HSL activity was measured using the

HSL activity was measured using the method
reported by Shih et al. (1995). The fat was minced
and homogenized in 10 volumes of pH 7.0 medium
containing 0.25M sucrose, 1mM EDTA, 4 μg/ml
leupeptin, 1 μg/ml pepstatin A, and 1mM dithiothreitol,
then centrifuged at 105 000 g for 45 min
at 4°C. The superficial fat cake was removed and
the clear supernatant decanted and used for the
assay of HSL activity based on the standard assay
procedure of Nilsson-Ehle and Schotz. The assay
substrate was prepared immediately before use to
give a final concentration of each reagent in the
200 μl assay volume as follows: 100 mmol/l Tris
HCl, pH 7.0; 5 g/l of BSA (fatty acid-free, fraction
V), and 4.58 mmol/l triolein as substrate. A unit
of HSL activity was defined as: one HSL activity
unit is the concentration of enzyme that hydrolyzes
1 μmol olive oil in one minute at 37°C.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กิจกรรม HSL ถูกวัดโดยใช้วิธีรายงานโดยนายสือ et al. (1995) ไขมันถูกสับและปานกลาง pH 7.0 homogenized เป็นกลุ่มในปริมาณ 10ประกอบด้วยซูโครส 0.25M, 1mM EDTA, μg 4 mlleupeptin, A pepstatin μg/ml 1 และ dithiothreitol มม. 1centrifuged แล้ว ที่ g 105 000 สำหรับ 45 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส เค้กไขมันผิวเผินถูกเอาออก และdecanted supernatant ชัดเจน และใช้สำหรับการทดสอบกิจกรรม HSL ตามวิเคราะห์มาตรฐานขั้นตอนของ Nilsson Ehle และ Schotz การทดสอบมีเตรียมพื้นผิวก่อนใช้ให้ความเข้มข้นสุดท้ายของแต่ละรีเอเจนต์ในการปริมาตร 200 μl ทดสอบเป็นดังนี้: 100 mmol/l ทริสเรทติ้งHCl ค่า pH 7.0 5 g/l ของบีเอสเอ (กรดไขมันอิสระ เศษส่วนV) และ 4.58 triolein mmol/l เป็นพื้นผิว หน่วยของ HSL กิจกรรมถูกกำหนดเป็น: กิจกรรม HSL หนึ่งหน่วยเป็นความเข้มข้นของเอนไซม์ที่ hydrolyzesน้ำมันมะกอก μmol 1 ในหนึ่งนาทีที่ 37 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กิจกรรม HSL วัดโดยใช้วิธีการ
รายงานโดย et al, ฉือเจียจวง (1995) ไขมันที่ถูกสับ
และปั่นใน 10 เล่มของพีเอช 7.0 ขนาดกลาง
ที่มี 0.25M ซูโครส 1 mM EDTA, 4 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร
leupeptin 1 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร pepstatin และ 1 mM dithiothreitol,
ปั่นแล้วที่ 105 000 กรัมเป็นเวลา 45 นาที
ที่ 4 องศา ซี เค้กไขมันตื้น ๆ จะถูกลบออกและ
ใสชัดเจน decanted และใช้สำหรับการ
ทดสอบของกิจกรรม HSL ขึ้นอยู่กับการทดสอบมาตรฐาน
ขั้นตอนของการค๊-Ehle และ Schotz การทดสอบ
สารตั้งต้นที่ถูกจัดทำขึ้นทันทีก่อนการใช้งานเพื่อ
ให้มีความเข้มข้นสุดท้ายของการกระทำในแต่ละ
การทดสอบปริมาณ 200 ไมโครลิตรดังนี้ 100 มิลลิโมล / ลิตร Tris
HCl ค่า pH 7.0; 5 g / l ของบีเอสเอ (กรดไขมันฟรีส่วน
V) และ 4.58 มิลลิโมล / ลิตร triolein เป็นสารตั้งต้น หน่วย
ของกิจกรรม HSL ถูกกำหนดเป็นหนึ่งกิจกรรม HSL
หน่วยความเข้มข้นของเอนไซม์ที่ไฮโดรไลซ์
1 ไมโครโมลน้ำมันมะกอกในหนึ่งนาทีที่ 37 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กิจกรรม HSL ถูกวัดโดยใช้วิธี
รายงานโดย Shih et al . ( 1995 ) ไขมันเป็นและสับบดใน 10 เล่ม

ที่มี pH 7.0 ( 0.25m ซูโครส , 1mm EDTA , 4 μ g / ml
ลูเพปติน 1 μ g / ml pepstatin เป็นบัตรแข็งและ 1mm , ระดับที่ 105 , 000 G
จากนั้น 45 นาที
ที่ 4 องศา ผิวเผินไขมันเค้กถูกเอาออก และ
และชัดเจนสูงใช้สำหรับ
รินวิเคราะห์กิจกรรม HSL ตามมาตรฐานการทดสอบและขั้นตอนของค๊
เอล schotz . (
( เตรียมไว้ทันที ก่อนที่จะใช้

ให้ความเข้มข้นสุดท้ายของแต่ละการกระทำ
200 μ l ) ปริมาณดังนี้ 100 มิลลิโมล / ลิตรโดย
HCl , pH 7.0 ; 5 g / L ของ BSA ( กรดไขมันอิสระ , เศษส่วน
V ) และ 4.58 mmol / L ( ไตรโอลี นเป็น . หน่วย
กิจกรรม HSL เป็นเช่นหนึ่งกิจกรรม
HSLหน่วยความเข้มข้นของเอนไซม์ที่ hydrolyzes
1 μโมล น้ำมันมะกอก ในนาทีที่ 37 ° C .