3. Experimental Section3.1. Materia

3. Experimental Section
3.1. Materials
Astaxanthin (>90%) was purchased from Kailu Ever Brilliance Biotechnology Co., Ltd. (Beijing,China). Sucrose oleate (OWA-1570) were donated by Mitsubishi Food Co. (Tokyo, Japan). Sodium caseinate (SC) and gum Arabic were provided by Merck Co. (Darmstadt, Germany). Gelatin type A(polyoxythylene sorbitan monolaurate) were bought from Sigma Aldrich (Steinheim, Germany).
Sodium azide, analytical and HPLC-grade dichloromethane, methanol and acetonitrile were provided
by Fisher scientific (Leicestershire, UK). All chemicals were used without future purification.
3.2. Preparation of Astaxanthin Nanodispersions
Gelatin or a mixture of gelatin with sucrose oleate/SC/gum Arabic (1:1 w/w) were dissolved in deionized water (at 20 °C), containing 0.02 wt % sodium azide at a concentration of 1% w/w and thoroughly mixed by magnetic stirring for 4 h. The organic phase, consisting of dissolved astaxanthin in dichloromethane (1% w/w), was added to the aqueous phase, and coarse emulsions were formed by two-phase homogenization using a conventional homogenizer (Silverson, Buckinghamshire, UK) at 5000 rpm for 5 min. By placing the system in a high-pressure homogenizer (APV, Crawley, UK)at 50 MPa twice, fine emulsions (nanoemulsion) were produced. The organic to aqueous phase ratio was set at 1:9. The sample volume of 300 mL was used for each sample.The dichloromethane was then removed from the system by rotary evaporation (Eyela NE-1001, Tokyo Rikakikai Co. Ltd.,Tokyo, Japan) at 250 Pa and 47 °C and 100 rpm to convert the astaxanthin nanoemulsions into astaxanthin nanodispersions.
3.3. Analytical Methods
Measurement of the mean particle size, PDI, zeta potential, mobility and conductivity of produced astaxanthin particles were conducted by using Zetasizer Nano ZS (Malvern Instruments Ltd.,
Worcestershire, UK). The absorbance of the nanodispersion particles was set at 0.3. To avoid multiple scattering effects, the dispersions were diluted with deionized water prior to analysis and then directly placed into the module immediately after preparation. Measurements were performed at 25 °C in triplicate [24].The measurement of astaxanthin concentration in prepared astaxanthin nanodispersions was
performed using an Agilent liquid chromatography system (Agilent Technologies 1200 Series,Waldbroon, Germany), equipped with a Diode Array Detector G13150, a Nova-Pak® C18 (3.9 × 300 mm)Waters HPLC column and an isocratic mobile phase consisting of 85% methanol, 5% dichloromethane, 5% acetonitrile and 5% water. The absorption spectra were in the range of 250–700 nm intervals, and detection was performed at 480 nm. The calibration of peak area versus astaxanthin concentration was linear in the measurement concentrations [25].
3.4. Statistical Analysis
The physicochemical characteristics of astaxanthin nanodispersions were subjected to one-way analysis of variance using the Minitab v. 14 statistical package (Minitab Inc., University Park, PA,USA). All experiments and measurements were performed in duplicate and Tukey’s multiple range tests were used to determine significant differences (p < 0.05) between the responses.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3 การส่วนที่ทดลอง3.1. วัสดุAstaxanthin (> 90%) ที่ซื้อจาก Kailu เคยความหมายเทคโนโลยีชีวภาพ Co., Ltd. (ปักกิ่ง จีน) ซูโครส oleate (OWA-1570) ได้บริจาค โดยมิตซูบิชิ จำกัดอาหาร (โตเกียว ญี่ปุ่น) โซเดียม caseinate (SC) และหมากฝรั่งอาหรับได้ โดย บริษัทเมอร์ค (ดาร์มส เยอรมนี) ชนิดตุ๋นเป็น (polyoxythylene sorbitan monolaurate) ถูกซื้อจาก Aldrich ซิก (Steinheim เยอรมนี)มีโซเดียม azide วิเคราะห์ และ HPLC เกรด dichloromethane เมทานอล และ acetonitrileโดย Fisher วิทยาศาสตร์ (เลสเตอร์เชอร์ สหราชอาณาจักร) ใช้สารเคมีทั้งหมดโดยไม่ฟอกในอนาคต3.2 การเตรียมการของ Astaxanthin Nanodispersionsตุ๋นหรือส่วนผสมของตุ๋นกับซูโครส oleate/SC/หมาก ฝรั่งอาหรับ (1:1 w/w) ไม่ละลายในน้ำ deionized (ที่ 20 ° C), ประกอบด้วย 0.02 azide โซเดียม% wt ที่เข้มข้น 1% w/w และผสมอย่างละเอียด โดยกวนแม่เหล็กสำหรับ 4 h เพิ่มระยะอควีเฟสอินทรีย์ astaxanthin ละลายใน dichloromethane (1% w/w), ประกอบด้วย และ emulsions หยาบถูกก่อตั้งขึ้น โดย homogenization two-phase ใช้ homogenizer ปกติ (Silverson บักกิงแฮมเชอร์ อังกฤษ) ที่ 5000 รอบต่อนาที 5 นาที วางระบบในการปั้ม homogenizer (APV วิคครอวเลย์ สหราชอาณาจักร) ที่แรง 50 ครั้ง มีผลิต emulsions ดี (nanoemulsion) อินทรีย์อัตราระยะสเอาท์ที่ได้ที่ 1:9 ตัวอย่างปริมาตร 300 mL ใช้สำหรับแต่ละตัวอย่าง Dichloromethane ถูกแล้วเอาออกจากระบบ โดยระเหยโรตารี่ (Eyela NE-1001 โตเกียว Rikakikai จำกัด โตเกียว ญี่ปุ่น) ที่ 250 Pa และ 47 ° C และ 100 รอบต่อนาทีเพื่อแปลง astaxanthin nanoemulsions astaxanthin nanodispersions3.3 การวิเคราะห์วิธีการวัดขนาดอนุภาคเฉลี่ย PDI แคเธอรีนซีตาศักยภาพ เคลื่อนไหว และนำผลิต astaxanthin อนุภาคได้ดำเนินการโดย ZS นาโน Zetasizer (มัลเวิร์นเครื่องมือ จำกัดวูสเตอร์เชอร์ สหราชอาณาจักร) Absorbance ของอนุภาค nanodispersion ถูกตั้งค่าที่ 0.3 เพื่อหลีกเลี่ยงผลกระทบ scattering หลาย dispersions ที่ถูกทำให้เจือจาง ด้วยน้ำ deionized ก่อนการวิเคราะห์ และโดยตรงอยู่ในโมดูลทันทีหลังจากเตรียม มีดำเนินการวัดที่ 25 ° C ใน triplicate [24] เป็นการวัดความเข้มข้นของ astaxanthin astaxanthin พร้อม nanodispersions ในใช้ Agilent chromatography เหลวระบบการ (Agilent เทคโนโลยี 1200 ชุด Waldbroon เยอรมนี), พร้อมกับเป็นไดโอดอาร์เรย์จับ G13150, C18 ®เป็นโนวาปาก (3.9 × 300 มม.) คอลัมน์ HPLC น้ำและระยะการเคลื่อน isocratic คิดประกอบด้วยเมทานอล 85%, 5% dichloromethane, acetonitrile 5% และ 5% น้ำ แรมสเป็คตราดูดซึมได้ในช่วงของช่วง 250 – 700 nm และทำการตรวจสอบที่ 480 nm แต่งตั้งสูงสุดเมื่อเทียบกับความเข้มข้นของ astaxanthin เป็นเส้นตรงในการวัดความเข้มข้น [25]3.4. สถิติวิเคราะห์ลักษณะ physicochemical ของ astaxanthin nanodispersions ถูกต้องทางเดียวการวิเคราะห์ของความแปรปรวนโดยใช้ปัจจัย v. แพคเกจทางสถิติ 14 (ปัจจัย Inc. มหาวิทยาลัยสวน PA สหรัฐอเมริกา) ดำเนินการทดลองและการวัดทั้งหมดในซ้ำ และการทดสอบของ Tukey หลายช่วงถูกใช้เพื่อกำหนด (p < 0.05) ความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่างการตอบสนอง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3. การทดลองมาตรา
3.1 วัสดุ
Astaxanthin (> 90%) ซื้อมาจาก Kailu เคยสดใสเทคโนโลยีชีวภาพ จำกัด (กรุงปักกิ่งประเทศจีน) ซูโครส oleate (OWA-1570) ที่ได้รับบริจาคมาจากมิตซูบิชิอาหาร จำกัด (กรุงโตเกียวประเทศญี่ปุ่น) โซเดียมเคซี (SC) และเหงือกอาหรับมีให้โดยเมอร์ค จำกัด (มสตัด, เยอรมนี) เจลาตินชนิด A (monolaurate polyoxythylene ซอร์) ได้รับซื้อมาจากซิกม่าดิช (Steinheim, เยอรมนี).
azide โซเดียมวิเคราะห์และไดคลอโรมีเทน HPLC ชั้นเมทานอลและ acetonitrile
มีให้โดยฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์(เลสเตอร์เชียร์สหราชอาณาจักร) สารเคมีทั้งหมดถูกนำมาใช้โดยไม่บริสุทธิ์ในอนาคต.
3.2 เตรียมความพร้อมของ Astaxanthin Nanodispersions
เจลาตินหรือส่วนผสมของเจลาตินที่มีน้ำตาลซูโครส oleate / SC / หมากฝรั่งอาหรับ (1: 1 w / w) ถูกละลายในน้ำปราศจากไอออน (ที่ 20 ° C) ที่มี 0.02% โดยน้ำหนักโซเดียมเอไซด์ที่ความเข้มข้น 1% น้ำหนัก / น้ำหนักและผสมโดยกวนแม่เหล็ก 4 ชั่วโมง เฟสอินทรีย์ประกอบด้วย astaxanthin ละลายในไดคลอโรมีเทน (1% w / w), ถูกบันทึกอยู่ในเฟสน้ำและอิมัลชันหยาบที่ถูกสร้างขึ้นโดยทำให้เป็นเนื้อเดียวกันสองเฟสโดยใช้ homogenizer ธรรมดา (Silverson เหมือนเดิมสหราชอาณาจักร) ที่ 5000 รอบต่อนาที 5 นาที. โดยการวางระบบในแรงดันสูง homogenizer (APV รอว์ลีย์สหราชอาณาจักร) 50 เมกะปาสคาลเป็นครั้งที่สองที่ดีอิมัลชัน (nanoemulsion) มีการผลิต อินทรีย์อัตราส่วนเฟสน้ำตั้งอยู่ที่ 1: 9 ปริมาณตัวอย่าง 300 มิลลิลิตรที่ใช้สำหรับแต่ละไดคลอโรมีเทน sample.The ถูกลบออกแล้วจากระบบโดยการระเหยแบบหมุน (Eyela NE-1001 โตเกียว Rikakikai จำกัด กรุงโตเกียวประเทศญี่ปุ่น) ที่ 250 ป่าและ 47 ° C และ 100 รอบต่อนาที การแปลง astaxanthin nanoemulsions ลง nanodispersions astaxanthin.
3.3 การวิเคราะห์วิธีการวัดขนาดอนุภาคเฉลี่ย PDI ศักยภาพซีตา, ความคล่องตัวและการนำของอนุภาค astaxanthin ผลิตได้ดำเนินการโดยใช้ Zetasizer Nano ZS (เวิร์นเครื่องมือ จำกัด วูสเตอร์สหราชอาณาจักร) การดูดกลืนแสงของอนุภาค nanodispersion ที่ถูกตั้งไว้ที่ 0.3 เพื่อหลีกเลี่ยงผลกระทบที่กระจัดกระจายหลายกระจายถูกเจือจางด้วยน้ำปราศจากไอออนก่อนที่จะมีการวิเคราะห์แล้ววางโดยตรงลงในโมดูลทันทีหลังจากที่การเตรียมความพร้อม วัดได้ดำเนินการที่ 25 ° C ในเพิ่มขึ้นสามเท่า [24] การวัดความเข้มข้น astaxanthin ใน nanodispersions astaxanthin เตรียมได้โดยเริ่มต้นได้รับการดำเนินการโดยใช้ระบบของเหลว chromatography Agilent (Agilent Technologies 1200 ซีรีส์ Waldbroon, เยอรมนี) พร้อมกับอาร์เรย์ไดโอดตรวจจับ G13150 เป็น โนวา-C18 ปาก? (3.9 × 300 มิลลิเมตร) คอลัมน์ HPLC น้ำและเฟสเคลื่อนที่ isocratic ประกอบด้วยเมทานอล 85%, ไดคลอโรมีเทน 5%, 5% acetonitrile และน้ำ 5% สเปกตรัมการดูดซึมอยู่ในช่วง 250-700 นาโนเมตรช่วงเวลาและการตรวจสอบการดำเนินการที่ 480 นาโนเมตร การสอบเทียบของพื้นที่จุดสูงสุดเมื่อเทียบกับความเข้มข้น astaxanthin เป็นเชิงเส้นในระดับความเข้มข้นที่วัด [25]. 3.4 สถิติวิเคราะห์ลักษณะทางเคมีกายภาพของ nanodispersions astaxanthin ถูกยัดเยียดให้หนึ่งในการวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียวโดยใช้ Minitab v. 14 โปรแกรมสำเร็จรูปทางสถิติ (Minitab ซึ่ง University Park, PA, สหรัฐอเมริกา) การทดสอบทั้งหมดและการวัดได้ดำเนินการในที่ซ้ำกันและการทดสอบช่วงหลาย Tukey ถูกใช้ในการกำหนดความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญ (p <0.05) การตอบสนอง