไรต์ 2% สำหรับ 2min, ล้างด้วยน้ำประปาและแห้งในอากาศก่อนการใช้งาน.
2.4 cacy Fi Ef ของ H.uvarum รวมที่มีความเข้มข้นแตกต่างกันของ SA (หรือ SBC) ในการควบคุมของราสีเทาในผลไม้องุ่น
เบอร์รี่องุ่นถูกแบ่งออกเป็น 5 กลุ่ม กลุ่มที่สามของผลเบอร์รี่ถูกแช่อยู่ในการแก้ปัญหา SA ที่มีความเข้มข้นของ 1, 2 และ 4mmolL-1 สำหรับ 2min ตามลำดับ กลุ่มที่สี่ไม่ได้ treated.The กลุ่มสุดท้ายที่ถูกแช่อยู่ในน้ำกลั่นปลอดเชื้อ
ถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุม หลังจากที่อากาศแห้ง, ผลไม้ที่เก็บไว้ได้รับการรักษาที่25◦C, RH สภาพ 90-95% เป็นเวลา 1 วัน แผลเครื่องแบบกว้าง 4 มมลึกและ 3mm ถูกสร้างขึ้นที่เส้นศูนย์สูตรของแต่ละผลไม้โดยใช้ปลายเข็มผ่าตัดปลอดเชื้อ aliquots (10? L) 1 × 108 CFUmL-1 ระงับยีสต์ถูกปิเปตในเว็บไซต์แผลยกเว้นกลุ่มควบคุมที่ได้รับการรักษาด้วยน้ำหมัน หลังจาก 2H, 10? ลิตร 1 × 105 sporesmL-1 ระงับการ cinerea บีได้รับเชื้อเป็นแผลแต่ละ ผลไม้ทั้งหมดเหล่านี้ถูก airdried อีกครั้งและเก็บไว้แล้วที่25◦C, RH 90-95% เป็นเวลา 3 วัน เส้นผ่าศูนย์กลางแผลและเกิดโรคได้รับการพิจารณาหลังจากบ่ม สามสิบผลไม้ประกอบด้วยซ้ำเดียว ทดลองซ้ำเป็นครั้งที่สองกับสามซ้ำต่อการรักษา ผลกระทบของการ H.uvarum รวมที่มีความเข้มข้นแตกต่างกันของ SBC ในเส้นผ่าศูนย์กลางแผลองุ่นและการเกิดโรคของเชื้อ B. cinerea ได้ศึกษาโดยใช้ขั้นตอนเช่นเดียวกับการแก้ปัญหา SA.The SBC ของ 1, 2 และ 4% ความเข้มข้นถูกนำมาใช้.
2.5 ผลกระทบจากเอช uvarum ร่วมกับ SA หรือ SBC ต่อคุณภาพหลังการเก็บเกี่ยวและกิจกรรมของเอนไซม์ของผลไม้เหมือนเดิมในช่วงเย็นเก็บ
ผลไม้เหมือนเดิมถูกพ่นด้วย: การควบคุม - น้ำกลั่นปลอดเชื้อเป็นตัวควบคุม, H - เซลล์แขวนลอยของเอช uvarum (1 × 108 CFUmL-1), H + SA-SA (2mmolL-1) หลังจาก rstandthen Fi 2H ร่วมกับระบบกันสะเทือน H. uvarum (1 × 108 CFUmL-1), H + SBC-SBC (2%) หลังแรก Fi 2H แล้ว ร่วมกับเอชระงับ uvarum (1 × 108 CFUmL-1) ผลไม้ได้โดยเริ่มต้นที่ถูกอากาศแห้งและปิดผนึกในเอทิลีนเรียงรายกล่องพลาสติกที่ 2 ±1◦C, RH90-95% เพื่อรักษาความชื้นสูง ที่มีคุณภาพหลังการเก็บเกี่ยวและการทำงานของเอนไซม์ของผลไม้ที่ได้รับการประเมินในช่วงเวลา 10 วัน 100 ผลไม้ประกอบด้วยซ้ำเดียว ทดลองซ้ำเป็นครั้งที่สองกับสามซ้ำต่อการรักษา.
2.6 การวิเคราะห์คุณภาพขององุ่น
2.6.1 ดัชนีบราวนิ่งบราวนิ่ง (BI) ของเข็ม-ก้านและก้านดอกได้รับการประเมินตามการเกิดสีน้ำตาลที่แตกต่างกันของเครื่องชั่งดังต่อไปนี้: 0, ไม่มีการเกิดสีน้ำตาล; 1, การเกิดสีน้ำตาลของเครื่องชั่งน้ำหนักน้อยกว่าหนึ่งในสี่ของพื้นที่การเกิดสีน้ำตาล 2, สีน้ำตาลเกล็ดน้อยกว่า 1/2 ของพื้นที่สีน้ำตาล 3, สีน้ำตาลเกล็ดน้อยกว่าสามในสี่ของพื้นที่การเกิดสีน้ำตาล; 4 กว่า 3/4 ของพื้นที่สีน้ำตาล ดัชนีการเกิดสีน้ำตาลที่คำนวณได้จากสูตร, BI = (DF) / ND, โดย d เป็นสีน้ำตาลของเครื่องชั่งในองุ่นและ F คือปริมาณของแต่ละ; N คือจำนวนรวมขององุ่นการตรวจสอบและ D คือการเกิดสีน้ำตาลที่สูงที่สุดของเครื่องชั่ง.
2.6.2 การเกิดการสลายตัวและน้ำหนักลดจำนวนของผลไม้ผุ (A) กับจำนวนของผลไม้ทั้งหมด (B) ที่คำนวณเป็นอัตราการเกิดการสลายตัว (A / B) .Results ที่แสดงเป็นร้อยละของผลไม้ที่มีมวลขององุ่น decay.The เป็น โดยวัดจากความสมดุล MP2000-2 (± 0.001g) ก่อนการรักษา (ก) และหลังการเก็บรักษา (ข) การสูญเสียมวลที่คำนวณได้เป็น (ข) /.
2.6.3 ความแน่น rmness ค่าไฟของแต่ละองุ่นแต่ละวัดที่จุดของภูมิภาคแถบเส้นศูนย์สูตรใช้ TA-XT2i Texture Analyser (เสถียร Micro Systems Ltd สหราชอาณาจักร) พร้อมกับชั้นขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 6 มมที่สอบสวน probe.The ลงไปปัดตัวอย่างที่ความเร็ว ของ 1mms-1 และแรงสูงสุด (N) เป็นนิยาม (ติล et al., 2010)
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.1 . เชื้อโรคเชื้อ
B ขาวถูกแยกจากองุ่นเบอร์รี่แสดงแม่พิมพ์สีเทาทั่วไปและเก็บไว้ในอาหารเลี้ยงเชื้อ potato dextrose agar ( PDA , โลชั่น และ สารสกัดจากมันฝรั่งต้ม , dextrose agar และ 20 กรัม 20 กรัม ในน้ำกลั่น 1000ml ) ที่ 4 ◦ C ก่อนใช้ พ.ถูกสดบนอาหาร PDA แผ่นขาวที่ 23 ◦ C สปอร์แขวนลอย เตรียมเอาสปอร์จากอายุ 7 วัฒนธรรมกับหมันความเจียมเนื้อเจียมตัวแล้วระงับในน้ำกลั่นปลอดเชื้อจะต้องใช้สมาธิ 1 × 105 สปอร์มิลลิลิตร− 1 ซึ่งวิธี hemacytometer ( xb-k-25 ; เซี่ยงไฮ้ , จีน )
. .
ปฏิปักษ์การแยกยีสต์ปฏิปักษ์จากพื้นผิวของสตรอเบอร์รี่และ identi จึงเอ็ด คือ uvarum ตามความคล้ายคลึงกันของโครงสร้างและสรีรวิทยา ชีวเคมีและ D1 / D2 – 26 ชนิดลำดับโดเมน ( ขนาดเข้าหมายเลข : jx125041 ) ยีสต์ที่เลี้ยงใน 250ml เออร์เลนเมเยอร์flถามด้วย 100ml 200ml ( PDB Potato Dextrose , สารสกัดจากมันฝรั่งต้ม20 กรัมเดกซ์โทรสใน 1000ml น้ำกลั่นในเครื่องปั่น gyratory ที่ 180rmin − 1 , 28 ◦องศาเซลเซียส เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ยีสต์เซลล์ได้มาโดยวรรณนา 6000 × G สำหรับ 15 นาที ( at4 ◦ C ) แล้วจะเป็นหมันชั่วคราวในน้ำกลั่น ยีสต์เข้มข้น ปรับข้อมูลที่จําเป็นสําหรับการทดลองต่างๆ โดยใช้ hemacytometer .
2.3 ผลเบอร์รี่องุ่นผลไม้องุ่น vinifera
( L . cv .เคียวโฮะ ) เก็บในตอนเช้า จากไร่องุ่นใน jiangxin โจว , เมืองหนานจิง , จีน , และเลือกขึ้นอยู่กับขนาดและการขาดงานของการบาดเจ็บทางกายภาพหรือการติดเชื้อ องุ่นเป็นผิวฆ่าเชื้อด้วย 2% โซเดียม ไฮโปคลอไรท์สำหรับ 2min ล้างด้วยน้ำประปา และแห้งในอากาศก่อนใช้
2.4 . EF จึง cacy .uvarum รวมกับระดับความเข้มข้นของซา ( ภาค ) ในการควบคุมสีเทาโมลด์ในองุ่นผลไม้
องุ่นเบอร์รี่ แบ่งออกเป็น 5 กลุ่ม กลุ่มเบอร์รี่ถูกแช่อยู่ในซาโซลูชั่นที่มีความเข้มข้น 1 , 2 และ 4mmoll − 1 สำหรับ 2min ตามลำดับ กลุ่มที่สี่ คือ ไม่ได้รับการรักษา กลุ่มสุดท้ายที่แช่ในน้ำกลั่นปลอดเชื้อ
ที่ใช้ในการควบคุม หลังจากอากาศแห้งรับผลไม้ที่อุณหภูมิ 25 ◦ C ความชื้นสัมพัทธ์ 90 - 95 % นาน 1 วัน บาดแผลลึกและกว้าง เครื่องแบบของ 4mm 3mm ทำที่เส้นศูนย์สูตรของผลไม้แต่ละ โดยใช้ปลายเข็มปลอดเชื้อผ่า . เฉยๆ ( 10 L ) 1 × 108 cfuml − 1 ยีสต์ช่วงล่างเป็น pipetted เข้าไปในแผลสด ยกเว้นกลุ่มควบคุมซึ่งได้รับการรักษาด้วยน้ำหมัน หลังมือสอง10 ลิตร 1 × 105 sporesml − 1 ระงับพ. ขาวเป็นเชื้อแต่ละบาดแผล ทั้งหมดผลไม้เหล่านี้เป็น airdried อีกครั้งแล้วเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 25 ◦ C ความชื้นสัมพัทธ์ 90 - 95 % เป็นเวลา 3 วัน การบาดเจ็บและโรคอุบัติการณ์เป็นเส้นผ่าศูนย์กลางหลังจากการบ่ม สามสิบผลไม้ constituted เดียวจําลอง และทำการทดลองซ้ำ 2 ครั้ง 3 ซ้ำ ต่อ การรักษา ผลของ huvarum รวมกับระดับความเข้มข้นของ SBC บนเส้นผ่าศูนย์กลางแผลองุ่นและโรคอุบัติการณ์การติดเชื้อ B . cinerea ) โดยใช้วิธีการที่คล้ายกันสำหรับซา และโซลูชั่นของภาค 1 , 2 และ 4 เปอร์เซ็นต์ความเข้มข้นที่ใช้
2.5 ผลของ H . uvarum ร่วมกับ SA ภาคต่อคุณภาพหลังการเก็บเกี่ยวของผลสมบูรณ์ในระหว่างกิจกรรมของห้องเย็น
ผลไม้ยังคงพ่นฆ่าเชื้อน้ำและควบคุมเช่นการควบคุม , H และเซลล์แขวนลอยของ H . uvarum ( 1 × 108 cfuml − 1 ) , ( − ( − 1 2mmoll ซาซา ) หลังจาก 2H จึง rstandthen ร่วมกับ H . uvarum ระงับ ( 1 × 108 cfuml − 1 , − ( SBC ) SBC ( 2% ) หลังจาก 2H จึงตัดสินใจเดินทางแล้วในการรวมกันกับ uvarum ระงับ ( 1 × 108 cfuml − 1 )ผลไม้แห้งและปิดผนึกในกล่องพลาสติกพลาสติกเรียงราย 2 ± 1 ◦ C rh90 – 95 % รักษาความชื้นสูง คุณภาพหลังการเก็บเกี่ยวและเอนไซม์ต่างๆ ผลไม้ ได้แก่ ช่วงเวลา 10 วัน 100 เดียว ผลไม้จึงจําลอง และทำการทดลองซ้ำ 2 ครั้งละ 3 ซ้ำการทดลอง
2.6 การวิเคราะห์คุณภาพขององุ่น
ดูแล .สีน้ำตาลสีน้ำตาล ( บี ) ดัชนีดัชนีของก้านขั้ว ขัดขวาง และประเมินตามความแตกต่างของระดับการดังนี้ 0 , ไม่มีสีน้ำตาล ; 1 , สีน้ำตาลขนาดน้อยกว่าหนึ่งในสี่ของพื้นที่สีน้ำตาล 2 บราวนิ่งขนาดไม่น้อยกว่า 1 / 2 ของบราวนิ่ง พื้นที่ 3 ไม่น้อยกว่าสามในสี่ของเกล็ดสีน้ำตาล ของบราวนิ่ง พื้นที่ 4 , มากกว่า 3 / 4 ของพื้นที่สีน้ำตาล .สีน้ำตาล ดัชนีที่คำนวณโดยสูตรบี = ( DF ) / ND ที่ D เป็นสีน้ำตาลของเกล็ดบนองุ่นและ f คือปริมาณของตน ; n คือ จํานวนองุ่นตรวจสอบและ D คือสูงสุด สีน้ำตาล ขนาด
ดาวน์โหลด . การเกิดฟันผุและการสูญเสียน้ำหนักจำนวนผุ ผลไม้ ( ) กับจำนวนของผล ( B ) มีค่าเป็นผุ อุบัติการณ์ ( A / B )ผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็นร้อยละของผลไม้ที่มีการผุ มวลขององุ่นที่ถูกวัดโดยความสมดุล mp2000-2 ( ± 0.001g ) ก่อนการรักษา ( A ) และหลังกระเป๋า ( B ) การสูญเสียมวลคำนวณเป็น ( − ) B / A .
2.6.3 . กระชับ จึง rmness คุณค่าขององุ่นในแต่ละบุคคลถูกวัดที่จุดของเส้นศูนย์สูตรใช้ ta-xt2i เนื้อชำแหละ ( ระบบ จำกัด ไมโคร ที่มั่นคงสหราชอาณาจักร ) อุปกรณ์ที่มีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 6mm flในการสอบสวน การสอบสวนที่สืบทอดประสบการณ์ตัวอย่างที่ความเร็วของ 1mms − 1 และพลังสูงสุด ( N ) คือ เด จึงเน็ด ( Castillo et al . , 2010 ) .
B ขาวถูกแยกจากองุ่นเบอร์รี่แสดงแม่พิมพ์สีเทาทั่วไปและเก็บไว้ในอาหารเลี้ยงเชื้อ potato dextrose agar ( PDA , โลชั่น และ สารสกัดจากมันฝรั่งต้ม , dextrose agar และ 20 กรัม 20 กรัม ในน้ำกลั่น 1000ml ) ที่ 4 ◦ C ก่อนใช้ พ.ถูกสดบนอาหาร PDA แผ่นขาวที่ 23 ◦ C สปอร์แขวนลอย เตรียมเอาสปอร์จากอายุ 7 วัฒนธรรมกับหมันความเจียมเนื้อเจียมตัวแล้วระงับในน้ำกลั่นปลอดเชื้อจะต้องใช้สมาธิ 1 × 105 สปอร์มิลลิลิตร− 1 ซึ่งวิธี hemacytometer ( xb-k-25 ; เซี่ยงไฮ้ , จีน )
. .
ปฏิปักษ์การแยกยีสต์ปฏิปักษ์จากพื้นผิวของสตรอเบอร์รี่และ identi จึงเอ็ด คือ uvarum ตามความคล้ายคลึงกันของโครงสร้างและสรีรวิทยา ชีวเคมีและ D1 / D2 – 26 ชนิดลำดับโดเมน ( ขนาดเข้าหมายเลข : jx125041 ) ยีสต์ที่เลี้ยงใน 250ml เออร์เลนเมเยอร์flถามด้วย 100ml 200ml ( PDB Potato Dextrose , สารสกัดจากมันฝรั่งต้ม20 กรัมเดกซ์โทรสใน 1000ml น้ำกลั่นในเครื่องปั่น gyratory ที่ 180rmin − 1 , 28 ◦องศาเซลเซียส เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ยีสต์เซลล์ได้มาโดยวรรณนา 6000 × G สำหรับ 15 นาที ( at4 ◦ C ) แล้วจะเป็นหมันชั่วคราวในน้ำกลั่น ยีสต์เข้มข้น ปรับข้อมูลที่จําเป็นสําหรับการทดลองต่างๆ โดยใช้ hemacytometer .
2.3 ผลเบอร์รี่องุ่นผลไม้องุ่น vinifera
( L . cv .เคียวโฮะ ) เก็บในตอนเช้า จากไร่องุ่นใน jiangxin โจว , เมืองหนานจิง , จีน , และเลือกขึ้นอยู่กับขนาดและการขาดงานของการบาดเจ็บทางกายภาพหรือการติดเชื้อ องุ่นเป็นผิวฆ่าเชื้อด้วย 2% โซเดียม ไฮโปคลอไรท์สำหรับ 2min ล้างด้วยน้ำประปา และแห้งในอากาศก่อนใช้
2.4 . EF จึง cacy .uvarum รวมกับระดับความเข้มข้นของซา ( ภาค ) ในการควบคุมสีเทาโมลด์ในองุ่นผลไม้
องุ่นเบอร์รี่ แบ่งออกเป็น 5 กลุ่ม กลุ่มเบอร์รี่ถูกแช่อยู่ในซาโซลูชั่นที่มีความเข้มข้น 1 , 2 และ 4mmoll − 1 สำหรับ 2min ตามลำดับ กลุ่มที่สี่ คือ ไม่ได้รับการรักษา กลุ่มสุดท้ายที่แช่ในน้ำกลั่นปลอดเชื้อ
ที่ใช้ในการควบคุม หลังจากอากาศแห้งรับผลไม้ที่อุณหภูมิ 25 ◦ C ความชื้นสัมพัทธ์ 90 - 95 % นาน 1 วัน บาดแผลลึกและกว้าง เครื่องแบบของ 4mm 3mm ทำที่เส้นศูนย์สูตรของผลไม้แต่ละ โดยใช้ปลายเข็มปลอดเชื้อผ่า . เฉยๆ ( 10 L ) 1 × 108 cfuml − 1 ยีสต์ช่วงล่างเป็น pipetted เข้าไปในแผลสด ยกเว้นกลุ่มควบคุมซึ่งได้รับการรักษาด้วยน้ำหมัน หลังมือสอง10 ลิตร 1 × 105 sporesml − 1 ระงับพ. ขาวเป็นเชื้อแต่ละบาดแผล ทั้งหมดผลไม้เหล่านี้เป็น airdried อีกครั้งแล้วเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 25 ◦ C ความชื้นสัมพัทธ์ 90 - 95 % เป็นเวลา 3 วัน การบาดเจ็บและโรคอุบัติการณ์เป็นเส้นผ่าศูนย์กลางหลังจากการบ่ม สามสิบผลไม้ constituted เดียวจําลอง และทำการทดลองซ้ำ 2 ครั้ง 3 ซ้ำ ต่อ การรักษา ผลของ huvarum รวมกับระดับความเข้มข้นของ SBC บนเส้นผ่าศูนย์กลางแผลองุ่นและโรคอุบัติการณ์การติดเชื้อ B . cinerea ) โดยใช้วิธีการที่คล้ายกันสำหรับซา และโซลูชั่นของภาค 1 , 2 และ 4 เปอร์เซ็นต์ความเข้มข้นที่ใช้
2.5 ผลของ H . uvarum ร่วมกับ SA ภาคต่อคุณภาพหลังการเก็บเกี่ยวของผลสมบูรณ์ในระหว่างกิจกรรมของห้องเย็น
ผลไม้ยังคงพ่นฆ่าเชื้อน้ำและควบคุมเช่นการควบคุม , H และเซลล์แขวนลอยของ H . uvarum ( 1 × 108 cfuml − 1 ) , ( − ( − 1 2mmoll ซาซา ) หลังจาก 2H จึง rstandthen ร่วมกับ H . uvarum ระงับ ( 1 × 108 cfuml − 1 , − ( SBC ) SBC ( 2% ) หลังจาก 2H จึงตัดสินใจเดินทางแล้วในการรวมกันกับ uvarum ระงับ ( 1 × 108 cfuml − 1 )ผลไม้แห้งและปิดผนึกในกล่องพลาสติกพลาสติกเรียงราย 2 ± 1 ◦ C rh90 – 95 % รักษาความชื้นสูง คุณภาพหลังการเก็บเกี่ยวและเอนไซม์ต่างๆ ผลไม้ ได้แก่ ช่วงเวลา 10 วัน 100 เดียว ผลไม้จึงจําลอง และทำการทดลองซ้ำ 2 ครั้งละ 3 ซ้ำการทดลอง
2.6 การวิเคราะห์คุณภาพขององุ่น
ดูแล .สีน้ำตาลสีน้ำตาล ( บี ) ดัชนีดัชนีของก้านขั้ว ขัดขวาง และประเมินตามความแตกต่างของระดับการดังนี้ 0 , ไม่มีสีน้ำตาล ; 1 , สีน้ำตาลขนาดน้อยกว่าหนึ่งในสี่ของพื้นที่สีน้ำตาล 2 บราวนิ่งขนาดไม่น้อยกว่า 1 / 2 ของบราวนิ่ง พื้นที่ 3 ไม่น้อยกว่าสามในสี่ของเกล็ดสีน้ำตาล ของบราวนิ่ง พื้นที่ 4 , มากกว่า 3 / 4 ของพื้นที่สีน้ำตาล .สีน้ำตาล ดัชนีที่คำนวณโดยสูตรบี = ( DF ) / ND ที่ D เป็นสีน้ำตาลของเกล็ดบนองุ่นและ f คือปริมาณของตน ; n คือ จํานวนองุ่นตรวจสอบและ D คือสูงสุด สีน้ำตาล ขนาด
ดาวน์โหลด . การเกิดฟันผุและการสูญเสียน้ำหนักจำนวนผุ ผลไม้ ( ) กับจำนวนของผล ( B ) มีค่าเป็นผุ อุบัติการณ์ ( A / B )ผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็นร้อยละของผลไม้ที่มีการผุ มวลขององุ่นที่ถูกวัดโดยความสมดุล mp2000-2 ( ± 0.001g ) ก่อนการรักษา ( A ) และหลังกระเป๋า ( B ) การสูญเสียมวลคำนวณเป็น ( − ) B / A .
2.6.3 . กระชับ จึง rmness คุณค่าขององุ่นในแต่ละบุคคลถูกวัดที่จุดของเส้นศูนย์สูตรใช้ ta-xt2i เนื้อชำแหละ ( ระบบ จำกัด ไมโคร ที่มั่นคงสหราชอาณาจักร ) อุปกรณ์ที่มีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 6mm flในการสอบสวน การสอบสวนที่สืบทอดประสบการณ์ตัวอย่างที่ความเร็วของ 1mms − 1 และพลังสูงสุด ( N ) คือ เด จึงเน็ด ( Castillo et al . , 2010 ) .
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภาษาอื่น ๆ
การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.
- ฉันเคยพูดว่าฉันเชื่อใจคุณเกี่ยวกับคุณและ
- แม่อยู่ต่างจังหวัด
- toward a wide range of Gram-positive bac
- เหลือฉันคนเดียว
- ภายในเดือนนี้
- ต้นทุนที่ฉันให้คุณเป็นตัวเลขคราวๆ
- skewer
- ร้านค้า
- The various systems in the body not reco
- who is she
- อื่น
- ประกอบด้วยบริการโทรศัพท์พื้นฐานและบริการ
- ทำงานด้านไหน
- ฉันไม่ชอบคนเมาเหล้า
- Wintersare very long and cold in Russia,
- ฉันไม่ชอบคนเมาเหล้า
- การผ่าน
- The genome sequence, unveiled in the sci
- As expected, theses results point out th
- ความรักก็เหมือนผีเสื้อ เรายิ่งวิ่งตามมัน
- They were waiting to me when I arrived
- คุณไม่ชอบฉัน
- I feel that the will more close to gradu
- tidy.
