NA topoisomerases are enzymes gover

NA topoisomerases are enzymes governing the multitude of conformational changes DNA undergoes during the cell cycle. Several compounds are likely to interfere with specific steps of the catalytic cycle of these enzymes. Camptothecin arrests the activity of DNA topoisomerase I by provoking the formation of a single-stranded DNA break with the enzyme molecule covalently attached to the DNA. Exposure to m-AMSA arrests DNA topoisomerase II by the formation of a ternary complex involving the drug, the enzyme, and DNA carrying a double-stranded break. Netropsin, distamycin A, and berenil inhibit DNA topoisomerase-mediated relaxation of supercoiled DNA by an as-yet unknown mechanism. Here, we analyze the cell cycle kinetic effects of exposure to camptothecin, m-AMSA, netropsin, distamycin A, and berenil by using continuous bromodeoxyuridine labeling followed by bivariate Hoechst 33258/ethidium bromide flow cytometry. Camptothecin elicits an accumulation of cells in all compartments of the cell cycle, while exposure to m-AMSA leads mainly to retention of cells in the G0/G1 compartment and to accumulation in the G2 phase. Neither camptothecin nor m-AMSA shows a synergism with bromodeoxyuridine incorporation into the DNA. These results point toward distinct functions of the two DNA topoisomerases in the process of cell cycle traverse. The compounds binding to the minor groove of DNA interfere with all phases of the cell cycle, but with a relative emphasis on the G2 phase. Neither camptothecin nor m-AMSA exhibits a synergistic effect in combination with berenil. Hence, at the level of perturbed cell cycle kinetics a distinction can be made between compounds provoking an abortive inhibition of the catalytic cycle of DNA topoisomerases (e.g., camptothecin, m-AMSA) and those interfering with the activity of the enzyme by a distinct mechanism

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

นา topoisomerases เป็นเอนไซม์ที่ควบคุมหลากหลายเปลี่ยนแปลง conformational ผ่านดีเอ็นเอในระหว่างรอบเซลล์ สารต่าง ๆ มักจะแทรกแซงขั้นตอนของวงจรการเร่งปฏิกิริยาของเอนไซม์เหล่านี้ Camptothecin arrests กิจกรรมของ DNA topoisomerase โดยยั่วเกิด DNA เดียวที่ควั่นทำลายกับโมเลกุลเอนไซม์ที่ covalently กับดีเอ็นเอ จับกุมแสง m-AMSA DNA topoisomerase II โดยการก่อตัวของความซับซ้อนแบบไตรภาคที่เกี่ยวข้องกับยาเสพติด เอนไซม์ และดีเอ็นเอแบกแบ่งสองครั้งที่ควั่น Netropsin, distamycin A และ berenil ยับยั้ง DNA topoisomerase มีผ่อนคลาย supercoiled ดีเอ็นเอ โดยเป็น-กลไกยังไม่ทราบ ที่นี่ เราวิเคราะห์วงจรผลเคลื่อนไหวของแสง camptothecin, m AMSA, netropsin, distamycin A และ berenil โดยใช้ bromodeoxyuridine ต่อเนื่องติดฉลากตาม ด้วย bivariate Hoechst โบรไมด์ 33258/ethidium ขั้นตอนการตรวจวิเคราะห์เซลล์ Camptothecin กันสะสมของเซลล์ในช่องทั้งหมดของวงจรเซลล์ ในขณะที่แสง m-AMSA ลูกค้าเป้าหมายส่วนใหญ่เก็บข้อมูลเซลล์ในช่อง G0/G1 และสะสมในระยะ G2 ไม่ camptothecin หรือ m-AMSA แสดงพ.ศ.กับ bromodeoxyuridine ประสานลงในดีเอ็นเอ ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ไปยังฟังก์ชันแตกต่างกันของ topoisomerases ดีเอ็นเอสองกำลังเคลื่อนที่วงจร สารประกอบที่ผูกกับร่องรองของดีเอ็นเอแทรกแซง กับทุกขั้นตอนของวงจรเซลล์ แต่เน้นระยะ G2 เป็นญาติ ไม่ camptothecin หรือ m-AMSA แสดงฤทธิ์กับ berenil ด้วยเหตุนี้ ระดับของจลนพลศาสตร์ perturbed วงจร สามารถตัดสินระหว่างสารที่กระตุ้นความคิดการยับยั้ง abortive รอบตัวเร่งปฏิกิริยาของดีเอ็นเอ topoisomerases (เช่น camptothecin, m-AMSA) และที่รบกวนการทำงานของเอนไซม์ โดยกลไกที่แตกต่างกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

topoisomerases NA เอนไซม์ปกครองหลากหลายของการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างดีเอ็นเอผ่านระหว่างรอบเซลล์ สารประกอบหลายมีแนวโน้มที่จะยุ่งเกี่ยวกับขั้นตอนเฉพาะของวงจรการเร่งปฏิกิริยาของเอนไซม์เหล่านี้ CAMPTOTHECIN จับกุมกิจกรรมของดีเอ็นเอ topoisomerase ผมโดยการกระตุ้นการก่อตัวของการแบ่งดีเอ็นเอเกลียวที่มีโมเลกุลเอนไซม์ที่แนบมาเพื่อ covalently ดีเอ็นเอ การสัมผัสกับ M-AMSA จับกุมดีเอ็นเอ topoisomerase ที่สองโดยการก่อตัวของความซับซ้อน ternary ที่เกี่ยวข้องกับยาเสพติด, เอนไซม์และ DNA แบกแบ่งสองครั้งที่ควั่น Netropsin, distamycin A, และ berenil ยับยั้งดีเอ็นเอผ่อนคลาย topoisomerase พึ่งดีเอ็นเอ supercoiled โดยกลไกที่ยังไม่รู้จัก ที่นี่เราวิเคราะห์ผลกระทบการเคลื่อนไหววัฏจักรของเซลล์จากการสัมผัสกับยา Camptothecin M-AMSA, netropsin, distamycin A, และ berenil โดยใช้การติดฉลาก bromodeoxyuridine อย่างต่อเนื่องตาม bivariate Hoechst 33258 / ethidium bromide flow cytometry CAMPTOTHECIN องค์การการสะสมของเซลล์ในช่องทั้งหมดของวงจรมือถือในขณะที่การสัมผัสกับ M-AMSA นำไปเป็นหลักในการเก็บรักษาของเซลล์ใน G0 / G1 ช่องและการสะสมในขั้นตอนการ G2 ทั้งยา Camptothecin มิได้ M-AMSA แสดงเสริมฤทธิ์กับ bromodeoxyuridine รวมตัวกันเป็นดีเอ็นเอ ผลการศึกษานี้ชี้ไปฟังก์ชั่นที่แตกต่างกันของทั้งสอง topoisomerases ดีเอ็นเอในขั้นตอนของวงจรมือถือเคลื่อนผ่าน สารประกอบผูกพันกับร่องเล็ก ๆ น้อย ๆ ของดีเอ็นเอยุ่งเกี่ยวกับทุกขั้นตอนของวงจรมือถือ แต่มีความสำคัญญาติในเฟส G2 ทั้งยา Camptothecin มิได้ M-AMSA การจัดแสดงนิทรรศการผลเสริมฤทธิ์ในการรวมกันกับ berenil ดังนั้นในระดับตกอกตกใจจลนพลศาสตร์วงจรเซลล์ความแตกต่างที่สามารถทำระหว่างสารกระตุ้นการยับยั้งสำเร็จของวงจรการเร่งปฏิกิริยาของ topoisomerases ดีเอ็นเอ (เช่นยา Camptothecin M-AMSA) และผู้ที่เข้าไปยุ่งกับกิจกรรมของเอนไซม์โดยกลไกที่แตกต่างกัน