tested compound was prepared in ethanol/ double distilled water. Calibration
standard solutions were prepared from the stock solution by appropriate
dilution with supporting electrolyte. Britton–Robinson buffer
solution was prepared in the usual way by mixing 40 mM of all necessary
components (phosphoric acid, acetic acid and boric acid). The pHs of
different Britton–Robinson buffers were adjusted with sodium hydroxide
(0.2 M).
Cyclic voltammetric and differential pulse voltammetric measurements
were performed using an electrochemical system
AUTOLAB PGSTAT 302N, Methrom Autolab B.V. (The Netherlands),
controlled by the corresponding software (NOVA 1.10). The cell
(10 ml) consisted of three-electrode system, boron-doped diamond
electrode (inner diameter of 3 mm; Windsor Scientific Ltd., Slough,
Berkshire, United Kingdom), an Ag/AgCl (saturated KCl) reference
electrode and Pt counter electrode. All potentials reported in this
paper were obtained vs. Ag/AgCl reference electrode at an ambient
temperature. All pH values were measured with pH meter model
Orion 1230.
The potential was swept over the range from 0 to +1.8 V (vs. Ag/
AgCl) at different scan rates for CV, and from 0.5 to +1.8 V vs. (Ag/
AgCl) at the optimized instrumental parameters (step potential 5 mV,
modulation amplitude 50 mV, modulation time 40 ms) for differential
pulse voltammetry.
For the Prussian blue method the different volumes of
andrographolide were prepared in range as for DPV. The following
mixture was added to each dilution of control solutions: 400 μl of
0.0008 M K4Fe(CN)6 and 400 ml of FeCl3 in 0.1 M HCl solution. The
final volume was 10 ml. Seven minutes later absorbance was
measured at 700 nm.
2.2. Sample preparation
Dried seeds of A. paniculata were purchased from a local herbal
store. The plant material was ground into coarse powder by electrically
driven grinder and was soaked in 70% aqueous-methanol for
1 h under reflux. The soaked material was filtered and the procedure
was repeated one more time. The combined filtrate was evaporated
and obtained oil was stored in the fridge at 4 °C. Human urine samples
were collected from two different persons, and 100 μl of urine
was added in cell and diluted with supporting electrolyte to make
10 ml of tested solution. Standard addition of andrographolide
caused current increment at the sample potential and made the
determination of andrographolide in the urine sample possible.
3. Results and discussion
3.1. Electrochemical behavior of andrographolide
Andrographolide as diterpene lactone, due to its complicated structure,
provides well defined peak at very high potential and in string
basic medium. Probably because of that, until now no one in the literature
has dealt with the behavior and determination of andrographolide
using electrochemical methods. In Britton–Robinson buffer solution at
pH lower than 11 peak of andrographolide does not occur or it happens
at very high potential, higher than 1.8 V, and cannot be observed with
proposed sensor and in suggested supporting electrolyte. This study
confirms advantages of BDD electrode compared with other solid and
unmodified electrodes and could be an interesting topic for the field of
the modified electrodes and their application in bioelectrochemistry.
In buffer solution pH 12 this diterpene provides a well defined and
singe peak at +1.55 V (Fig. 1). At this pH effect of scan rate (Fig. 2)
and dependence of peak current from square root of scan rate (inset
of Fig. 2) were evaluated. Peak current started to increase with increasing
scan rate but shifts in peak potential were not significant. The linear
Randles–Sevcik plot indicates the diffusion-controlled nature of the
Fig. 3. Cyclic voltammogram of andrographolide obtained under optimized experimental
conditions. Inset A: 7 measurements of andrographolide (0.01 mM) without interferences;
B: 7 measurements of andrographolide (0.01 mM) with AA, UA and DOP as interferences
in the same concentration level; C: CV voltammograms of AA, UA and DOP
under the same experimental conditions.
สารประกอบทดสอบถูกจัดทำขึ้นในเอทานอล / น้ำกลั่นคู่ การสอบเทียบ
โซลูชั่นมาตรฐานที่เตรียมจากการแก้ปัญหาที่เหมาะสมหุ้นโดย
เจือจางด้วยการสนับสนุนของอิเล็กโทร บริทบัฟเฟอร์-โรบินสัน
ทางออกที่ถูกจัดทำขึ้นในทางปกติโดยการผสม 40 มิลลิเมตรที่จำเป็นทั้งหมด
ส่วนประกอบ (กรดฟอสฟอรัสกรดอะซิติกและกรดบอริก) ค่าพีเอชของ
ที่แตกต่างกันบัฟเฟอร์บริท-โรบินสันมีการปรับกับโซเดียมไฮดรอกไซ
(0.2 ม.)
Cyclic voltammetric และค่าชีพจรวัด voltammetric
ได้ดำเนินการโดยใช้ระบบไฟฟ้า
AUTOLAB PGSTAT 302N, Methrom Autolab BV (เนเธอร์แลนด์),
ควบคุมโดยซอฟแวร์ที่เกี่ยวข้อง (NOVA 1.10) เซลล์
(10 มล.) ประกอบด้วยระบบสามขั้วไฟฟ้าโบรอนเจือเพชร
อิเล็กโทรด (เส้นผ่าศูนย์กลางภายในของ 3 มมวินเซอร์ จำกัด วิทยาศาสตร์หนอง
Berkshire, สหราชอาณาจักร) เป็น AG / AgCl (อิ่มตัว KCl) อ้างอิง
Electrode และ Pt ขั้วไฟฟ้า ศักยภาพทั้งหมดนี้รายงานใน
กระดาษที่ได้รับเมื่อเทียบกับ AG / AgCl ขั้วอ้างอิงที่แวดล้อม
อุณหภูมิ ค่าพีเอชทั้งหมดถูกวัดด้วยรูปแบบพีเอชมิเตอร์
Orion 1230.
ศักยภาพถูกกวาดช่วงจาก 0 ถึง 1.8 V (เทียบกับ AG /
AgCl) ในอัตราที่แตกต่างกันสำหรับการสแกน CV และ 0.5-1.8 V เทียบกับ (Ag /
AgCl) ในการเพิ่มประสิทธิภาพเครื่องมือพารามิเตอร์ (ขั้นตอนที่มีศักยภาพ 5 mV,
มอดูเลตความกว้าง 50 mV เวลาเอฟเอ็ม 40 มิลลิวินาที) สำหรับค่า
ชีพจร voltammetry.
สำหรับวิธีการปรัสเซียนฟ้าปริมาณที่แตกต่างกันของ
andrographolide ได้จัดทำในช่วงที่เป็นสำหรับ DPV ต่อไปนี้
ส่วนผสมที่ถูกเพิ่มเข้ามาในการลดสัดส่วนแต่ละโซลูชั่นการควบคุม: 400 ไมโครลิตรของ
0.0008 M K4Fe (CN) 6 และ 400 มล. ของ FeCl3 ในการแก้ปัญหา 0.1 M HCl
เล่มสุดท้ายคือ 10 มล. เจ็ดนาทีต่อมาดูดกลืน
วัดที่ 700 นาโนเมตร.
2.2 การเตรียมสารตัวอย่าง
เมล็ดแห้งของฟ้าทะลายโจรที่ซื้อมาจากสมุนไพรในท้องถิ่น
จัดเก็บ วัสดุที่โรงงานถูกบดเป็นผงหยาบโดยไฟฟ้า
เครื่องบดขับเคลื่อนและถูกแช่ในน้ำ 70% เมทานอลสำหรับ
1 ชั่วโมงภายใต้การไหลย้อนกลับ วัสดุที่แช่ถูกกรองและวิธีการที่
ถูกทำซ้ำอีกครั้งหนึ่ง กรองรวมได้รับการระเหย
และน้ำมันที่ได้มาเก็บไว้ในตู้เย็นที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส ตัวอย่างปัสสาวะของมนุษย์
ถูกรวบรวมมาจากคนสองคนที่แตกต่างกันและ 100 ไมโครลิตรของปัสสาวะ
ที่ถูกเพิ่มเข้ามาในมือถือและเจือจางด้วยการสนับสนุนที่จะทำให้อิเล็ก
10 มล. ของการแก้ปัญหาการทดสอบ นอกจากมาตรฐาน andrographolide
เกิดจากการเพิ่มขึ้นในปัจจุบันที่อาจเกิดขึ้นตัวอย่างและทำให้
การตัดสินใจของ andrographolide ในตัวอย่างปัสสาวะที่เป็นไปได้.
3 ผลการค้นหาและการอภิปราย
3.1 พฤติกรรมทางเคมีไฟฟ้าของ andrographolide
andrographolide เป็น lactone diterpene เนื่องจากโครงสร้างที่ซับซ้อนของมัน
ให้ดีที่กำหนดไว้สูงสุดที่สูงมากที่มีศักยภาพและในสาย
กลางขั้นพื้นฐาน อาจจะเป็นเพราะการที่จนถึงขณะนี้ไม่มีใครในวรรณคดี
มีการจัดการกับพฤติกรรมและความมุ่งมั่นของ andrographolide
โดยใช้วิธีการทางเคมีไฟฟ้า ในสารละลายบัฟเฟอร์บริท-โรบินสันที่
มีค่า pH ต่ำกว่า 11 จุดสูงสุดของ andrographolide ไม่เกิดขึ้นหรือเกิดขึ้น
ที่มีศักยภาพสูงมากสูงกว่า 1.8 V และไม่สามารถสังเกตได้ด้วย
เซ็นเซอร์เสนอและแนะนำในอิเล็กโทรไลสนับสนุน การศึกษาครั้งนี้
เป็นการยืนยันว่าข้อดีของการ BDD อิเล็กเมื่อเทียบกับของแข็งและอื่น ๆ
ขั้วไฟฟ้าที่ไม่มีการแก้ไขและอาจจะเป็นหัวข้อที่น่าสนใจสำหรับเขตข้อมูลของ
ขั้วไฟฟ้าที่มีการแก้ไขและการประยุกต์ใช้ใน bioelectrochemistry.
ในบัฟเฟอร์การแก้ปัญหาค่า pH 12 diterpene นี้ให้กำหนดไว้อย่างดีและ
จุดสูงสุดที่ 1.55 ไหม้ V (รูปที่ 1). ที่มีผลบังคับใช้ค่า pH ของอัตราการสแกน (รูปที่. 2)
และการพึ่งพาของยอดปัจจุบันจากรากที่สองของอัตราการสแกน (ภาพประกอบ
ของรูป. 2) ได้รับการประเมิน สูงสุดในปัจจุบันเริ่มที่จะเพิ่มขึ้นด้วยการเพิ่ม
อัตราการสแกน แต่การเปลี่ยนแปลงในศักยภาพสูงสุดอย่างไม่มีนัยสำคัญ เส้น
พล็อต Randles-Sevcik บ่งชี้ลักษณะการแพร่กระจายการควบคุมของ
รูป 3. voltammogram วงจร andrographolide ได้รับภายใต้การทดลองที่ดีที่สุด
เงื่อนไข ภาพประกอบ A: 7 วัด andrographolide (0.01 มิลลิเมตร) โดยไม่ต้องรบกวน;
B: 7 วัด andrographolide (0.01 มิลลิเมตร) กับ AA, UA และ DOP เป็นรบกวน
ในระดับความเข้มข้นเดียวกัน C: CV voltammograms ของ AA, UA และ DOP
ภายใต้เงื่อนไขการทดลองเดียวกัน
การแปล กรุณารอสักครู่..
