3. Results and discussion3.1. HPLC

3. Results and discussion
3.1. HPLC method development and optimization
3.1.1. Optimization of chromatographic conditions
An HPLC method for the analysis of process-related impuritiesin VTXT using an Acquity UPLC BEH C18 column at 60◦C has beenreported [7]. The reported method [7] cannot be applied directly forseparating the impurities described in Section 2.1 because only twoout seven impurities were analyzed. Considering the conditions inlab, a relatively universal HPLC method was developed to deter-mine all the seven impurities. Besides, a low column temperaturewas selected to avoid potential long-term risks in the chromato-graphic efficiency. Because VTXT contains a basic group with apKaof approximately 8.85, trifluoroacetic acid, which would fullyprotonate the compound and increase the retention of high polarsubstances, was selected as the mobile phase additive. The mostwidely used HPLC column was tentatively selected to separate andquantify the process-related and degradation impurities in VTXT.A solution spiked with process-related impurities was injectedto the HPLC system to investigate the HPLC conditions in eachtrial. ACN and 0.05% trifluoroacetic acid in different gradient elu-tion modes were initially chosen to optimize the HPLC conditions.The results showed that the resolution (R) of VTXT and Imp-A waslow (R = 1.51).To further optimize the performance, ACN and trifluoroaceticacid mixtures, with the acid concentration adjusted over the range0.03–0.07%, were used as the mobile phase in the gradient mode.In this trial, all process-related impurities can be observed withadequate separation. The acid concentration of the mobile phasehas a significant effect on the capacity and tailing factors of all thecompounds investigated, and the optimum symmetry for all theanalytes was achieved with an acid concentration of 0.05%. Opti-mum separation was observed with a Shimadzu Inertsil ODS-3C18column (250 mm × 4.6 mm, 5 m) (Tokyo, Japan), with the gradientelution mode as described in Section 2.2.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3. ผล และการอภิปราย3.1. HPLC วิธีพัฒนาและเพิ่มประสิทธิภาพ3.1.1. เพิ่มประสิทธิภาพของสภาพโครมาวิธีการ HPLC ในการวิเคราะห์กระบวนการที่เกี่ยวข้อง impuritiesin VTXT ใช้เป็นคอลัมน์ C18 กลาง...เผาผลาญ UPLC Acquity ที่ 60◦C มี beenreported [7] ไม่สามารถใช้วิธีการรายงาน [7] โดยตรง forseparating สกปรกที่อธิบายไว้ในส่วน 2.1 เนื่องจากสิ่งสกปรก twoout เพียงเจ็ดถูกวิเคราะห์ได้ พิจารณา inlab เงื่อนไข วิธี HPLC ค่อนข้างสากลถูกพัฒนาขึ้นเพื่อป้องกันเหมืองสิ่งสกปรกเจ็ด , Temperaturewas ต่ำคอลัมน์ที่เลือกที่จะหลีกเลี่ยงความเสี่ยงระยะยาวศักยภาพในประสิทธิภาพกราฟิก chromato เนื่องจาก VTXT ประกอบด้วยกลุ่มพื้นฐานกับ apKaof ประมาณ 8.85 กรด trifluoroacetic ซึ่งจะ fullyprotonate สาร และเพิ่มการเก็บรักษาของ polarsubstances สูง ถูกเลือกเป็นเฟสเคลื่อนที่เติม โดยยอมเลือกคอลัมน์ HPLC ที่ใช้ mostwidely เพื่อแยกย่อยสลายสิ่งสกปรกใน VTXT และ andquantify ในกระบวนการที่เกี่ยวข้อง การแก้ปัญหาที่ได้ถูกแทง ด้วยกระบวนการที่เกี่ยวข้องกับสิ่งสกปรกถูก injectedto ระบบ HPLC เพื่อตรวจสอบสภาวะ HPLC ใน eachtrial ACN และกรด trifluoroacetic 0.05% ในโหมดที่แตกต่างกันไล่ระดับ elu-ทางการค้าในเบื้องต้นรับเลือกในการปรับปรุงสภาวะ HPLC ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าความละเอียด (R) ของ VTXT และ waslow Imp-A (R = 1.51) การ เพิ่มประสิทธิภาพ ACN และ trifluoroaceticacid ผสม กับความเข้มข้นกรดปรับเปลี่ยน range0.03–0.07% ถูกใช้เป็นเฟสเคลื่อนในโหมดการไล่ระดับสี ในการทดลอง สิ่งสกปรกที่เกี่ยวข้องกับกระบวนการทั้งหมดสามารถสังเกตแยก withadequate ตรวจสอบผลผลิตและปัจจัยของ thecompounds ทั้งหมด tailing กรดความเข้มข้นของ phasehas โทรศัพท์มือถือ และสำเร็จความสมมาตรที่ดีที่สุดสำหรับ theanalytes ทั้งหมดกับความเข้มข้นกรด 0.05% พบว่า ทั้งแม่แยกกับ Shimadzu Inertsil ODS-3C18column (250 มม. × 4.6 มม. 5 ม.) (โตเกียว ญี่ปุ่น), โหมด gradientelution ตามที่อธิบายไว้ในส่วนที่ 2.2

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3. ผลการทดลองและการอภิปราย
3.1 การพัฒนาวิธี HPLC และการเพิ่มประสิทธิภาพ
3.1.1 การเพิ่มประสิทธิภาพของสารเงื่อนไข
วิธี HPLC สำหรับการวิเคราะห์ของกระบวนการที่เกี่ยวข้องกับการใช้ VTXT impuritiesin คอลัมน์ Acquity UPLC BEH C18 ที่60◦Cได้ beenreported [7] วิธีการรายงาน [7] ไม่สามารถนำมาใช้โดยตรง forseparating สิ่งสกปรกที่อธิบายไว้ในมาตรา 2.1 เพราะเพียง twoout เจ็ดสิ่งสกปรกที่ถูกนำมาวิเคราะห์ พิจารณาเงื่อนไข InLab, วิธี HPLC ค่อนข้างสากลได้รับการพัฒนาเพื่อยับยั้งการเหมืองทั้งหมดเจ็ดสิ่งสกปรก นอกจากนี้ยังมีคอลัมน์ต่ำ temperaturewas เลือกที่จะหลีกเลี่ยงความเสี่ยงในระยะยาวที่อาจเกิดขึ้นในประสิทธิภาพ chromato กราฟิก เพราะ VTXT มีกลุ่มพื้นฐานที่มีประมาณ 8.85 apKaof กรด TRIFLUOROACETIC ซึ่งจะ fullyprotonate สารประกอบและเพิ่มการเก็บรักษา polarsubstances สูงได้รับเลือกเป็นสารเติมแต่งเฟสเคลื่อนที่ คอลัมน์ HPLC ใช้ mostwidely ได้รับเลือกลังเลที่จะแยก andquantify กระบวนการที่เกี่ยวข้องกับการย่อยสลายและสิ่งสกปรกในการแก้ปัญหา VTXT.A ถูกแทงด้วยสิ่งสกปรกกระบวนการที่เกี่ยวข้องกับการเป็น injectedto ระบบ HPLC เพื่อตรวจสอบเงื่อนไข HPLC ใน eachtrial ACN และ 0.05% กรด TRIFLUOROACETIC ในการไล่ระดับสีที่แตกต่างกันโหมด ELU-การได้รับการคัดเลือกในขั้นต้นจะเพิ่มประสิทธิภาพ HPLC ผล conditions.The แสดงให้เห็นว่ามีความละเอียด (R) ของ VTXT และภูตผีปีศาจ-A waslow (r = 1.51) หากต้องการเพิ่มประสิทธิภาพการปฏิบัติงาน ACN และสารผสม trifluoroaceticacid กับความเข้มข้นของกรดปรับมากกว่า range0.03-0.07% ถูกนำมาใช้เป็นเฟสเคลื่อนที่ในการไล่ระดับสี mode.In การพิจารณาคดีนี้ทุกสิ่งสกปรกที่เกี่ยวข้องกับกระบวนการที่สามารถสังเกตได้แยก withadequate ความเข้มข้นของกรดของโทรศัพท์มือถือ phasehas ผลกระทบต่อกำลังการผลิตและปัจจัยการ tailing thecompounds ทั้งหมดตรวจสอบและสมมาตรที่เหมาะสมสำหรับการ theanalytes ทั้งหมดก็ประสบความสำเร็จกับความเข้มข้นของกรด 0.05% แยก Opti-แม่ก็สังเกตเห็นมี Shimadzu Inertsil ODS-3C18column (250 มม× 4.6 มม 5 m?) (โตเกียวประเทศญี่ปุ่น) กับโหมด gradientelution ตามที่อธิบายไว้ในมาตรา 2.2