To construct pBE1570, the following

To construct pBE1570, the following linker was cloned using
EcoNI to XhoI into pACYCDuet (EMD4Biosciences): AAATTAATACGACTCACTATAGGGGAATTGTGAGCGGATAACAATTCCCCTTTGACAGCTAGCTCAGTCCTAGGTATAATGACTAGAAATAATTTATGTTTACACTTTAATAAGGAAGATCTCATATGAAGCTTGTCGACC.
For expression and purification of his-tagged enzymes,
codon-optimized genes were subcloned into T7 vector pTA925 (Johnson
et al., 2001) using BglII and HinDIII sites, and transformed into E. coli
BL21 DE3 RIL (Stratagene). The resulting protein production strains
were BE1126, BE1165, BE1572 and BE1575 (Table 1). All the clones
described above were verified by DNA sequencing

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สร้าง pBE1570, linker ต่อไปนี้คือลอกแบบใช้EcoNI กับ XhoI เป็น pACYCDuet (EMD4Biosciences): AAATTAATACGACTCACTATAGGGGAATTGTGAGCGGATAACAATTCCCCTTTGACAGCTAGCTCAGTCCTAGGTATAATGACTAGAAATAATTTATGTTTACACTTTAATAAGGAAGATCTCATATGAAGCTTGTCGACCสำหรับการแสดงหรือทำให้บริสุทธิ์ของเอนไซม์แท็กของพระองค์ปรับรหัสพันธุกรรมยีนถูก subcloned ใน pTA925 เวกเตอร์ T7 (จอห์นสันet al. 2001) การใช้เว็บไซต์ BglII และ HinDIII และเปลี่ยนเป็น E. coliBL21 DE3 RIL (Stratagene) สายพันธุ์การผลิตโปรตีนที่เป็นผลลัพธ์BE1126, BE1165, BE1572 และ BE1575 (ตารางที่ 1) โคลนทั้งหมดอธิบายไว้ข้างต้นถูกตรวจสอบ โดยลำดับดีเอ็นเอ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อสร้าง pBE1570, ลิงเกอร์ต่อไปนี้เป็นโคลนใช้
EcoNI เพื่อ XhoI เข้า pACYCDuet (Merck4Biosciences ด้าน):. AAATTAATACGACTCACTATAGGGGAATTGTGAGCGGATAACAATTCCCCTTTGACAGCTAGCTCAGTCCTAGGTATAATGACTAGAAATAATTTATGTTTACACTTTAATAAGGAAGATCTCATATGAAGCTTGTCGACC
สำหรับการแสดงออกและการทำให้บริสุทธิ์ของเอนไซม์ที่ติดแท็กของเขา
ยีน codon ที่ดีที่สุดถูก subcloned เข้า T7 เวกเตอร์ pTA925 (จอห์นสัน
ใช้ et al, 2001). BglII และ HindIII เว็บไซต์และกลายเป็นเชื้อ E. coli
BL21 DE3 RIL (Stratagene) ส่งผลให้สายพันธุ์ที่ผลิตโปรตีน
เป็น BE1126, BE1165, BE1572 และ BE1575 (ตารางที่ 1) โคลนทั้งหมดที่
อธิบายไว้ข้างต้นได้รับการตรวจสอบโดยลำดับดีเอ็นเอ