Prion diseases are caused by the co

Prion diseases are caused by the conformational change of cellular prion protein PrPC into pathological prion protein PrPSc. Here we study the effect of zinc on the aggregation and conformational change of human prion protein (PrP). As revealed by thioflavin T binding assays, Sarkosyl-soluble SDS-PAGE, and transmission electron microscopy, aggregation of wild-type PrP in the absence of Zn2 + undergoes four steps: amorphous aggregates, profibrils, mature fibrils, and fragmented fibrils. When the molar ratio of Zn2 + to PrP was 9:1, however, aggregation of wild-type PrP undergoes another pathway in which wild-type PrP forms oligomers quickly and then forms short-rod aggregates. Unlike wild-type PrP, the octarepeats deletion mutant PrPΔocta forms typical mature fibrils either with or without zinc. As evidenced by isothermal titration calorimetry, Fourier transform infrared spectroscopy, and proteinase K digestion assays, Zn2 + strongly binds to wild-type PrP monomers with the first binding constant exceeding 107 M− 1 under denaturing conditions, and changes the conformation of wild-type PrP aggregates remarkably, but weakly binds to PrPΔocta with binding affinity around 104 M− 1 and has no obvious effects on the conformation of PrPΔocta aggregates. Our data demonstrate that zinc significantly changes the aggregation pathway and the conformation of wild-type PrP aggregates mainly via interaction with its octarepeat region. Our findings could explain how zinc modifies pathological PrP conformation associated with prion diseases.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

พรีออนโรคที่เกิดจากการเปลี่ยนแปลง conformational พรีออนเซลลูลาร์โปรตีน PrPC เป็นพรีออนทางพยาธิวิทยาโปรตีน PrPSc ที่นี่เราศึกษาผลของสังกะสีในการรวมและการเปลี่ยนแปลง conformational โปรตีนมนุษย์พรีออน (PrP) เปิดเผยโดย ผูก thioflavin T assays, Sarkosyl ละลายหน้าองค์กร และส่งอิเล็กตรอน microscopy รวมของป่าชนิด PrP ของ Zn2 + ผ่านขั้นตอนที่ 4: รวมข้อมูลไป profibrils, fibrils ผู้ใหญ่ และ fibrils ที่อยู่อย่างกระจัดกระจาย เมื่อ 9:1 อัตราส่วนสบ ของ Zn2 + จะ PrP ไร รวมของป่าชนิด PrP ทนี้ทางเดินอื่นซึ่งป่าชนิด PrP ฟอร์ม oligomers อย่างรวดเร็ว และแบบแกนสั้นเพิ่มแล้ว ซึ่งแตกต่างจากป่าชนิด PrP, mutant ลบ octarepeats เป็น PrPΔocta ใช้ fibrils ผู้ใหญ่ทั่วไปอาจมี หรือไม่ มีสังกะสี เป็นหลักฐาน โดยการไทเทรต isothermal calorimetry แปลงฟูรีเยกอินฟราเรด และย่อยอาหาร proteinase K assays, Zn2 + อย่างยิ่ง binds ไปป่าชนิด PrP monomers ด้วยค่าคงการผูกแรกที่เกิน 1 M− 107 ภายใต้เงื่อนไข denaturing และเปลี่ยน conformation ของป่าชนิด PrP เพิ่มทแบบ แต่สูญ binds ไป PrPΔocta กับผูกความสัมพันธ์ประมาณ 104 M− 1 มี conformation ของผล PrPΔocta ผลไม่ชัดเจน ข้อมูลแสดงให้เห็นว่า สังกะสีมากเปลี่ยน conformation ของป่าชนิด PrP เพิ่มส่วนใหญ่ผ่านการติดต่อกับภูมิภาคของ octarepeat และทางเดินรวม ผลการวิจัยของเราจะอธิบายวิธีสังกะสีปรับเปลี่ยน conformation PrP ทางพยาธิวิทยาที่เกี่ยวข้องกับโรคพรีออน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

พรีออนโรคที่เกิดจากการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างของโปรตีนพรีออนโทรศัพท์มือถือเข้าไปใน PrPC PrPSc โปรตีนพรีออนทางพยาธิวิทยา ที่นี่เราศึกษาผลของสังกะสีในการรวมตัวและการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างของโปรตีนพรีออนของมนุษย์ (PrP) เปิดเผยว่าจากการตรวจ thioflavin T ผูกพัน Sarkosyl ละลาย SDS-PAGE และกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน, การรวมตัวของ PrP ชนิดป่าในกรณีที่ไม่มี Zn2 + ผ่านสี่ขั้นตอน: มวลสัณฐาน profibrils, ซ่านผู้ใหญ่และซ่านแยกส่วน เมื่ออัตราส่วนของ Zn2 + เพื่อ PrP 9: 1 แต่การรวมตัวของ PrP ป่าชนิดอื่นผ่านทางเดินที่ป่าชนิด oligomers PrP รูปแบบได้อย่างรวดเร็วและรูปแบบจากนั้นมวลสั้นคัน ซึ่งแตกต่างจาก PrP ป่าชนิด octarepeats ลบรูปแบบPrPΔoctaกลายพันธุ์ซ่านผู้ใหญ่ทั่วไปทั้งที่มีหรือไม่มีสังกะสี เป็นหลักฐานโดย calorimetry ไตเตรท isothermal, ฟูเรียร์อินฟราเรดและโปร K ตรวจการย่อยอาหาร Zn2 + ขอผูกกับป่าชนิดโมโนเมอร์ที่มี PrP คงมีผลผูกพันแรกเกิน 107 M- 1 ภายใต้เงื่อนไข denaturing, และการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างของป่าประเภท PrP มวลอย่างน่าทึ่ง แต่อ่อนผูกกับPrPΔoctaที่มีผลผูกพันความสัมพันธ์รอบ 104 M- ที่ 1 และไม่มีผลกระทบที่เห็นได้ชัดในโครงสร้างของมวลรวมPrPΔocta ข้อมูลของเราแสดงให้เห็นว่ามีการเปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญสังกะสีเดินรวมและโครงสร้างของมวลรวม PrP ป่าชนิดส่วนใหญ่ผ่านการมีปฏิสัมพันธ์กับภูมิภาค octarepeat ของ ผลการวิจัยของเราสามารถอธิบายวิธีการปรับเปลี่ยนโครงสร้างสังกะสี PrP ทางพยาธิวิทยาที่เกี่ยวข้องกับโรคพรีออน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โรคตัวนี้ เกิดจากการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างของโปรตีนในเซลล์ซึ่ง prpc พยาธิวิทยาพรีออนโปรตีน prpsc . ที่นี่เราศึกษาผลของสังกะสีในการรวมและการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างของมนุษย์พรีออนโปรตีน ( ช่วย ) พบว่าโดย thioflavin ไม่ผูกพันหรือ sarkosyl ละลาย , เอนไซม์ , และกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราด ,การรวมของยาช่วยในการ zn2 ผ่านสี่ขั้นตอน : สัณฐานมวลรวม profibrils , ผู้ใหญ่ fibrils และแยกส่วนไฟบริล . เมื่ออัตราส่วนโดยโมลของ zn2 ที่จะช่วยคือ 9 : 1 , อย่างไรก็ตาม , การรวมของยาช่วยอีกทาง ซึ่งจะช่วยในรูปแบบของหน่วยได้อย่างรวดเร็วและจากนั้นรูปแบบมวลรวม ก้านสั้น ซึ่งแตกต่างจากของช่วย ,การ octarepeats กลายพันธุ์ช่วยลบΔแปดแบบฟอร์มโดยทั่วไปผู้ใหญ่ไฟบริลให้มี หรือ ไม่มี สังกะสี เป็นหลักฐานโดยการไทเทรตคงที่จากฟูเรียร์ทรานฟอร์มอินฟราเรดสเปกโทรสโกปี และโปรตีนย่อย zn2 ) K , ขอก็ให้ยาช่วยเมอร์กับแรกผูกคงที่เกิน 107 m − 1 เหนี่เงื่อนไขและการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างของมวลรวมของช่วยมาก แต่ไม่มีมูลก็ให้ช่วยΔแปดกับผูกติดรอบ 104 m − 1 และไม่มีผลกระทบต่อโครงสร้างของชัดเจนช่วยΔแปดมวลรวม . ข้อมูลของเราแสดงให้เห็นว่ามีการเปลี่ยนแปลงทางเดินของสังกะสีและโครงสร้างของผลิตมวลรวมส่วนใหญ่ผ่านการมีปฏิสัมพันธ์กับภูมิภาคช่วย octarepeat ของมันผลการวิจัยของเราได้อธิบายว่า สังกะสีช่วยปรับเปลี่ยนโครงสร้างที่เกี่ยวข้องกับพยาธิวิทยาโรคตัวนี้