2.3. SamplingThe fermentation exper

2.3. Sampling

The fermentation experiment was carried out in 30 parallel pots, opening 3 pots at each sampling time. Sampling was done at Days 0, 2, 5, 7, 9, 14, 21, 28, 42 and 56; pH was measured immediately after opening the fermentation pots. Thereafter, fresh samples (containing cabbage strips with fermentation liquid) were taken for microbiological analysis and for extraction of volatiles and ABG content. Remaining samples were frozen with liquid nitrogen, dried in a freeze dryer, milled to fine powder and stored in a dessicator in the dark until glucosinolate analyses.

2.4. pH measurement and microbial analysis

The pH was measured directly from the fermentation pot containing shredded cabbage and juice by a pH meter (WTW Inolab IDS Multi 9420). Three fermentation pots were opened at each time point and each pot was measured three times.

For microbial analysis, five different media were applied for measuring growth by enumeration of colony-forming units (cfu) per g sauerkraut (drained weight). Total mesophilic, aerobic bacteria were determined on plate count (PC) agar, total lactic acid bacteria (LAB) on DeMan–Rogosa–Sharp (MRS) agar (De Man et al., 1960), peroxide-producing LAB on MRS agar supplemented with Prussian Blue (MRS-P) (Saito, Seki, Iida, Nakayama, & Yoshida, 2007), Enterobacteriaceae on violet red bile dextrose (VRBD) agar ( Mossel, Mengerink, & Scholts, 1962), and yeasts on yeast extract glucose chloramphenicol (YGC) agar. For each sample, 10 g of sauerkraut were filled into sterile stomacher bags and after mixing with 90 mL sterile Ringer’s solution homogenised for 1 min in a stomacher (Bagmixer 400; Interscience, St Nom, France) set at level 4. Appropriate decimal dilutions in ¼ strength Ringer’s solution were made and 0.1 mL of the dilutions were plated onto agar plates in duplicates. After aerobic incubation at 30 °C for 72 h (PC), 25 °C for 72 h (YGC), 37 °C for 24 h (VRBD), and anaerobic incubation at 30 °C for 72 h (MRS and MRS-PB), respectively, cfu were counted.

For 16S rDNA sequencing, genomic DNA was extracted from cell material of purified single colonies with the aid of the ZR Bacterial/Fungal DNA Mini Kit (ZymoResearch, Freiburg, Germany) following the protocol of the supplier. Using primers 16Suni_27F and 16Suni_1492R (Lane, 1991), 16S rDNA was amplified by polymerase chain reaction (PCR) as follows: (1) 98 °C for 3 min; (2) 98 °C for 10 s; (3) 53 °C for 30 s; (4) 72 °C for 90 s; (5) 72 °C for 10 min. After completion of the program, samples were stored at 4 °C. PCR products were purified by Nucleospin® gel and PCR clean-up (Macherey–Nagel, Düren, Germany) following the protocol of the supplier. DNA sequences were determined at Eurofins Genomics (Ebersberg, Germany) using the same primers as for PCR. DNA sequences were subjected to BlastN analyses at the NCBI web site for species identification (Altschul, Gish, Miller, Myers, & Lipman, 1990).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3 การสุ่มตัวอย่างทดลองหมักถูกดำเนินในหม้อขนาน 30 เปิดหม้อ 3 ในแต่ละครั้งสุ่มตัวอย่าง สุ่มตัวอย่างภายในวันที่ 0, 2, 5, 7, 9, 14, 21, 28, 42 และ 56 ค่า pH ที่วัดทันทีหลังจากเปิดหม้อหมัก หลัง ตัวอย่างสด (ประกอบด้วยแถบกะหล่ำปลีกับของเหลวหมัก) ได้นำ การวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา และสกัด volatiles และ ABG เนื้อหา ตัวอย่างที่เหลือถูกแช่แข็ง ด้วยไนโตรเจนเหลว แห้งในการหยุดการทำเป่า ปลายให้ฝุ่นละออง และเก็บไว้ใน dessicator ในมืดจนวิเคราะห์ glucosinolate2.4 การวัดค่า pH และวิเคราะห์จุลินทรีย์PH ที่วัดได้โดยตรงจากหม้อหมักประกอบด้วยกะหล่ำปลีหั่นและน้ำ ด้วยเครื่องวัด pH (หลายรหัส Inolab WTW 9420) เปิดหม้อหมัก 3 จุดแต่ละครั้ง และแต่ละหม้อมีวัดสามครั้งสำหรับการวิเคราะห์จุลินทรีย์ สื่อต่าง ๆ ห้าถูกนำไปใช้สำหรับวัดการเจริญเติบโต โดยการแจงนับโคโลนีขึ้นหน่วย (cfu) ต่อ g sauerkraut (บรรจุ) รวม mesophilic แบคทีเรียแอโรบิกถูกกำหนดบนแผ่น agar จำนวน (พีซี) แบคทีเรียกรดแลคติรวม (LAB) ใน agar DeMan – Rogosa – คม (นาง) (เดคนร้อยเอ็ด al., 1960), เพอร์ออกไซด์ผลิตแล็บบน MRS agar เสริม ด้วย Prussian Blue (MRS-P) (Saito กิ อิอิดะ นะกะยะมะ และ Yoshida, 2007), Enterobacteriaceae ในน้ำดีสีแดงอมม่วง agar ขึ้น (VRBD) (มอสเซล Mengerink, & Scholts, 1962), และ yeasts เชื้อยีสต์สกัด agar chloramphenicol (YGC) กลูโคส สำหรับแต่ละตัวอย่าง g 10 ของ sauerkraut เต็มไป เป็นถุงใส่แผงประดับหน้าอก และหลัง จากผสม ด้วยโซลูชั่น 90 mL กอซ Ringer ของ homogenised ใน 1 นาทีในแผงประดับหน้าอก (Bagmixer 400 Interscience เซนต์นม ฝรั่งเศส) ได้ระดับ 4 ทำ dilutions ทศนิยมที่เหมาะสมในโซลูชันของ Ringer ¼แรง และ 0.1 mL ของ dilutions ที่ถูกเคลือบบนแผ่น agar ในสำเนา หลังจากบ่มแอโรบิกที่ 30 ° C สำหรับ h 72 (พีซี), 25 ° C สำหรับ h 72 (YGC), 37 ° C ใน 24 ชม (VRBD), และคณะทันตแพทยศาสตร์ไม่ใช้ที่ 30 ° C สำหรับ h 72 (นางและนาง PB), ตามลำดับ cfu นับได้สำหรับ 16S rDNA ลำดับ genomic DNA ที่สกัดจากวัสดุเซลล์ของอาณานิคมเดียวบริสุทธิ์ด้วยความช่วยเหลือของ ZR แบคทีเรีย/Fungal DNA มินิชุดสินค้า (ZymoResearch, Freiburg เยอรมนี) ตามโพรโทคอลของซัพพลายเออร์ ใช้ไพรเมอร์ 16Suni_27F และ 16Suni_1492R (Lane, 1991), 16S rDNA ถูกขยาย โดยปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (PCR) เป็นดังนี้: (1) 98 ° C สำหรับ 3 นาที (2) 98 ° C 10 s (3) 53 ° C สำหรับ 30 s (4) 72 ° C สำหรับ 90 s (5) 72 ° C สำหรับ 10 นาที งานของโปรแกรม ตัวอย่างถูกเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียส ผลิตภัณฑ์ PCR ได้บริสุทธิ์ โดยเจ Nucleospin ®และ PCR ล้าง (Macherey – Nagel, Düren เยอรมนี) ตามโพรโทคอลของซัพพลายเออร์ ลำดับดีเอ็นเอถูกกำหนดที่ Eurofins Genomics (Ebersberg เยอรมนี) โดยใช้ไพรเมอร์แบบเดียวกับ PCR ลำดับดีเอ็นเออยู่ภายใต้การวิเคราะห์ BlastN NCBI เว็บไซต์สำหรับการระบุสายพันธุ์ (Altschul, Gish มิลเลอร์ ไมเออร์ และ Lipman, 1990)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3
ระยะเวลาการทดลองในกระถาง 30 ขนาน )
, เปิด 3 กระถางที่แต่ละคนเวลา สุ่มตัวอย่างในวันที่ 0 , 2 , 5 , 7 , 9 , 14 , 21 , 28 , 42 และ 56 ; pH วัดทันทีหลังจากเปิดหมักหม้อ หลังจากนั้นตัวอย่างใหม่ ( ที่มีกะหล่ำปลีแถบกับน้ำหมัก ) นำมาวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาและการสกัดสารระเหยและ ABG ) ตัวอย่างที่เหลือถูกแช่แข็งด้วยไนโตรเจนเหลว แห้งแช่แข็งไว้ในเครื่องอบแห้งบดผงละเอียดและไว้ในที่มืดจนกว่าเดสิ กเคเตอร์ในการวิเคราะห์กลูโคซิโนเลต

2.4 . เครื่องวัดและ

การวิเคราะห์จุลินทรีย์