detected as a single HPV infection within an invasive cancer. One exception is an
HPV 6 which was found alone in a single invasive tumor; we still considered HPV
6 to be an HPV with low oncogenic potential, and it remains in the low-risk
category within our present study.
All liquid detection reagents used for the line blot assay were from Amplicor
strip detection reagent kits (Dynal, Oslo, Norway). PCR products were denatured
with 0.13 N NaOH (1:2 dilution of 0.4 N NaOH in PCR product). HPV
genotyping strips were placed into individual wells of the typing trays (Perkin-
Elmer) and covered with 3 ml of hybridization buffer (43 SSPE [13 SSPE is 0.18
M NaCl, 10 mM NaH2PO4, and 1 mM EDTA, pH 7.7], 0.1% sodium dodecyl
sulfate) prewarmed to 53°C. Seventy microliters of denatured, biotinylated product
was added to each well and incubated in a shallow, shaking (60 rpm) water
bath at 53°C for 30 min. Following hybridization, trays were removed from the
water bath, and hybridization solution was removed with a vacuum aspirator.
Strips were briefly rinsed in the trays with ambient wash buffer (13 SSPE, 0.1%
sodium dodecyl sulfate). After removal of the rinse by aspiration, 3 ml of
prewarmed (53°C) wash buffer was added to each well and the trays were
incubated in a shaking water bath at 53°C for 15 min. After the stringent wash,
buffer was removed, 3 ml of streptavidin-horseradish peroxidase conjugate was
added to each well, and the tray was placed on a rotating platform at room
temperature for 30 min, with shaking at 70 rpm. Unbound conjugate was removed
by a quick rinse with ambient wash buffer followed by two 10-min washes
in ambient wash buffer. After the final wash, buffer was removed by vacuum
aspiration, and strips were rinsed in 0.1 M sodium citrate. Color development
was activated by incubation in a 4:1 mixture of substrates A (hydrogen peroxide
in sodium citrate buffer) and B (3,39,5,59-tetramethylbenzidine in dimethylformamide)
for 5 min on a rotating platform (70 rpm). Strips were rinsed in deionized
ตรวจพบเป็นการติดเชื้อ HPV เดี่ยวภายในมีมะเร็งลุกลาม ข้อยกเว้นเดียวเชื้อ HPV 6 ซึ่งพบเพียงอย่างเดียวในเนื้องอกแพร่กระจายเดียว เรายังถือว่า HPV6 การติดเชื้อ HPV มีศักยภาพ oncogenic ต่ำ และมันจะยังคงอยู่ในความเสี่ยงต่ำประเภทภายในการศึกษาของเราReagents ตรวจจับของเหลวทั้งหมดที่ใช้สำหรับการทดสอบน้าบรรทัดได้จาก Amplicorแถบตรวจจับชุดรีเอเจนต์ (Dynal ออสโล นอร์เวย์) ผลิตภัณฑ์ PCR ได้เอทิลแอลกอฮอล์กับ 0.13 N NaOH (เจือจาง 1:2 ของ 0.4 N NaOH ในผลิตภัณฑ์ PCR) มะเร็งปากมดลูกแถบ genotyping ถูกวางลงในหลุมแต่ละถาดพิมพ์ (เพอร์-เอลเมอ) กับ 3 ml ของบัฟเฟอร์ hybridization (43 SSPE [13 SSPE เป็น 0.18Dodecyl โซเดียม 0.1% M NaCl, 10 มม. NaH2PO4 และ 1 mM EDTA, pH 7.7],ซัลเฟต) prewarmed ถึง 53 องศาเซลเซียส เจ็ดสิบ microliters ลแปลง biotinylated ผลิตภัณฑ์ถูกแต่ดี และได้รับการกกในตื้น เขย่าน้ำ (60 rpm)ห้องอาบน้ำที่ 53° C นาน 30 นาที ต่อไปนี้การ hybridization ถาดถูกเอาออกจากการอาบน้ำ และโซลูชัน hybridization ถูกเอาออก ด้วยการเข้าดูดแถบสั้น ๆ ถูกล้างในถาดกับรอบข้างล้างบัฟเฟอร์ (13 SSPE, 0.1%โซเดียม dodecyl ซัลเฟต) หลังจากถอดล้างโดยปณิธาน 3 มล.prewarmed (53° C) ล้างบัฟเฟอร์เพิ่มดียังและถาดอาหารรับการกกในอ่างน้ำสั่น 53° c 15 นาที หลังจากการล้างอย่างเข้มงวดบัฟเฟอร์ที่ถูกลบ 3 ml ของ streptavidin ดิชฮอส conjugateเพิ่มดียัง และถาดถูกวางลงบนจานหมุนที่ห้องอุณหภูมิ 30 นาที มีการสั่นที่ 70 รอบต่อนาที Conjugate ผูกถูกเอาออกโดยการล้างบัฟเฟอร์ล้างโดยรอบตาม ด้วยล้าง 10 นาทีสองด่วนในแวดล้อมล้างบัฟเฟอร์ หลังจากการล้างขั้นสุดท้าย บัฟเฟอร์ถูกเอาออก โดยการดูดความทะเยอทะยาน และแถบถูกล้างใน 0.1 M โซเดียมซิเตรต สีพัฒนาเรียกใช้ โดยใน 4:1 ส่วนผสมของพื้นผิว A (ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ในโซเดียมซิเตรตบัฟเฟอร์) และ B (3,39,5,59-tetramethylbenzidine ใน dimethylformamide)5 นาทีบนจานหมุน (รอบต่อนาที 70) แผ่นถูกล้างในจุ
การแปล กรุณารอสักครู่..

ตรวจพบเชื้อ HPV เป็นหนึ่งในมะเร็งที่แพร่กระจาย . ข้อยกเว้นคือHPV 6 ซึ่งพบเพียงอย่างเดียวในเดียวที่เรายังถือว่าชนิดเนื้องอก6 เป็นสายพันธุ์ที่มีศักยภาพ oncogenic ต่ำและมันยังคงอยู่ในระดับต่ําหมวดหมู่ในการศึกษาของเราทั้งหมดการตรวจสอบของเหลว สารเคมีที่ใช้สำหรับสาย blot assay จาก amplicorชุดตรวจหาสารเคมีแถบ ( dynal , ออสโล , นอร์เวย์ ) ผลิตภัณฑ์ทั้งหมดจะถูกใช้กับ 0.13 ( 1 : 2 N NaOH เจือจาง 0.4 N NaOH ในผลิตภัณฑ์ PCR ) HPVการอ่านแผ่นถูกวางไว้ในแต่ละหลุมในถาด ( เพอร์คิน - พิมพ์เอลเมอร์ ) และปกคลุมด้วย 3 ml สารบัฟเฟอร์ ( 43 sspe sspe [ 13 มี .M NaCl nah2po4 10 มม. และ 1 mM EDTA pH 7.7 0.1 % โซเดียมโดเดซิล ]ซัลเฟต ) prewarmed 53 องศา เจ็ดสิบตัวเลขของไลใช้ผลิตภัณฑ์ที่ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละ และบ่มในที่ตื้น สั่น ( 60 รอบต่อนาที ) น้ำนํ้าที่ 53 ° C เป็นเวลา 30 นาที ต่อไปนี้ probes , ถาดถูกเอาออกจากน้ำอาบ และสารละลายเบสออกด้วยสูญญากาศดูด .แถบยังเป็นช่วงสั้น ๆในถาดล้างบัฟเฟอร์ซักรอบ ( 13 sspe 0.1 %โซเดียมโดเดซิลซัลเฟต ) หลังการล้างโดยปณิธาน 3 มิลลิลิตรprewarmed ( 53 ° C ) ล้างบัฟเฟอร์ที่ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละถาดมีดีและบ่มในน้ำอาบน้ำสั่นที่ 53 °องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 นาที หลังอาบน้ำเข้มข้นบัฟเฟอร์จะถูกลบออก , 3 ml . streptavidin peroxidase ) คือกล่าว กัน และถาดที่วางอยู่บนแท่นหมุน ที่ห้องอุณหภูมิ 30 นาที เขย่า ที่ 70 รอบต่อนาที หลุดคู่ถูกลบออกโดยล้างอย่างรวดเร็วด้วยบัฟเฟอร์ซักรอบสอง 10 นาทีล้างตามด้วยในบัฟเฟอร์ซักห้อง หลังจากล้างบัฟเฟอร์จะถูกลบออกโดยสูญญากาศขั้นสุดท้ายปณิธาน และแถบถูกล้างใน 0.1 โมลาร์โซเดียมซิเตรต . การพัฒนาสีได้รับการบ่มเพาะใน 1 ส่วนผสมของพื้นผิว ( ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์โซเดียมซิเตรทบัฟเฟอร์ ) และ B ( 3,39,5,59-tetramethylbenzidine ในการล้างพิษ )เป็นเวลา 5 นาที บนแท่นหมุน ( 70 รอบต่อนาที ) แผ่นถูกล้างในคล้ายเนื้อเยื่อประสาน
การแปล กรุณารอสักครู่..
