Suspension selection. Several methods of selection were used
for the suspension cells, and all resulted in transgenic plants. For
some bombardments, suspension cells were transferred to MS
basal salts medium supplemented with 0.5 mg·liter-1 2,4-D and
0.125 M osmoticum (0.0625 M mannitol and 0.0625 M sorbitol) 2
hours he fore particle bombardment; for other bombardments the
osmoticum pretreatment was omitted. Following bombardment,
the suspension cells were cultured for one week on solidified MS
basal salts medium supplemented with 0.5 mg·liter–1 2.4-D and
either with or without 0.125 M ostmoticum to allow the cellS t o
recover from bombardment. These cellS were then transferred to
solidified MS basal salts medium supplemented with 0.5
mg·liter –1 2,4-D and either 1 or 6 mg·liter–1 PPT or bialaphos.
After at least two subcultures onto solidified MS basal salts
medium supplemented with 2 or 6 mg·liter–1 bialaphos or PPT,
the cellS were transferred to regeneration medium supplemented
with either 0, 0.5, or 3 mg·liter–1 bialaphos. Alternatively,
some of the bombarded cells were cultured 2 weeks in
liquid MS basal salts medium supplemented with 0.5 mg·liter–1 2,4-
D and 0.1 mg·liter–1 bialaphos immediately after bombardment.
These cells were then transferred to solidified MS basal
ตัวเลือกการระงับ วิธีการหลายตัวเลือกถูกนำมาใช้
สำหรับเซลล์ระงับและส่งผลให้พืชดัดแปรพันธุกรรม สำหรับ
bombardments บางเซลล์ระงับถูกถ่ายโอนไปยัง MS
เกลือเสริมฐานขนาดกลางที่มี 0.5 มิลลิกรัมต่อลิตร·-1 2,4-D และ
0.125 M osmoticum (0.0625 M mannitol และ 0.0625 M ซอร์บิทอ) 2
ชั่วโมงก่อนมีอนุภาคเขาโจมตี; สำหรับ bombardments อื่น ๆ
ปรับสภาพ osmoticum ถูกละเว้น ต่อไปนี้โจมตี
เซลล์ระงับเพาะเลี้ยงเป็นเวลาหนึ่งสัปดาห์ในผลึก MS
เกลือเสริมฐานขนาดกลางที่มี 0.5 มิลลิกรัมต่อลิตร·-1 2.4 D และการ
มีหรือไม่มี 0.125 M ostmoticum ที่จะช่วยให้เซลล์ในการ
กู้คืนจากการโจมตี เซลล์เหล่านี้ถูกย้ายไป
เป็นผลึกเกลือฐาน MS ที่เติมขนาดกลางที่มี 0.5
มิลลิกรัมต่อลิตร -1 · 2,4-D และ 1 หรือ 6 มิลลิกรัมต่อลิตร·-1 PPT หรือ bialaphos.
หลังจากเวลาอย่างน้อยสองวัฒนธรรมบน MS ผลึกเกลือฐาน
เสริมกลาง มี 2 หรือ 6 มิลลิกรัมต่อลิตร·-1 bialaphos หรือ PPT,
เซลล์ถูกโอนไปยังกลางฟื้นฟูเสริม
ที่มีทั้ง 0, 0.5, หรือ 3 มิลลิกรัมต่อลิตร·-1 bialaphos อีกวิธีหนึ่งคือ
บางส่วนของเซลล์จู่โจมมาเลี้ยง 2 สัปดาห์ใน
ของเหลว MS เกลือเสริมฐานขนาดกลางที่มี 0.5 มิลลิกรัมต่อลิตร·-1 2,4-
D และ 0.1 มิลลิกรัมต่อลิตร·-1 bialaphos ทันทีหลังจากการโจมตี.
เซลล์เหล่านี้ถูกย้ายไปเป็นผลึก MS เป็นมูลฐาน
การแปล กรุณารอสักครู่..

การเลือกระบบ การใช้หลายวิธีสำหรับเซลล์แขวนลอย และส่งผลให้พืชดัดแปรพันธุกรรม . สำหรับบาง bombardments , เซลล์แขวนลอยที่ถูกโอนไปยัง MSแรกเริ่ม เกลือ อาหารสูตร MS ที่เสริมด้วย 2 , 4-D 0.5 mg ด้วย liter-1 และ800 เมตร osmoticum ( ผล M และ M mannitol ผลซอร์บิทอล ) 2ชั่วโมงก่อนเขาโจมตี bombardments อนุภาค ; อื่น ๆการ osmoticum ถูกละเว้น . โจมตีต่อไป ,เซลล์แขวนลอยที่ได้เพาะเลี้ยงเป็นเวลาหนึ่งสัปดาห์ในก้อน MSแรกเริ่มเติมเกลือ 0.5 mg ด้วย 2.4-d – 1 ลิตรและมีหรือไม่มี ostmoticum 0.125 เมตรเพื่อให้เซลล์ t oการกู้คืนจากการทิ้งระเบิด เซลล์เหล่านี้ถูกโอนให้กับโรงเกลือ 0.5 MS MS แรกเริ่มมิลลิกรัมต่อลิตรที่เติม 2 , 4-D ด้วย– 1 และ 1 หรือ 6 มิลลิกรัมต่อลิตร ) ด้วย 1 ppt หรือไบลาฟอส .หลังจากอย่างน้อยสอง subcultures บนก้อน MS แรกเริ่ม เกลืออาหารสูตร MS ที่เสริมด้วย 2 หรือ 6 มิลลิกรัมต่อลิตร ) ด้วย 1 ไบลาฟอสหรือ ppt ,เซลล์ คือ เซลล์ MSกับทั้ง 0 , 0.5 , และ 3 มิลลิกรัมต่อลิตร ) ด้วย 1 ไบลาฟอส . อีกวิธีหนึ่งคือบางส่วนของการระดมยิงเซลล์เพาะเลี้ยง 2 สัปดาห์ในเกลือเหลว MS แรกเริ่มเติม 0.5 mg ด้วย ( 2 , 4 - 1 ลิตรD และ 0.1 มก. ด้วยลิตร– 1 ไบลาฟอสทันทีหลังจากทิ้งระเบิดเซลล์เหล่านี้ถูกโอนไปยังก้อน MS แรกเริ่ม
การแปล กรุณารอสักครู่..
