2.2. Mycorrhization of P. pinaster

2.2. Mycorrhization of P. pinaster seedlings
The fungal isolates used in these experiments belong to the collection
of Escola Superior de Biotecnologia and have been maintained by
successive transfers in Potato Dextrose Agar (PDA, Sigma) and in
modified Melin Norkrans agar (MMN, Marx, 1969). They are referenced in the collection as: ref. SB-01, Suillus bovinus (Pers.) Roussel
and ref. RH-2, Rhizopogon roseolus. These isolates were chosen for
their compatibility with P. pinaster in previous laboratory studies
(unpublished data) and in vitro resistance to cadmium (data not
shown).
P. pinaster seeds were collected in the area of Ponte de Lima,
Northern Portugal, from five adult trees classified as plus. They were
disinfected with hydrogen peroxide as described by Pera and
Alvarez (1995). Seedlings were germinated in water-agar (10%) and
transferred to individual cells of PVC tubes containing 45 cm3 of substrate
composed by sieved peat, 2 mm mesh and vermiculite (no 3,
Neoquímica) in a ratio of 1:1. The substrate mixture was autoclaved
twice over two consecutive days.
Fungal inoculation was performed by injecting 5 ml of three
weeks old mycelial suspensions (ca. 180 mg of fresh weight) to the
substrate of each cell containing 1-week old seedlings. Only one isolate
of each ECM fungal species was used in these experiments. A control
treatment with non-inoculated seedlings was also established.
The experiment was performed in a controlled growth room (20 °C,
70% humidity and 12 h light photoperiod).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2. Mycorrhization ของกล้าไม้ P. pinaster
เชื้อราที่แยกได้ใช้ในการทดลองเหล่านี้เป็นของคอลเลกชัน
ของ Escola ห้องเด Biotecnologia และได้รับการรักษาโดย
โอนต่อ ในมันฝรั่งขึ้น Agar (PDA ซิก) และใน
แก้ไข Melin Norkrans agar (MMN, Marx, 1969) พวกเขาถูกอ้างอิงในการเรียกเก็บเงินเป็น: อ้างอิง SB-01, Suillus bovinus (อาทิ) Roussel
และ RH-2 อ้างอิง Rhizopogon roseolus แยกเหล่านี้ถูกเลือกสำหรับ
ความเข้ากันได้กับ P. pinaster ในห้องปฏิบัติการก่อนหน้านี้ศึกษา
(unpublished data) และความต้านทานต่อแคดเมียมใน (ข้อมูลไม่
แสดง) .
P. pinaster เมล็ดถูกเก็บรวบรวมในพื้นที่ของทปงต์เดอลิม่า,
เหนือโปรตุเกส จากต้นไม้ผู้ใหญ่ห้าจัดเป็นบวก พวก
ฆ่าเชื้อ ด้วยไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ตามที่อธิบายไว้ โดยเปอ และ
Alvarez (1995) กล้าไม้มีเปลือกงอกในน้ำ-agar (10%) และ
โอนย้ายไปที่เซลล์แต่ละเซลล์ของท่อ PVC ที่ประกอบด้วย 45 cm3 ของพื้นผิว
ประกอบด้วยพรุ sieved ตาข่าย 2 มม. และ vermiculite (ไม่ 3,
Neoquímica) ในอัตราส่วน 1:1 พื้นผิวส่วนผสมถูก autoclaved
สอง 2 ต่อวัน
ทำ inoculation เชื้อรา โดย injecting ml 5 สาม
สัปดาห์พัก mycelial (ca 180 มิลลิกรัมของน้ำหนักสด) ไป
พื้นผิวของแต่ละเซลล์ประกอบด้วยกล้าไม้ 1 - สัปดาห์เก่า แยกเดียว
ของ ECM แต่ละ สายพันธุ์เชื้อราถูกใช้ในการทดลองเหล่านี้ ตัวควบคุม
ยังก่อรักษา ด้วย inoculated ไม่กล้าไม้
ทดลองทำในห้องควบคุมการเจริญเติบโต (20 ° C,
12 h แสงช่วงแสงและความชื้น 70%)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2 . mycorrhization P .
pinaster ต้นกล้าแยกเชื้อราที่ใช้ในการทดลองนี้เป็นคอลเลกชันของ Escola Superior de biotecnologia

และได้รับการรักษาต่อเนื่อง โดยโอนในอาหารเลี้ยงเชื้อ potato dextrose agar ( PDA , Sigma ) และในการ norkrans
เมลิน ( MMN มาร์กซ์ , 1969 ) พวกเขามีการอ้างอิงในคอลเลกชัน เช่น อังกฤษ sb-01 suillus bovinus , ( คน ) และ rh-2 รูสเซล
) ,rhizopogon roseolus . เหล่านี้สามารถถูกเลือกเพื่อความเข้ากันได้กับหน้า pinaster

( ข้อมูลในการศึกษาในห้องปฏิบัติการก่อนหน้านี้พิมพ์ ) และการต้านทานแคดเมียม ( ข้อมูลไม่แสดง

) P pinaster เมล็ดที่เก็บรวบรวมได้ในพื้นที่ของปอนเต เดอ ลิมา ,
โปรตุเกสเหนือจากห้าผู้ใหญ่ต้นไม้จัดเป็นบวก พวกเขา
ฆ่าเชื้อด้วยไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์และ
ตามที่อธิบายไว้โดยเปราอัลวาเรซ ( 1995 ) ต้นกล้ากำลังงอกในน้ำ ( 10% ) และ
ย้ายเซลล์แต่ละเซลล์ของท่อพีวีซี บรรจุ 45 cm3 (
แต่งโดยอีกครั้ง พีท ตาข่าย 2 มม. และเวอร์มิคูไลท์ ( ไม่ 3
neoqu เมืองแก้ว ) ในอัตราส่วน 1 : 1 หลากหลายส่วนผสมสังเคราะห์
สองครั้งมากกว่าสองวันติดต่อกัน โดยฉีดเชื้อราา
3
5 มิลลิลิตร ( ประมาณช่วงล่างของสัปดาห์เก่า180 มิลลิกรัมของน้ำหนักสด )
( ของแต่ละเซลล์ประกอบด้วยต้นเก่า 1-week . เพียง 1 ไอโซเลทเชื้อราแต่ละชนิดผลิต
ถูกใช้ในการทดลองเหล่านี้ การรักษาควบคุม
ปลอดต้นพืชก็สร้าง
ทดสอบในการควบคุมการเจริญเติบโตของห้อง ( 20 ° C ,
70% และความชื้นแสงช่วงแสง 12 ชั่วโมง )