2.1. Purification and haemagglutina

2.1. Purification and haemagglutinating activity of ConM
Seeds from C. maritima were ground to a fine powder in a coffee mill and the soluble proteins were extracted at 298 K by continuous stirring with 0.15 M NaCl [1:10 (w:v)] for 4 h, followed by centrifugation at 10,000  g at 277 K for 20 min. Protein purification was carried by the affinity chromatography protocol previous described by Ramos and co-workers [47] using Sephadex G-50 column (10  50 cm). The ConM was complexed with IAA in presence of light for 30 min at 310 K and haemagglutinating activity (HA) was done to confirming that indole binding does not alter the carbohydrate recognition. HA was determined in plates by double serial dilutions. Each well received 25 mL 0.1 M TriseHCl buffer pH 7.6 containing 0.15 M NaCl and 5 mM CaCl2 and 5 mM MgCl2. A 100 mL
aliquot of supernatant was added to the first well of the column.
Subsequently, 200 mL suspension of 2% rabbit erythrocytes suspension
containing 0.15 M NaCl was added to each well. HA was
measured after 30 min of incubation at 310 K and 30 min of incubation
at room temperature.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.1 การทำให้บริสุทธิ์และกิจกรรม haemagglutinating ของ ConM
เมล็ดจากซีมาริติมาบดให้เป็นผงละเอียดในโรงงานกาแฟและโปรตีนที่ละลายน้ำได้ถูกสกัดที่ 298 K กวนอย่างต่อเนื่องโดยมีโซเดียมคลอไรด์ 0.15 M [1:10 (w: V)] 4 ชั่วโมง ตามด้วยการหมุนเหวี่ยงที่ 10,000? กรัมที่ 277 K สำหรับ 20 นาที โปรตีนบริสุทธิ์ได้ดำเนินการโดยโคโปรโตคอลความสัมพันธ์ก่อนหน้านี้อธิบายโดยรามอสและเพื่อนร่วมงาน [47] โดยใช้ Sephadex G-50 คอลัมน์ (10? 50 เซนติเมตร) ConM ถูก complexed กับ IAA ในการปรากฏตัวของแสงเป็นเวลา 30 นาทีที่ 310 K และกิจกรรม haemagglutinating (HA) คือทำเพื่อยืนยันว่าอินโดผูกพันไม่เปลี่ยนแปลงการรับรู้คาร์โบไฮเดรต HA ถูกกำหนดในแผ่นโดยเจือจางอนุกรมคู่ แต่ละคนได้รับอย่างดี 25 มิลลิลิตร 0.1 M TriseHCl บัฟเฟอร์ pH 7.6 ที่มีโซเดียมคลอไรด์ 0.15 M และ 5 มิลลิ CaCl2 และ 5 มิลลิ MgCl2 100 มิลลิลิตร
aliquot ของสารละลายถูกบันทึกอยู่ในดีครั้งแรกของคอลัมน์.
ต่อ 200 มิลลิลิตรระงับการกระต่าย 2%
ระงับเม็ดเลือดแดงที่มีโซเดียมคลอไรด์0.15 M ถูกบันทึกอยู่ในแต่ละดี HA
ถูกวัดหลังจาก30 นาทีของการบ่มที่ 310 K และ 30
นาทีของการบ่มที่อุณหภูมิห้อง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.1 . การทำให้บริสุทธิ์และ haemagglutinating กิจกรรมของ conm
เมล็ดจาก maritima ถูกพื้นเพื่อผงละเอียดในเครื่องบดกาแฟ และโปรตีนที่สกัดที่อุณหภูมิ 298 เคลวินโดยต่อเนื่อง เร้าใจกับ 0.15 M NaCl [ 1 : 10 ( w : V ) ] 4 H , ตามด้วยการเหวี่ยงแยกที่ 10 , 000  G ที่ 277 เคลวิน 20 นาทีบริสุทธิ์โปรตีนถูกอุ้มโดยขี้รังแคโพรโทคอลก่อนหน้าอธิบาย โดย รามอส และเพื่อนร่วมงาน [ 47 ] โดยใช้ Sephadex G-50 คอลัมน์ ( 10  50 เซนติเมตร ) การ conm คือ complexed กับ IAA ในการแสดงตนของแสงสำหรับ 30 นาทีที่ 310 K และ haemagglutinating กิจกรรม ( ฮา ) ได้ยืนยันว่า นโดลผูกไม่ได้ปรับเปลี่ยนคาร์โบไฮเดรต การรับรู้ฮาตั้งใจในแผ่นโดยวิธีการอนุกรมคู่ แต่ละอย่างดี 25 ml 0.1 M trisehcl บัฟเฟอร์ pH 7.6 ที่มี 0.15 M NaCl และ 5 มม. ผลิตไอโซโทป 5 มิล 100 มล.
ส่วนลงตัวของน่านคือเพิ่มแรกของคอลัมน์
ต่อมา 200 ml ระงับ 2 % เม็ดเลือดแดงกระต่ายช่วงล่าง
ที่มี 0.15 M NaCl ที่ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละครั้งได้อีกด้วย ฮา
วัดหลังจาก 30 นาทีของการบ่มที่ 310 k และ 30 นาทีของการบ่ม
อุณหภูมิห้อง