Peripheral blood neutrophils were o

Peripheral blood neutrophils were obtained from buffy
coats of self-reportedly healthy donors (18–40 years), and
approval for use in this study was given during the blood
draw. A prior agreement from all involved was made in order to be included in the study, and the Center of Tropical Medicine Research (Rondonia, Brazil) Research Ethics
Committees (number 108/2010) approved this study.
Briefly after, local asepsis blood was collected in vacuum
tubes containing heparin and diluted in phosphate buffered
saline (PBS, 14 mM NaCl, 2 mM NaH2PO4H2O, 7 mM
Na2HPO412H2O), pH 7.4. In order to separate the leukocytes
Histopaque 1077 was added to the tubes and then the
diluted blood was added carefully to the reagent. After
centrifugation at 400 g for 30 min, the neutrophils were
collected from the bottom of the tube, along with erythrocytes
and transferred to another tube. Lysis of erythrocytes
was performed using lysis buffer (9.98 mM KHCO3,
0.1 mM Na2EDTA). Then the solution was homogenized,
incubated at 8 C for 5 min, and centrifuged. Neutrophils
were washed with PBS and an aliquot of isolated neutrophils
was used for determining the total number of neutrophils
in a Neubauer’s chamber after cell staining (1:20, v/
v) with Turk solution (violet crystal 0.2% in acetic acid 30%).
The purity of the isolated cell population was determined
by Panotic staining of cytospin preparations and by flow
cytometry analysis with CD-66b as a granulocyte marker
(FACscan). The mean purity achieved by our isolation
technique was 98.5% neutrophils.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

นิวโทรฟิลในเลือดได้รับมาจากมือใหม่ปราบผีเสื้อของผู้บริจาคเพื่อสุขภาพตนเองรายงานว่า (18 – 40 ปี), และได้รับอนุมัติสำหรับการใช้ในการศึกษานี้ในเลือดวาด ทำข้อตกลงล่วงหน้าจากทั้งหมดที่เกี่ยวข้องเพื่อรวมในการศึกษา และจริยธรรมวิจัยศูนย์เขตร้อนแพทย์วิจัย (Rondonia บราซิล)คณะกรรมการ (หมายเลข 108/2010) อนุมัติศึกษานี้สั้น ๆ หลัง เลือด asepsis ภายในเก็บรวบรวมในสุญญากาศหลอดที่ประกอบด้วยเฮ และเจือจางในฟอสเฟตบัฟเฟอร์น้ำเกลือ (PBS, NaCl, NaH2PO4H2O, 2 มม. 14 มม. 7 มม.Na2HPO412H2O), ค่า pH 7.4 เพื่อแยกเม็ดเลือดขาวHistopaque 1077 ถูกหลอดแล้วเลือดเจือจางถูกระมัดระวังสารเคมี หลังจากหมุนเหวี่ยงที่ 400 กรัม 30 นาที นิวโทรฟิลถูกรวบรวมจากด้านล่างของหลอด พร้อมกับเม็ดเลือดแดงและโอนย้ายไปหลอด ของเม็ดเลือดแดงดำเนินการโดยใช้ lysis บัฟเฟอร์ (9.98 มม. KHCO30.1 มม. Na2EDTA) แล้ว การแก้ปัญหาถูก homogenizedรับการกกที่ 8 C 5 นาที และจากนั้น นิวโทรฟิลถูกล้าง ด้วย PBS และส่วนลงตัวของนิวโทรฟิลที่แยกใช้สำหรับการกำหนดจำนวนรวมของนิวโทรฟิลในห้อง Neubauer การหลังการย้อมสีเซลล์ (1:20, v /v) กับเติร์กโซลูชัน (คริสตัลไวโอเลต 0.2% กรดอะซิติก 30%)กำหนดความบริสุทธิ์ของประชากรแยกเซลล์Panotic เปรอะเปื้อน ของ cytospin การเตรียมการ และขั้นตอนวิเคราะห์การตรวจวิเคราะห์เซลล์กับ CD-66b เป็นเครื่องหมายของฟิล(FACscan) หมายถึงความบริสุทธิ์โดยการแยกของเราเทคนิคคือ นิวโทรฟิล 98.5%

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

นิวโทรฟิเลือดที่ได้รับจากมือใหม่
เสื้อตัวเองมีรายงานว่าผู้บริจาคที่มีสุขภาพดี (18-40 ปี) และ
ได้รับการอนุมัติสำหรับการใช้งานในการศึกษาครั้งนี้ได้รับในระหว่างเลือด
วาด ข้อตกลงก่อนจากทุกคนที่เกี่ยวข้องที่ถูกสร้างขึ้นเพื่อที่จะได้รวมในการศึกษาและศูนย์การวิจัยของทรอปิคอลแพทยศาสตร์ (รอนโดเนีย, บราซิล) จริยธรรมการวิจัย
คณะกรรมการ (หมายเลข 108/2010) ได้รับการอนุมัติการศึกษาครั้งนี้.
สั้น ๆ หลังจากเลือด asepsis ท้องถิ่นถูกเก็บรวบรวม ในสูญญากาศ
หลอดมีเฮและเจือจางในฟอสเฟตบัฟเฟอร์
น้ำเกลือ (พีบีเอส 14 mm โซเดียมคลอไรด์, 2 mm NaH2PO4H2O 7 มิลลิ
Na2HPO412H2O) ค่า pH 7.4 เพื่อแยกเม็ดเลือดขาว
Histopaque 1077 ถูกบันทึกอยู่ในท่อแล้ว
เลือดเจือจางถูกเพิ่มเข้ามาอย่างรอบคอบเพื่อให้น้ำยา หลังจาก
การหมุนเหวี่ยงที่ 400? กรัมเป็นเวลา 30 นาที, นิวโทรฟิถูก
เก็บรวบรวมจากด้านล่างของหลอดพร้อมกับเม็ดเลือดแดง
และโอนไปยังหลอดอีก สลายของเม็ดเลือดแดง
ถูกดำเนินการโดยใช้บัฟเฟอร์สลาย (9.98 มิลลิ KHCO3,
0.1 มิลลิ Na2EDTA) แล้ววิธีการแก้ปัญหาที่ถูกหดหาย
บ่มที่อุณหภูมิ 8 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาทีและหมุนเหวี่ยง Neutrophils
ถูกล้างด้วยพีบีเอสและนิวโทรฟิหารบางแห่ง
ถูกนำมาใช้สำหรับการกำหนดจำนวนรวมของนิวโทรฟิ
ในห้องของ Neubauer หลังจากการย้อมสีเซลล์ (1:20 v /
V) กับการแก้ปัญหาเติร์ก (คริสตัลสีม่วง 0.2% ในกรดอะซิติก 30%) .
ความบริสุทธิ์ของประชากรเซลล์บางแห่งถูกกำหนด
โดยการย้อมสี Panotic ของการเตรียมการ cytospin และโดยการไหล
cytometry วิเคราะห์กับ CD-66B เป็นเครื่องหมาย granulocyte
(FACScan) ความบริสุทธิ์หมายถึงการประสบความสำเร็จโดยการแยกของเรา
เทคนิคเป็น 98.5 นิวโทรฟิ%

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เม็ดเลือดขาวนิวโทรฟิลได้จากบัฟฟี่เสื้อทัวร์สุขภาพผู้บริจาคโลหิตด้วยตนเอง ( 18 - 40 ปี ) และได้รับการอนุมัติให้ใช้ในการศึกษานี้ได้รับในเลือดวาด สัญญาก่อนจาก ทุกคนทำเพื่อที่จะถูกรวมในการวิจัย และศูนย์วิจัยโรคเขตร้อน ( รอนโดเนีย , บราซิล ) จริยธรรมการวิจัยกรรมการ ( หมายเลข 108 / 2553 ) ได้รับการศึกษาสั้น ๆหลัง เลือดคนสิงคโปร์ท้องถิ่นถูกเก็บในสุญญากาศหลอดเฮปารินและเจือจางในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่มีเกลือ ( NaCl nah2po4h2o พีบีเอส 14 mm , 2 mm 7 มม.na2hpo412h2o ) ที่ pH 7.4 . คำสั่งในการแยกเม็ดเลือดขาวhistopaque ที่ถูกเพิ่มลงในหลอดแล้วเลือดเจือจางเพิ่มอย่างระมัดระวัง การเกิดปฏิกิริยา หลังจากปั่นที่ 400 กรัม เป็นเวลา 30 นาที นิวโทรฟิลคือที่รวบรวมได้จากด้านล่างของหลอด พร้อมกับเม็ดเลือดแดงและโอนไปยังท่ออื่น การสลายของเม็ดเลือดแดงการใช้การสลายบัฟเฟอร์ ( khco3 9.98 มิลลิเมตร0.1 มม. na2edta ) แล้วเป็นโฮโมโซลูชั่น ,บ่มที่อุณหภูมิ 8 องศาเซลเซียส นาน 5 นาที และที่ระดับ . นิวโทรฟิลถูกล้างด้วย pbs เป็นส่วนลงตัวของแยกนิวโทรฟิลล์ถูกใช้เพื่อกำหนดจำนวนของนิวโทรฟิลในห้องของนูเบาเออร์หลังจากย้อม ( 1 V / เซลล์5 ) กับ เติร์ก โซลูชั่น ( คริสตัลสีม่วง 0.2% ในกรดน้ำส้ม 30% )ความบริสุทธิ์ของประชากรแยกเซลล์ถูกกำหนดโดยวิธีการของการเตรียม cytospin และไหล panoticการวิเคราะห์ cd-66b เป็นแกรนูโลไซต์ ( เครื่องหมาย( facscan ) หมายถึงความบริสุทธิ์โดยการแยกของเราเทคนิคคือ 98.5 % นิวโทรฟิล .