Generation of β-pancreatic cells re

Generation of β-pancreatic cells represents a major goal in research. The aim of this study was to explore a protein-based strategy to induce differentiation of human biliary tree stem cells (hBTSCs) towards β-pancreatic cells. A plasmid containing the sequence of the human pancreatic and duodenal homeobox 1 (PDX1) has been expressed in E. coli. Epithelial-Cell-Adhesion-Molecule positive hBTSCs or mature human hepatocyte cell line, HepG2, were grown in medium to which Pdx1 peptide was added. Differentiation toward pancreatic islet cells were evaluated by the expression of the β-cell transcription factors, Pdx1 and musculoapo-neurotic fibrosarcoma oncogene homolog A, and of the pancreatic hormones, insulin, glucagon, and somatostatin, investigated by real time polymerase chain reaction, western blot, light microscopy and immunofluorescence. C-peptide secretion in response to high glucose was also measured. Results indicated how purified Pdx1 protein corresponding to the primary structure of the human Pdx1 by mass spectroscopy was efficiently produced in bacteria, and transduced into hBTSCs. Pdx1 exposure triggered the expression of both intermediate and mature stage β-cell differentiation markers only in hBTSCs but not in HepG2 cell line. Furthermore, hBTSCs exposed to Pdx1 showed up-regulation of insulin, glucagon and somatostatin genes and formation of 3-dimensional islet-like structures intensely positive for insulin and glucagon. Finally, Pdx1-induced islet-like structures exhibited glucose-regulated C-peptide secretion. In conclusion, the human Pdx1 is highly effective in triggering hBTSC differentiation toward functional β-pancreatic cells. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Copyright of PLoS ONE is the property of Public Library of Science and its content may not be copied or emailed to multiple sites or posted to a listserv without the copyright holder's express written permission. However, users may print, download, or email articles for individual use. This abstract may be abridged. No warranty is given about the accuracy of the copy. Users should refer to the original published version of the material for the full abstract. (Copyright applies to all Abstracts.)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การสร้างของเซลล์β-ตับอ่อนแสดงให้เห็นถึงเป้าหมายหลักในการวิจัย วัตถุประสงค์ของการศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อสำรวจกลยุทธ์โปรตีนที่ใช้ในการก่อให้เกิดความแตกต่างของเซลล์ต้นกำเนิดต้นไม้ทางเดินน้ำดีของมนุษย์ (hBTSCs) ต่อเซลล์β-ตับอ่อน พลาสมิดที่มีลำดับของตับอ่อนของมนุษย์และ homeobox ลำไส้เล็กส่วนต้นที่ 1 (PDX1) ได้รับการแสดงในเชื้อ E. coli เยื่อบุผิว-Cell-ยึดติด-โมเลกุล hBTSCs บวกหรือเซลล์ตับของมนุษย์ผู้ใหญ่ HepG2 ได้เติบโตในระดับปานกลางซึ่งเปปไทด์ Pdx1 ถูกเพิ่มเข้ามา ความแตกต่างที่มีต่อเซลล์เกาะตับอ่อนได้รับการประเมินโดยการแสดงออกของปัจจัยการถอดความβ-เซลล์ Pdx1 และอองโคยีน fibrosarcoma musculoapo-โรคประสาท homolog A, และของฮอร์โมนตับอ่อนอินซูลิน glucagon และ somatostatin, การตรวจสอบตามเวลาจริงวิธี polymerase chain reaction ตะวันตก blot กล้องจุลทรรศน์แสงและอิมมูโน การหลั่ง C-เปปไทด์ในการตอบสนองต่อน้ำตาลสูงนอกจากนี้ยังได้รับการวัด ผลการศึกษาพบว่าโปรตีนบริสุทธิ์ Pdx1 ที่สอดคล้องกับโครงสร้างหลักของ Pdx1 มนุษย์โดยสเปกโทรสโกมวลที่ผลิตได้อย่างมีประสิทธิภาพในแบคทีเรียและ transduced เข้า hBTSCs การสัมผัส Pdx1 เรียกการแสดงออกของทั้งกลางและขั้นตอนที่แตกต่างเครื่องหมายβเซลล์ผู้ใหญ่เฉพาะใน hBTSCs แต่ไม่ได้อยู่ในสายพันธุ์ของเซลล์ HepG2 นอกจากนี้ hBTSCs สัมผัสกับ Pdx1 แสดงให้เห็นถึงระเบียบของอินซูลิน glucagon และ somatostatin ยีนและการก่อตัวของโครงสร้างที่มีเกาะเล็ก ๆ 3 มิติอย่างเข้มข้นในเชิงบวกสำหรับอินซูลินและฮอร์โมน สุดท้าย Pdx1 ที่เกิดโครงสร้างเกาะเหมือนแสดงกลูโคสควบคุมการหลั่ง C-เปปไทด์ สรุปได้ว่า Pdx1 มนุษย์มีประสิทธิภาพสูงในการเรียกแตกต่าง hBTSC ต่อเซลล์β-ตับอ่อนทำงาน [บทคัดย่อจากผู้เขียน] ลิขสิทธิ์ PLoS ONE เป็นทรัพย์สินของห้องสมุดสาธารณะวิทยาศาสตร์และเนื้อหาของมันอาจไม่ได้รับการคัดลอกหรือส่งไปยังหลายเว็บไซต์หรือโพสต์ไปได้โดยไม่ต้องขอความร่วมมือลิขสิทธิ์ด่วนของผู้ถืออนุญาตเป็นลายลักษณ์อักษร อย่างไรก็ตามผู้ใช้สามารถพิมพ์ดาวน์โหลดหรือบทความอีเมลสำหรับการใช้งานของแต่ละบุคคล นามธรรมนี้อาจจะถูกตัดทอน ไม่มีการรับประกันจะได้รับเกี่ยวกับความถูกต้องของการคัดลอก ผู้ใช้ควรดูที่ตีพิมพ์ฉบับเดิมของวัสดุสำหรับนามธรรมเต็มรูปแบบ (ลิขสิทธิ์นำไปใช้กับทุกบทคัดย่อ.)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

รุ่นของบีตา - เซลล์ตับอ่อน เป็นเป้าหมายหลักในการวิจัย จุดมุ่งหมายของการศึกษานี้คือ เพื่อศึกษาโปรตีนที่ใช้กลยุทธ์การกระตุ้นเซลล์ต้นกำเนิดความแตกต่างของมนุษย์ต้นไม้น้ำดี ( hbtscs ) ต่อเซลล์ตับอ่อนบีตา - เป็นสายพันธุ์ที่มีการเรียงลำดับของมนุษย์ตับอ่อนและลำไส้ homeobox 1 ( pdx1 ) ได้แสดงออกใน E . coliเซลล์เยื่อบุผิวยึดเกาะโมเลกุลบวก hbtscs หรือผู้ใหญ่มนุษย์ตับเซลล์มะเร็งตับ , เส้นโตในสื่อที่ pdx1 เปปไทด์ถูกเพิ่มเข้ามา การต่อเซลล์ Islet ตับอ่อนได้แก่ การแสดงออกของบีตา - ปัจจัยการถอดความ pdx1 musculoapo ประสาทและเซลล์ไฟโบรซาร์โคมางโคยีน homolog ของตับอ่อน และฮอร์โมน อินซูลิน และกลูคากอนโซมาโตสแตติน , ,ตรวจสอบเวลาการเกิดปฏิกิริยา ลูกโซ่จริงวิธี Western blot กล้องจุลทรรศน์แสง , และ . ซี เปปไทดหลั่งในการตอบสนองต่อน้ำตาลสูงก็วัดได้ ผลการศึกษาพบว่าโปรตีนบริสุทธิ์ pdx1 สอดคล้องกับโครงสร้างหลักของ pdx1 มนุษย์โดยเมทานอลได้อย่างมีประสิทธิภาพผลิตแบคทีเรีย และ transduced เป็น hbtscs .pdx1 การกระตุ้นการแสดงออกของทั้งคู่บนเวทีกลาง และผู้ใหญ่บีตา - สัตวบาลเครื่องหมายเฉพาะใน hbtscs แต่ไม่ได้อยู่ในเซลล์มะเร็งตับ . นอกจากนี้ hbtscs ตาก pdx1 ปรากฎระเบียบของอินซูลิน และกลูคากอนยีนโซมาโตสแตตินและสร้างมิติแก่งเหมือนอินซูลินและกลูคากอน เป็นโครงสร้างอย่างเข้มข้น . ในที่สุดpdx1 ชักนำแก่งเหมือนมีกลูโคสโครงสร้างการควบคุมการหลั่งซี เปปไทด . สรุป pdx1 มนุษย์มีประสิทธิภาพสูงในการกระตุ้นการ hbtsc ต่อการทำงานของตับอ่อนบีตา - เซลล์ จากผู้เขียน

[ บทคัดย่อ ]ลิขสิทธิ์ของ PLoS หนึ่งเป็นสมบัติของห้องสมุดวิทยาศาสตร์และเนื้อหาอาจจะไม่คัดลอกหรือส่งไปยังเว็บไซต์หลายเว็บไซต์หรือโพสต์ไปยังเจ้าของลิขสิทธิ์ Listserv โดยไม่ได้รับอนุญาตเป็นลายลักษณ์อักษรด่วน . อย่างไรก็ตาม ผู้ใช้อาจจะพิมพ์ ดาวน์โหลด หรือ อีเมล์ของใช้บุคคล นี้เป็นนามธรรมอาจจะย่อ . ไม่มีการรับประกันจะได้รับเกี่ยวกับความถูกต้องของสำเนาผู้ใช้ควรดูต้นฉบับตีพิมพ์รุ่นของวัสดุสำหรับเต็มรูปแบบนามธรรม ( ลิขสิทธิ์ใช้ได้กับทุกบทคัดย่อ )