Whole blood culture and antigenic s

Whole blood culture and antigenic stimulation
of lymphocytes
The whole blood culture was done for antigenic stimulation
of lymphocytes as previously described (Weynants et al.
1995; Hasvold et al. 2002). Three, 1 ml aliquots of each
blood sample collected from the experimental animals
were distributed in 24 wells culture plate (Axygen, USA).
For negative control, 100 ll of PBS was added to one
aliquot, while for positive control 5 lg concanavaline A in
100 ll was added to second aliquot. For antigenic stimulation,
20 lg of rHaa86 was mixed with third whole blood
aliquot. The culture was incubated at 37 C in a humified
atmosphere with 5 % CO2 for 30 h. For gross assessment
and validity of test, following incubation, lymphocytes
were isolated by centrifugation using Histopaque-1077
(Talwar and Gupta 1992) and viability of cells was assessed
by trypan blue. To check the sterility of culture,
integrity of blood cells and proliferation of lymphocytes,
Giemsa stained blood smears were prepared and examined
microscopically. The culture supernatant was stored at
-80 C until assayed for the IFN-c content.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัฒนธรรมทั้งเลือดและกระตุ้น antigenicของ lymphocytesวัฒนธรรมทั้งเลือดทำการกระตุ้น antigenicของ lymphocytes เป็นก่อนหน้านี้อธิบาย (Weynants et al1995 Hasvold et al. 2002) สาม aliquots 1 ml ของแต่ละตัวอย่างเลือดที่เก็บจากสัตว์ทดลองมีกระจายในบ่อ 24 วัฒนธรรมจาน (Axygen สหรัฐอเมริกา)สำหรับการควบคุมค่าลบ 100 ll ของ PBS เพิ่มหนึ่งส่วนลงตัว สำหรับบวกควบคุม 5 lg concanavaline A ใน100 จะถูกเพิ่มส่วนลงตัวที่สอง สำหรับกระตุ้น antigeniclg 20 ของ rHaa86 ถูกผสมกับเลือดทั้งสามส่วนลงตัว วัฒนธรรมถูก incubated ที่ 37 C ในตัว humifiedบรรยากาศกับ 5% CO2 สำหรับ 30 h สำหรับการประเมินรวมและมีผลบังคับใช้ของ lymphocytes ทดสอบ คณะทันตแพทยศาสตร์ต่อไปนี้ได้แบ่งแยก centrifugation ใช้ Histopaque-1077(Talwar และกุปตา 1992) และมีประเมินศักยภาพของเซลล์โดย trypan blue การตรวจสอบ sterility วัฒนธรรมความสมบูรณ์ของเม็ดเลือดและแพร่หลายของ lymphocytesGiemsa สีเลือด smears เตรียม และตรวจสอบmicroscopically วัฒนธรรม supernatant ถูกเก็บไว้ที่C-80 จน assayed เนื้อหา IFN-c

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัฒนธรรมเลือดและการกระตุ้นแอนติเจน
ของเซลล์เม็ดเลือดขาว
ในเลือดทั้งวัฒนธรรมที่ทำสำหรับการกระตุ้นแอนติเจน
ของเซลล์เม็ดเลือดขาวตามที่ระบุไว้ก่อนหน้านี้ (Weynants et al.
1995; Hasvold et al, 2002). สาม aliquots 1 มิลลิลิตรของแต่ละ
ตัวอย่างเลือดที่เก็บได้จากสัตว์ทดลอง
ได้รับการกระจายอยู่ในแผ่นวัฒนธรรม 24 หลุม (Axygen สหรัฐอเมริกา).
สำหรับการควบคุมเชิงลบ 100 LL ของพีบีเอสถูกบันทึกอยู่ในหนึ่ง
aliquot ในขณะที่สำหรับควบคุมบวก 5 LG concanavaline ใน
100 LL ถูกบันทึกอยู่ใน aliquot ที่สอง สำหรับการกระตุ้นแอนติเจน,
20 ของแอลจี rHaa86 ผสมกับเลือดทั้งสาม
aliquot วัฒนธรรมที่ได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสใน humified
บรรยากาศที่มี CO2 5% เป็นเวลา 30 ชั่วโมง สำหรับการประเมินขั้นต้น
และความถูกต้องของการทดสอบต่อไปนี้การบ่มเซลล์เม็ดเลือดขาว
ที่แยกได้โดยใช้การหมุนเหวี่ยง Histopaque-1077
(Talwar และ Gupta 1992) และความมีชีวิตของเซลล์ได้รับการประเมิน
โดยสีฟ้า Trypan การตรวจสอบการเป็นหมันของวัฒนธรรม,
ความสมบูรณ์ของเม็ดเลือดและการแพร่กระจายของเซลล์เม็ดเลือดขาว,
Giemsa รอยเปื้อนเลือดเปื้อนได้จัดทำและตรวจสอบ
กล้องจุลทรรศน์ ใสวัฒนธรรมที่ถูกเก็บไว้ที่
-80 องศาเซลเซียสจน assayed สำหรับเนื้อหา IFN-ค

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัฒนธรรมของเลือดและกระตุ้นเม็ดเลือดขาวชนิด

วัฒนธรรมเลือดทั้งหมดถูกทำสำหรับแอนติเจนกระตุ้นเม็ดเลือดขาวตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (

weynants et al . 1995 ; hasvold et al . 2002 ) 3
1 มิลลิลิตรเฉยๆของแต่ละตัวอย่างเลือดที่เก็บจากสัตว์ทดลอง
ได้รับการกระจายในจานวัฒนธรรม 24 หลุม ( axygen , USA ) .
ควบคุมลบ 100 จะเพิ่มหนึ่ง
PBSส่วนลงตัว ในขณะที่บวกการควบคุม 5 LG concanavaline ใน
100 จะถูกเพิ่มเพื่อการเทศนาครั้งที่ สำหรับการกระตุ้นของแอนติเจน
20 , LG ของ rhaa86 ผสมกับเลือดทั้งหมด
3 ส่วนที่หารลงตัว วัฒนธรรม คือ บ่มที่ 37  C ในบรรยากาศที่มีคาร์บอนไดออกไซด์ humified
.
5 % 30 สำหรับการประเมินขั้นต้นและความถูกต้องของการทดสอบ ตามระยะเวลา โดยการแยกเม็ดเลือดขาว
3
histopaque-1077( และ talwar Gupta , 1992 ) และความมีชีวิตของเซลล์โดยประเมิน
ไตรแพนสีฟ้า เพื่อตรวจสอบการเป็นหมันของวัฒนธรรม , ความสมบูรณ์ของเม็ดเลือดและการ

จิมซาเปื้อนเลือดเม็ดเลือดขาวละเลงเตรียมและตรวจสอบ
แต่ . วัฒนธรรมนำถูกเก็บไว้ที่
- 80  C จนซีรั่มสำหรับ ifn-c เนื้อหา