2.4. Long-term biofilm formationEac

2.4. Long-term biofilm formation
Each bacterial strain was inoculated at an initial cell count of about 0.5  106 CFU/ml into screw cap polystyrene test tubes
containing 10 ml skim milk solutions at three dilutions (0.1%, 1.0% and 5.0%), and mixed well. Stainless steel coupons were then immersed in these test tubes as surfaces for bacteria to develop biofilms. Incubations for biofilm development were carried out at 30
C for up to 14 days.During incubation, pH decreased due to bacterial development.To keep pH at around 7.0, sterile sodium hydroxide (NaOH) at 0.1 M,0.3 M, and 1.0 M were daily added to 0.1%, 1.0% and 5.0% skim milk solutions, respectively. These samples were named pH-adjusted samples (or adjusted samples). The other samples (without the addition of NaOH) were called pH-unadjusted samples (or unadjusted samples). When adding NaOH solutions, samples were gently shaken, and the same action was done for the pHunadjusted samples.After every 24 h, samples were taken for pH measurement by a pH meter (HM-25R, DKK-TOA Corporation, Japan), bacterial cell
count of suspension by direct plate count, and evaluation of the adhesion by optical density (OD).
2.5. Direct plate count
The number of planktonic bacterial cells was determined by direct plate count method (Hamanaka, Uchino, Furuse, Han, & Tanaka, 2006). After dilution in sterile distilled water, serial dilutions of B. licheniformis and L. paracasei were plated onto NA and MRS plates, respectively. These plates were incubated at 37
C for 48 h. Plates of L. paracasei were placed in anaerobic conditions as mentioned above. Colonies were counted and results were expressed in log10 CFU/ml.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4 ผู้แต่ง biofilm ระยะยาวต้องใช้แบคทีเรียแต่ละถูก inoculated ที่มีเซลล์เริ่มต้นจำนวนประมาณ 0.5 106 CFU/ml ในหลอดทดสอบสกรูฝาโฟมมี 10 ml อ่านอย่างคร่าว ๆ แก้ปัญหานมที่สาม dilutions (0.1%, 1.0% และ 5.0%), และผสมดี เหล็กกล้าไร้สนิมคูปองแล้วได้ไปในหลอดทดสอบเหล่านี้เป็นพื้นผิวสำหรับแบคทีเรียพัฒนา biofilms Incubations พัฒนา biofilm ได้ดำเนินออกที่ 30 C ถึง 14 วันในระหว่างการบ่ม ค่า pH ลดลงเนื่องจากการพัฒนาแบคทีเรียเพื่อให้ค่า pH ที่ประมาณ 7.0 ใส่โซเดียมไฮดรอกไซด์ (NaOH) 0.1 เมตร 0.3 M และ 1.0 M ได้วันเพิ่ม 0.1%, 1.0% และ 5.0% skim นมโซลูชั่น ตามลำดับ ตัวอย่างเหล่านี้ถูกตั้งชื่อตัวอย่างปรับค่า pH (หรือปรับปรุงตัวอย่าง) ตัวอย่างอื่น ๆ (โดยไม่มีการเพิ่มของ NaOH) ถูกเรียกตัวอย่างไม่ได้ปรับค่า pH (หรือตัวอย่างไม่ได้ปรับ) เพิ่มโซลูชั่น NaOH หวาดวิตกอย่างเบา ๆ และทำการกระทำเดียวกันตัวอย่าง pHunadjustedหลังจากทุก 24 ชม ตัวอย่างที่ถ่ายสำหรับวัดค่า pH ด้วยเครื่องวัดค่า pH (HM 25R, DKK โตอะ คอร์ปอเรชั่น ญี่ปุ่น), เซลล์แบคทีเรียจำนวนการระงับตามจำนวนแผ่นโดยตรง และประเมินผลการยึดเกาะด้วยความหนาแน่นออปติคอล (OD)2.5 จำนวนแผ่นโดยตรงจำนวนเซลล์แบคทีเรีย planktonic ถูกกำหนด โดยวิธีนับจานโดยตรง (Hamanaka, Uchino, Furuse ฮั่น และทานา กะ 2006) หลังจากเจือจางในน้ำกลั่นฆ่าเชื้อ dilutions ประจำเกิด licheniformis และ L. paracasei ถูกชุบลงนาและ MRS แผ่น ตามลำดับ แผ่นเหล่านี้ถูก incubated ที่ 37 C สำหรับ paracasei แผ่น L. 48 h. ถูกวางเงื่อนไขไม่ใช้ดังกล่าวข้างต้น อาณานิคมถูกนับ และผลลัพธ์ถูกแสดงใน log10 CFU/ml

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 ในระยะยาวการสร้างไบโอฟิล์ม
แต่ละสายพันธุ์แบคทีเรียที่เป็นเชื้อที่นับเซลล์เริ่มต้นของประมาณ 0.5? 106 โคโลนี / มิลลิลิตรลงในหลอดทดลองฝาเกลียวสไตรีน
ที่มี 10 มลโซลูชั่นหางนมที่เจือจางสาม (0.1%, 1.0% และ 5.0%) และผสมดี สแตนเลสเหล็กคูปองถูกแช่อยู่แล้วในหลอดทดลองเหล่านี้เป็นพื้นผิวสำหรับแบคทีเรียที่จะพัฒนาไบโอฟิล์ม ฟักตัวของเชื้อสำหรับการพัฒนาไบโอฟิล์มได้ดำเนินการวันที่ 30? C ถึง 14 บ่ม days.During พีเอชลดลงเนื่องจาก development.To แบคทีเรียให้ค่า pH ที่ประมาณ 7.0 โซเดียมไฮดรอกไซหมัน (NaOH) ที่ 0.1, 0.3 M และ 1.0 M มีการเพิ่มทุกวันเพื่อ 0.1%, 1.0% และ 5.0% การแก้ปัญหานมพร่องมันเนยตามลำดับ ตัวอย่างเหล่านี้ถูกตั้งชื่อตัวอย่างปรับค่า pH (หรือกลุ่มตัวอย่างตั้งค่า) ตัวอย่างอื่น ๆ (โดยไม่มีการเติม NaOH) ถูกเรียกว่าค่า pH เท็มเพลตตัวอย่าง (หรือตัวอย่างเท็มเพลต) เมื่อมีการเพิ่มการแก้ปัญหา NaOH ตัวอย่างถูกเขย่าเบา ๆ และดำเนินการเดียวกันคือทำเพื่อ pHunadjusted samples.After ทุก 24 ชั่วโมงตัวอย่างถูกนำสำหรับการวัดค่า pH โดยวัดค่า pH (HM-25R, DKK-TOA คอร์ปอเรชั่นประเทศญี่ปุ่น), แบคทีเรีย เซลล์
นับระงับโดยการนับจานโดยตรงและการประเมินผลของการยึดเกาะโดยความหนาแน่นของแสง (OD)
2.5 แผ่นโดยตรงนับ
จำนวนเซลล์แบคทีเรีย planktonic ถูกกำหนดโดยวิธีการนับจานโดยตรง (Hamanaka, Uchino, Furuse ฮันและทานากะ, 2006) หลังจากที่เจือจางในน้ำกลั่นปลอดเชื้อเจือจางอนุกรมของ B. licheniformis ลิตรและ paracasei ถูกชุบบน NA และนางแผ่นตามลำดับ นำไปบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง แผ่นลิตร paracasei อยู่ในสภาวะไร้ออกซิเจนดังกล่าวข้างต้น อาณานิคมนับและผลที่ได้สามารถแสดงออกใน log10 CFU / ml

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . การพัฒนาในระยะยาว
แต่ละสายพันธุ์แบคทีเรียไบโอฟิล์มเป็นเชื้อที่นับเซลล์เริ่มต้นประมาณ 0.5  106 cfu / ml เป็นสกรูฝาทดสอบท่อบรรจุ 10 ml โฟม
หางนมโซลูชั่นที่ 3 เจือจาง ( 0.1% , 1.0% และ 5.0 เปอร์เซ็นต์ ) และผสมดี คูปองสแตนเลสแล้วแช่ในหลอดทดลองเหล่านี้พื้นผิวสำหรับแบคทีเรียที่จะสร้างไบโอฟิล์ม .incubations การพัฒนาไบโอฟิล์ม ได้ดำเนินการใน 30
C ได้ถึง 14 วัน ในช่วงระยะเวลา pH ลดลงเนื่องจากการพัฒนาแบคทีเรีย รักษา pH ประมาณ 7.0 ปลอดเชื้อ โซเดียมไฮดรอกไซด์ ( NaOH ) 0.1 M 0.3 M , และ 1.0 เมตรทุกวัน เพิ่ม 0.1 , 1.0 , 5.0 , หางนมผงโซลูชั่นตามลำดับ ตัวอย่างเหล่านี้ถูกตั้งชื่อปรับ pH ตัวอย่าง ( หรือปรับตัวอย่าง )ตัวอย่างอื่น ๆ ( โดยไม่เติม NaOH ) ถูกเรียกยังคงอตัวอย่าง ( หรือตัวอย่างยังคง ) เมื่อมีการเพิ่มการใช้โซลูชั่นตัวอย่าง เขย่าเบา ๆและการกระทำเดียวกันคือทำเพื่อ phunadjusted ตัวอย่าง หลังจากที่ทุก 24 ชั่วโมง ตัวอย่าง ถ่ายวัดโดยเครื่องวัดค่าพีเอช ( hm-25r dkk-toa , บริษัท ญี่ปุ่น ) แบคทีเรีย , เซลล์แขวนลอย
นับโดยนับจานโดยตรงและการประเมินผลการซิกแซ็ก ( OD ) .
2.5 นับจานตรง
จำนวนเซลล์แบคทีเรียสิ่งมีชีวิตขนาดเล็กมากในน้ำถูกกำหนดโดยวิธีนับจานโดยตรง ( hamanaka ชิโนฮาน furuse , , , , &ทานากะ , 2006 ) หลังการฆ่าเชื้อในน้ำ เป็นวิธีการของ B . licheniformis และ paracasei ถูกชุบลงในนา และนางแผ่นตามลำดับแผ่นเหล่านี้ถูกบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง
แผ่น L paracasei อยู่ในภาวะไร้อากาศดังกล่าวข้างต้น อาณานิคมได้ถูกนับและผลลัพธ์ที่ได้แสดงออกใน LN CFU / ml