Real time PCR was carried out using

Real time PCR was carried out using this DNA as a template using the QuantiFast SYBR Green PCR kit (Qiagen, USA). The 10 ml reaction mixture consisted of 1X SYBR Green PCR mix, 5 pmol of primers and 1 ml of template. Amplification was carried out at 95
C for 5 min, followed by 40 cycles of 95
C for 10 s, 60
C for 30 s and 72
C for 30 s. A standard curve was prepared using different concentrations of F. oxysporum genomic DNA extracted from the fungal mycelia using CTAB method for fungal DNA isolation

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เวลาจริง PCR ถูกดำเนินการโดยใช้ดีเอ็นเอนี้เป็นแม่แบบโดยใช้ชุด QuantiFast SYBR Green PCR (Qiagen สหรัฐอเมริกา) ผสมปฏิกิริยา 10 มล.ประกอบด้วยของผสม X SYBR Green PCR 1, pmol 5 ของไพรเมอร์และ 1 มิลลิลิตรของแม่ ขยายดำเนินที่ 95 C 5 นาที ตาม ด้วย 95 C 40 รอบ 10 s, 60 C s และ 72 C 30 30 s จัดเตรียมกราฟมาตรฐานโดยใช้ความเข้มข้นแตกต่างกันของ F. oxysporum การดีเอ็นเอแยกจาก mycelia เชื้อราที่ใช้วิธี CTAB แยกดีเอ็นเอรา

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เวลาจริง PCR ได้ดำเนินการโดยใช้ดีเอ็นเอนี้เป็นแม่โดยใช้ชุดสีเขียว QuantiFast SYBR PCR A (Qiagen, สหรัฐอเมริกา) ผสม 10 มิลลิลิตรประกอบด้วยปฏิกิริยาผสม 1X SYBR PCR สีเขียว 5 pmol ของไพรเมอร์และ 1 มิลลิลิตรของแม่แบบ ขยายได้ดำเนินการที่ 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาทีตามด้วย 40 รอบจาก 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 วินาที, 60 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 วินาทีและ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 วินาที เส้นโค้งมาตรฐานถูกจัดทำขึ้นโดยใช้ความเข้มข้นที่แตกต่างของเอฟ oxysporum ดีเอ็นเอสกัดจากเส้นใยของเชื้อราโดยใช้วิธี CTAB การแยกดีเอ็นเอเชื้อรา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เวลาจริงของปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสโดยใช้ดีเอ็นเอนี้เป็นแม่แบบที่ใช้ quantifast SYBR กรีน PCR Kit ( QIAGEN , USA ) 10 มิลลิลิตรปฏิกิริยาผสมประกอบด้วย 1x SYBR กรีน PCR ไพรเมอร์ผสม 5 pmol 1 มิลลิลิตร และแม่แบบ ขยายข้อมูลที่ 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที ตามด้วย 40 รอบ 95 C 10 , 30 และ 60 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 72 C 30 S . เส้นโค้งมาตรฐาน เตรียมใช้ความเข้มข้นที่แตกต่างกันของ F . oxysporum genomic DNA ที่สกัดจากเชื้อราเส้นใยโดยใช้วิธีการสกัดแยกดีเอ็นเอของเชื้อรา ctab สำหรับ