2.7. Analytical methodsSugars were

2.7. Analytical methods

Sugars were quantified by the binary HPLC system (Prominence LC-20AB, Shimadzu Corporation, Japan) using a Phenomenex RCM column (300 × 7.8 mm). Degassed, deionized water was used as mobile phase. The column oven (Prominence CTD-20A) and RID were maintained at 80 and 65 °C. respectively, and flow rate for mobile phase was fixed at 0.6 ml/min. The samples were diluted, centrifuged and filtered using Phenomenex 0.45 μ RC membranes into the HPLC vials. Peaks were detected by the RI detector (RID-10A) and quantified on the basis of area and retention time of the standards (sucrose, glucose, fructose, xylose, arabinose, galactose, mannose, cellobiose, and rhamnose) procured from Sigma–Aldrich and prepared in the same mobile phase as the one used for elution.

Ethanol and GA concentrations were measured using the quaternary gradient HP-1100 HPLC system (Agilent Technologies, USA) and the Phenomenex ROA organic acid column (150 × 7.8 mm). In this case, degassed 0.005 N sulphuric acid was used as the mobile phase instead of water and flow rate was maintained at 0.4 ml/min. All the other operating conditions remained same as mentioned in case of sugar analysis. The compounds eluted were detected using the RI detector and quantified on the basis of the area and retention time of ethanol and 2-deoxygalacturonic acid standards procured from Fisher Scientific and Sigma–Aldrich, respectively.

Enzyme assay for FPase was done using the laboratory analytical procedure (LAP) described previously by Adney and Baker (1996). The β-glucosidase activity (IU/mL) was determined using the previously described method (Oberoi et al., 2010b). Pectinase concentration was not analyzed in this study and pectinase was added on the basis of the concentration mentioned by the manufacturers.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.7 การวิเคราะห์วิธีน้ำตาลถูก quantified โดยนารี HPLC ระบบ (ความโดดเด่น LC 20AB, Shimadzu คอร์ปอเรชั่น ญี่ปุ่น) โดยใช้คอลัมน์ Phenomenex RCM (300 × 7.8 mm) น้ำ degassed, deionized ใช้เป็นเฟสเคลื่อนที่ คอลัมน์เตา (CTD ความโดดเด่น-20A) และ RID ถูกรักษาไว้ที่ 80 และ 65 องศาเซลเซียส ตามลำดับ และกำหนดอัตราการไหลสำหรับเฟสเคลื่อนที่ 0.6 ml/min ตัวอย่างถูกทำให้เจือจาง centrifuged และกรองโดยใช้ Phenomenex 0.45 μเข้า RC เป็น HPLC vials ยอดเขาที่ถูกตรวจพบ โดยจับ RI (RID-10A) และ quantified โดยใช้พื้นที่และการเก็บรักษาเวลามาตรฐาน (ซูโครส กลูโคส ฟรักโทส xylose, arabinose กาแล็กโทส mannose, cellobiose และ rhamnose) ค้นหาจากซิก-Aldrich และเตรียมพร้อมในระยะเคลื่อนที่เดียวกันเป็นหนึ่งที่ใช้สำหรับการ elutionความเข้มข้นเอทานอลและ GA ถูกวัดโดยใช้ quaternary ไล่ระดับ HPLC HP 1100 ระบบ (Agilent เทคโนโลยี สหรัฐอเมริกา) และราว Phenomenex อินทรีย์กรดคอลัมน์ (150 × 7.8 mm) ในกรณีนี้ degassed 0.005 กรด N ถูกใช้เป็นเฟสเคลื่อนที่แทนอัตราน้ำและกระแสถูกรักษาไว้ที่ 0.4 ml/min ทั้งหมดปฏิบัติเงื่อนไขอื่น ๆ ยังคงเหมือนกัน ตามกรณีวิเคราะห์น้ำตาล ตรวจพบสาร eluted ใช้เครื่องตรวจจับ RI และ quantified ตามเวลาตั้งและการเก็บรักษาของเอทานอล 2 deoxygalacturonic กรดมาตรฐานและค้นหาจาก Fisher วิทยาศาสตร์และซิก-Aldrich ตามลำดับกระทำการวิเคราะห์เอนไซม์สำหรับ FPase ใช้ห้องปฏิบัติการวิเคราะห์ (ตัก) ก่อนหน้านี้ โดย Adney และเบเกอร์ (1996) กิจกรรมβ-glucosidase (IU/mL) ที่ถูกกำหนดโดยใช้วิธีการอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (โอเบรอย et al., 2010b) ความเข้มข้น Pectinase ไม่ถูกวิเคราะห์ในการศึกษานี้ และ pectinase เพิ่มตามความเข้มข้นดังกล่าว โดยผู้ผลิต

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.7 วิธีการวิเคราะห์น้ำตาลถูกวัดโดยระบบ HPLC ไบนารี (รุ่งเรือง LC-20AB, Shimadzu คอร์ปอเรชั่นประเทศญี่ปุ่น) โดยใช้คอลัมน์ Phenomenex RCM (300 × 7.8 มิลลิเมตร) degassed น้ำ deionized ถูกใช้เป็นเฟสเคลื่อนที่ เตาอบคอลัมน์ (รุ่งเรือง CTD-20A) และกรมชลประทานได้รับการดูแลที่ 80 และ 65 องศาเซลเซียส ตามลำดับและอัตราการไหลของเฟสเคลื่อนที่คงที่ 0.6 มล. / นาที กลุ่มตัวอย่างที่ได้รับการปรับลดปั่นและกรองโดยใช้ Phenomenex 0.45 μเยื่อ RC ลงในขวด HPLC ยอดเขาที่ถูกตรวจพบโดยการตรวจจับ RI (RID-10A) และวัดบนพื้นฐานของพื้นที่และการเก็บรักษาเวลามาตรฐานที่ (ซูโครสกลูโคสฟรุกโตส, ไซโลส, อราบิโน, กาแลคโต, mannose, cellobiose และแรมโนส) จัดหาจาก Sigma-Aldrich และเตรียมความพร้อมในเฟสเคลื่อนที่เดียวกับที่ใช้ในการชะ. เอทานอลและความเข้มข้น GA ถูกวัดโดยใช้การไล่ระดับสีสี่ระบบ HPLC HP-1100 (Agilent Technologies, สหรัฐอเมริกา) และคอลัมน์กรดอินทรีย์ Phenomenex ROA (150 × 7.8 มิลลิเมตร) ในกรณีนี้ degassed 0.005 ไม่มีกรดกำมะถันถูกใช้เป็นเฟสเคลื่อนที่แทนน้ำและอัตราการไหลถูกเก็บรักษาไว้ที่ 0.4 มล. / นาที เงื่อนไขปฏิบัติการอื่น ๆ ยังคงเหมือนเดิมตามที่กล่าวไว้ในกรณีของการวิเคราะห์น้ำตาล สารชะถูกตรวจพบโดยใช้เครื่องตรวจจับ RI และวัดบนพื้นฐานของพื้นที่และการเก็บรักษาช่วงเวลาของเอทานอลและ 2 deoxygalacturonic มาตรฐานกรดจัดหาจากฟิชเชอร์วิทยาศาสตร์และ Sigma-Aldrich ตามลำดับ. ทดสอบเอนไซม์สำหรับ FPase ถูกทำโดยการใช้ห้องปฏิบัติการขั้นตอนการวิเคราะห์ (LAP) อธิบายไว้ก่อนหน้านี้โดย Adney และเบเคอร์ (1996) กิจกรรมβ-glucosidase (IU / มิลลิลิตร) ถูกกำหนดโดยใช้วิธีการอธิบายไว้ก่อนหน้า (Oberoi et al., 2010b) ความเข้มข้นของเพคติเนสไม่ได้วิเคราะห์ในการศึกษานี้และเพคติเนสถูกเพิ่มเข้ามาบนพื้นฐานของความเข้มข้นที่กล่าวถึงโดยผู้ผลิตที่