2.6. Western blot analysisChanges i

2.6. Western blot analysis
Changes in the levels of photodamaged proteins were evaluated using Western
blot analysis, as reported previously but with slight modifications (Chiang et al.,
2012, 2014). Cells were collected and washed with PBS and then lysed in a lysis buffer.
The cell supernatant was collected and the protein concentration was measured
using the Bradford reagent. The cell lysates contained 30 lg of protein per lane and
were separated using sodium dodecyl sulfate–polyacrylamide gel electrophoresis,
transferred to poly(vinylidene difluoride) membranes, and treated with appropriated
antibodies for Western blotting. b-actin was used to normalize the total
protein amount. Immunoreactive proteins were detected using an ECL Western
blotting detection system (Fujifilm, LAS-4000, Japan), and the signal strengths were
quantified using a densitometric program (MultiGauge V2.2)

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.6 วิเคราะห์น้าแบบตะวันตกการเปลี่ยนแปลงในระดับของโปรตีน photodamaged ได้ถูกประเมินโดยใช้ตะวันตกซับวิเคราะห์ ตามรายงานก่อนหน้านี้ แต่ มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย (เชียง et al.,2012, 2014) เซลล์ถูกรวบรวม และล้าง ด้วย PBS แล้ว นาทีที่ 37uc ใน lysis บัฟเฟอร์เก็บรวบรวมเซลล์ supernatant และโดยวัดความเข้มข้นของโปรตีนใช้สารเคมีที่แบรดฟอร์ด Lysates เซลล์อยู่ lg 30 โปรตีนต่อเลน และแยกจากกันโดยใช้โซเดียม dodecyl ซัลเฟต – การตรวจสอบวิเคราะห์เจอิโอนย้ายไปเยื่อโพลี (vinylidene difluoride) และรักษาด้วยการจัดสรรแอนติบอดีสำหรับ blotting วิธีตะวันตก แอกตินบีใช้ปกติทั้งหมดยอดโปรตีน พบใช้เวส ECL มีโปรตีน immunoreactiveblotting วิธีระบบตรวจจับ (Fujifilm ลา-4000 ญี่ปุ่น), และแรงของสัญญาณวัดโดยใช้โปรแกรม densitometric (MultiGauge V2.2)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.6 เวสเทิร์วิเคราะห์ blot
การเปลี่ยนแปลงในระดับของโปรตีน photodamaged ถูกประเมินโดยใช้เวสเทิร์
วิเคราะห์ blot ตามที่รายงานก่อนหน้านี้ แต่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย (เชียงใหม่ et al.,
2012, 2014) เซลล์ที่ถูกเก็บรวบรวมและล้างด้วยพีบีเอสแล้ว lysed ในบัฟเฟอร์สลาย.
ใสเซลล์ที่ถูกเก็บรวบรวมและความเข้มข้นของโปรตีนที่ถูกวัด
โดยใช้น้ำยา Bradford lysates เซลล์ที่มีอยู่ 30 LG โปรตีนต่อเลนและ
ถูกแยกออกโดยใช้โซเดียมโดเดซิลซัลเฟต polyacrylamide ข่าวคราว,
โอนไปยังโพลี (vinylidene difluoride) เยื่อและรับการรักษาด้วยการจัดสรร
แอนติบอดีสำหรับซับตะวันตก B-โปรตีนถูกใช้ในการปกติรวม
ปริมาณโปรตีน โปรตีน Immunoreactive ถูกตรวจพบใช้ ECL Western
blotting ระบบตรวจจับ (Fujifilm, LAS-4000 ประเทศญี่ปุ่น) และจุดแข็งของสัญญาณที่ถูก
วัดโดยใช้โปรแกรม densitometric (MultiGauge V2.2)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.6 Western blot analysisการเปลี่ยนแปลงในระดับของโปรตีน photodamaged ประเมินโดยใช้แบบตะวันตกblot การวิเคราะห์ , ตามที่รายงานก่อนหน้านี้ แต่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ( เชียงใหม่ ) et al . ,2012 , 2014 ) เซลล์ถูกเก็บและล้างด้วย pbs แล้ว lysed ในการสลายบัฟเฟอร์เซลล์ที่ถูกเก็บรวบรวมและนำโปรตีนความเข้มข้นของวัดการใช้สารเคมีแบรดฟอร์ด เซลล์ lysates ที่มีอยู่ 30 LG ของโปรตีนต่อเลน และแยกโดยใช้โซเดียมโดเดซิลซัลเฟตและ polyacrylamide gel electrophoresis ,พอลิไวนิลิดีนไดฟลูออไรด์ ) โอน membranes และได้รับจัดสรรแอนติบอดีสำหรับ Western blotting . b-actin ใช้ปกติทั้งหมดปริมาณโปรตีน โปรตีน immunoreactive ถูกตรวจพบโดยใช้การทดสอบแบบตะวันตกวิธีระบบตรวจจับ ( Fujifilm las-4000 , ญี่ปุ่น ) และสัญญาณจุดแข็งคือปริมาณการใช้โปรแกรม densitometric ( multigauge v2.2 )