The microorganism used in this study is part of the Jujuy National
University collection and was previously isolated from a
goat's cheese of the Andean region. Itwas identified as L. brevis CJ25
using 16S rRNA gene sequencing. Genomic DNA was used for
amplification using the primers 616 Valt and 630R (Chenoll,
Macian, Elizaquivel, & Aznar, 2007). The resulting PCR products
were purified using the NucleoSpin Extract II Kit (MachereyeNagel,
Düren, Germany) and sequenced using the ABI-PRISM 377 (PEApplied
Biosystems, Foster City, CA, U.S.A.) automated sequencer
and the ABI PRISM BigDye Terminator Cycle Sequencing Ready
Reaction Kit (PE-Applied Biosystems, Foster City, CA, U.S.A.). The
16S rDNA sequence was compared with the NCBI database using
the Sequence Comparison BLAST tool (http//:www.ncbi.nlm.nih.
gov) showing sequence similarity level of 99%. The strain was
subcultured twice for 12 h at 32 C in MRS broth (Britania Co.,
Buenos Aires, Argentina) and used to inoculate (1.5% v/w; initial cell
number corresponding to ca. 6.0 log CFU/g of puree) each of the
purees, under strictly sterile conditions. The fermentations were
carried out for 72 h at 32 C in vacuum sealed plastic bags containing
50 g of each puree. Unstarted purees were used as controls.
จุลินทรีย์ที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้เป็นส่วนหนึ่งของ Jujuy แห่งชาติ
คอลเลกชันมหาวิทยาลัยและถูกแยกออกมาก่อนหน้านี้จาก
ชีสแพะของภูมิภาคแอนเดียน itwas ระบุว่าเป็นลิตร brevis CJ25
ใช้ 16S rRNA ยีนลำดับ DNA ของยีนที่ใช้สำหรับ
การขยายการใช้ไพรเมอร์ 616 Valt และ 630R (Chenoll,
Maci? การ Elizaquivel และ Aznar 2007) ผลิตภัณฑ์ที่เกิด PCR
บริสุทธิ์โดยใช้ NucleoSpin สารสกัด II Kit (MachereyeNagel,
Düren, เยอรมนี) ติดใจใช้ ABI-PRISM 377 (PEApplied
Biosystems, ฟอสเตอร์ซิตี, แคลิฟอร์เนีย, สหรัฐอเมริกา) ซีเควนอัตโนมัติ
และ ABI PRISM BigDye Terminator วงจรลำดับพร้อม
ปฏิกิริยา Kit (PE-Applied Biosystems, ฟอสเตอร์ซิตี, แคลิฟอร์เนีย, สหรัฐอเมริกา)
ลำดับ 16S rDNA เมื่อเทียบกับฐานข้อมูล NCBI ใช้
เครื่องมือลำดับเปรียบเทียบ BLAST (http //:. www.ncbi.nlm.nih
Gov) แสดงระดับลำดับความคล้ายคลึงกันของ 99% สายพันธุ์ที่ได้รับ
? เลี้ยงสองครั้งเป็นเวลา 12 ชั่วโมงที่ 32 C ในน้ำซุป MRS (Britania Co. ,
บัวโนสไอเรสอาร์เจนตินา) และใช้ในการฉีดวัคซีน (1.5% v / w; เซลล์เริ่มต้น
จำนวนที่สอดคล้องกับแคลิฟอร์เนีย 6.0 log CFU / กรัมของน้ำซุปข้น ) แต่ละ
purees ภายใต้เงื่อนไขการฆ่าเชื้ออย่างเคร่งครัด หมักแหนมถูก
ดำเนินการเป็นเวลา 72 ชั่วโมงที่ 32 องศาเซลเซียสในสูญญากาศปิดผนึกถุงพลาสติกที่มี
50 กรัมของแต่ละซุปข้น purees ไม่เริ่มถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุม
การแปล กรุณารอสักครู่..

จุลินทรีย์ที่ใช้ในการศึกษานี้เป็นส่วนหนึ่งของ Jujuy แห่งชาติมหาวิทยาลัย และเคยได้จากคอลเลกชันเนยแพะในภูมิภาคแอนเดียน โดยระบุว่าเป็นแบคทีเรีย cj25 Lการใช้ยีน 16S rRNA ลำดับ . ดีเอ็นเอถูกใช้สำหรับการขยายโดยใช้ไพรเมอร์และมี valt ( chenoll 630r ,macian elizaquivel , และ aznar , 2007 ) ผลตรวจสินค้าเป็นสารสกัดบริสุทธิ์ใช้ 2 ชุด ( machereyenagel nucleospin ,D üเรน , เยอรมนี ) และลำดับการใช้ abi-prism 377 ( peappliedซึ่ง ฟอสเตอร์ ซิตี้ , แคลิฟอร์เนีย , สหรัฐอเมริกา ) ลำดับอัตโนมัติและ ABI ปริซึม bigdye Terminator รอบลำดับพร้อมชุดปฏิกิริยา ( PE Applied Biosystems ฟอสเตอร์ ซิตี้ , แคลิฟอร์เนีย , สหรัฐอเมริกา ) ที่ลำดับ 16S rDNA ถูกเมื่อเทียบกับ ncbi ฐานข้อมูลโดยใช้ลำดับการเปรียบเทียบเครื่องมือระเบิด ( http / / : www.ncbi.nlm.nih .ลำดับ 14 ) แสดงความเหมือนระดับ 99% สายพันธุ์ คือsubcultured สองครั้งเป็นเวลา 12 ชั่วโมงที่ 32 C ใน MRS broth ( บริทตาเนีย จำกัดบัวโนสไอเรส , อาร์เจนตินา ) และใช้ในการฉีดวัคซีน ( 1.5 / w ; เริ่มต้นที่เซลล์ตัวเลขที่ตรงกับประมาณ 6.0 log CFU / กรัมบด ) แต่ละส่วนของpurees , ภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ อย่างเคร่งครัด การ fermentations คือดำเนินการใน 32 องศาเซลเซียส นาน 72 ชั่วโมงในสูญญากาศปิดผนึกถุงพลาสติกที่มี50 กรัมของแต่ละกีวี unstarted purees ที่ใช้ควบคุม
การแปล กรุณารอสักครู่..
