2.9. ConfocalmicroscopyanalysisFor

2.9. Confocalmicroscopyanalysis
For the visualization of NHDF cells within CAH (3% agarose–1.5% chitosan), 10×103 cells/mL were seeded in -Slide 8 well Ibidi imaging plates (Ibidi GmbH, Germany) in contact with hydrogel. After 24h, cells were fixed with 4% paraformaldehyde (PFA) in PBS for 20min and then stained with 1 L of Propidium Iodide (PI) (1 mg/mL) during 15 min, at 37 ◦ C. Imaging experiments were performed in a Zeiss LSM 710 laser scanning confocal microscope (CLSM) (Carl Zeiss SMT Inc., USA), where consecutive z-stacks were acquired. 3D reconstruction and image analysis was performed in Zeiss Zen 2010 (Gaspar et al., 2011; Lima et al., 2013).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.9. Confocalmicroscopyanalysisสำหรับการแสดงของเซลล์ NHDF CAH (ไคโตซาน agarose–1.5% 3%), 10 × 103 เซลล์/มล.ถูกเตรียมใน - Ibidi ดีภาพนิ่ง 8 ภาพแผ่น (Ibidi GmbH เยอรมนี) ติดต่อกับ hydrogel หลังจาก 24 ชม. แก้ไข มี 4% paraformaldehyde (PFA) ใน PBS 20 นาที และจากนั้น ย้อม ด้วย 1 L ของ Propidium ไอโอไดด์ (PI) (1 mg/mL) ในช่วง 15 นาทีเซลล์ ที่ 37 โรค ค.ภาพการทดลองดำเนินการในเลเซอร์ Zeiss LSM 710 โฟคอกล้องจุลทรรศน์ (CLSM) (Carl Zeiss SMT Inc., USA), การสแกนที่ต่อเนื่องกัน z-กองได้รับมา ทำการวิเคราะห์บูรณะและภาพ 3D ใน Zeiss เซน 2010 (Gaspar et al. 2011 ลิมา et al. 2013)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.9 Confocalmicroscopyanalysis
สำหรับการแสดงของเซลล์ NHDF ภายใน CAH (3% agarose-1.5% ไคโตซาน) 10 × 103 เซลล์ / มลเมล็ดใน -Slide 8 Ibidi ดีแผ่นถ่ายภาพ (Ibidi GmbH ประเทศเยอรมนี) ในการติดต่อกับไฮโดรเจล หลังจาก 24 ชั่วโมง, เซลล์ได้รับการแก้ไขด้วย 4% paraformaldehyde (PFA) ในพีบีเอส 20 นาทีและจากนั้นย้อมด้วยสี 1 ลิตรของ Propidium ไอโอไดด์ (PI) (1 mg / ml) ระหว่างวันที่ 15 นาทีที่ 37 ◦การทดลองซีถ่ายภาพได้ดำเนินการใน Zeiss LSM 710 เลเซอร์สแกน confocal กล้องจุลทรรศน์ (CLSM) (Carl Zeiss SMT Inc. , USA) ซึ่งติดต่อกัน Z-กองกำลังซื้อ การฟื้นฟูและการวิเคราะห์ภาพ 3 มิติได้รับการดำเนินการในปี 2010 Zeiss เซน (Gaspar et al, 2011;.. ลิมา, et al, 2013)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.9 . confocalmicroscopyanalysisสำหรับการแสดงของ nhdf เซลล์ภายในอเมริกา ( 3% ) ไคโตซาน ( 1.5% ) , 10 × 103 เซลล์ / มิลลิลิตร ) เมล็ดใน - ภาพนิ่งดี ibidi ภาพแผ่น ( ibidi GmbH , Germany ) ติดต่อกับเจล . หลังจาก 24 ชั่วโมง , เซลล์ถูกกำหนดด้วย 4% พาราฟอร์มาลดิไฮด์ ( พีเอฟเอ ) ใน PBS สำหรับ 20 นาทีแล้วย้อมด้วย 1 ลิตร propidium ไอโอไดด์ ( PI ) ( 1 mg / ml ) ในช่วง 15 นาทีที่ 37 ◦ C ภาพทดลองใน Zeiss และ 710 เลเซอร์ด้วยกล้องจุลทรรศน์ ( clsm ) ( Carl Zeiss SMT Inc สหรัฐอเมริกา ) ซึ่ง z-stacks ติดต่อกันได้มา . มิติการสร้างใหม่และภาพการวิเคราะห์ใน Zeiss เซน 2010 ( แกสเปอร์ et al . , 2011 ; ลิมา et al . , 2013 )