A total of 512 pairs of SSR primers

A total of 512 pairs of SSR primers evenly distributed
on 12 chromosomes were used to screen polymorphism
between the mutant flo7 and Nanjing 11. The seeds
obtained from F1 plants of flo7 × Nanjing 11 combination
with floury endosperm (equivalent of F2 recessive
separated plants) were selected, and then germinated,
further DNAs of the seedling leaves were extracted for
gene mapping of Flo7. Firstly, 46 floury endosperm
separated plants were selected to linkage analysis of
mutation gene Flo7, which was aimed to preliminary
mapping target gene. Thereafter, 11 polymorphic SSR
and InDel markers (Table 1) located in the critical
genomic region were identified, and these, along with
the most closely linked SSRs identified in the primary
screen, were used to genotype a population of 1 720
F2 seedlings to obtain a localized fine-scale genetic
map. Each 10 μL PCR contained 1 μL of template DNA,
1 μL of 10 × PCR buffer, 0.1 μL of dNTPs (10 μmol/L),
1 μL of primers (10 μmol/L) and 0.1 U Taq DNA
polymerase. The amplification protocol comprised an
initial denaturation (95 °C for 3 min), followed by 35
cycles of 95 °C for 30 s, 55 °C for 30 s and 72 °C for

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

รวมเป็น 512 คู่ไพรเมอร์ SSR
กระจายเมื่อวันที่12
โครโมโซมถูกนำมาใช้หลายรูปแบบหน้าจอระหว่างflo7 กลายพันธุ์และหนานจิง 11.
เมล็ดที่ได้จากพืชF1 ของ flo7 หนานจิง× 11
รวมกันกับfloury endosperm (เทียบเท่า F2
ด้อยแยกพืช) เป็น เลือกและงอกแล้ว
DNAs
ต่อไปของใบต้นกล้ามาสกัดทำแผนที่ยีนFlo7 ประการแรก 46 floury endosperm
แยกพืชได้รับการคัดเลือกการวิเคราะห์ความเชื่อมโยงของยีนกลายพันธุ์ Flo7 ซึ่งมีวัตถุประสงค์เพื่อเบื้องต้นยีนเป้าหมายการทำแผนที่ หลังจากนั้น 11 polymorphic SSR และเครื่องหมาย Indel (ตารางที่ 1) ที่ตั้งอยู่ในที่สำคัญในภูมิภาคจีโนมที่ถูกระบุและเหล่านี้พร้อมกับSSRs ส่วนใหญ่ที่เชื่อมโยงอย่างใกล้ชิดที่ระบุไว้ในหลักหน้าจอถูกนำมาใช้ในการตรวจหาสายพันธุ์ของประชากร1 720 ต้นกล้า F2 ที่จะได้รับ ภาษาท้องถิ่นขนาดปรับพันธุกรรมแผนที่ แต่ละ 10 ไมโครลิตร PCR ที่มีอยู่ 1 ไมโครลิตรดีเอ็นเอแม่แบบ1 ไมโครลิตร 10 ×บัฟเฟอร์ PCR 0.1 ไมโครลิตรของ dNTPs (10 ไมโครโมล / ลิตร), 1 ไมโครลิตรของไพรเมอร์ (10 ไมโครโมล / ลิตร) และ 0.1 U Taq ดีเอ็นเอโพลิเมอร์ โปรโตคอลการขยายประกอบด้วยdenaturation ครั้งแรก (95 ° C เป็นเวลา 3 นาที) ตามด้วย 35 รอบของ 95 ° C เป็นเวลา 30 วินาที, 55 ° C เป็นเวลา 30 วินาทีและ 72 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ทั้งหมด 512 คู่ไพรเมอร์ที่ได้รับกระจาย
12 โครโมโซมถูกใช้กับหน้าจอ -
ระหว่าง flo7 กลายพันธุ์และ Nanjing 11 เมล็ดที่ได้จากพืช flo7 F1

11 ×หนานจิงรวมกันกับ floury เอนโดสเปิร์ม ( เทียบเท่า F2 ลักษณะด้อย
แยกพืช ) ถูกเลือกและจากนั้นการงอกของต้นกล้า , เพิ่มเติมแถบ

ใบที่ยีนแผนที่ flo7 .ประการแรก 46 floury endosperm แยกพืชไว้

flo7 การวิเคราะห์เชื่อมโยงของการกลายพันธุ์ยีน ซึ่งมีวัตถุประสงค์เพื่อเป้าหมายเบื้องต้น
การทำแผนที่ยีน หลังจากนั้น 11 จำนวนและเครื่องหมาย SSR
INDEL ( ตารางที่ 1 ) ตั้งอยู่ในภูมิภาคที่มีวิกฤต
ถูกระบุและเหล่านี้พร้อมกับ
ที่สุดเชื่อมโยงอย่างใกล้ชิด ssrs ระบุในหน้าจอหลัก
,ใช้กับประชากร 1 720
F2 ต้นกล้าได้รับถิ่นดีระดับพันธุกรรม
แผนที่ แต่ละ 10 μผม PCR ที่มีอยู่ 1 μ L ของดีเอ็นเอแม่แบบ ,
1 μชั้น 10 เฟอร์μ PCR × 0.1 ลิตร dntps ( 10 μ mol / L )
1 μ L ของไพรเมอร์ ( 10 μ mol / L ) และ 0.1 U
แทคดีเอ็นเอพอลิเมอเรส . การเพิ่มปริมาณระเบียบประกอบด้วยการเริ่มต้น ( 95 องศา C
( 3 นาที ) แล้วตามด้วย 3
รอบ 95 องศา C เป็นเวลา 30 วินาที55 ° C เป็นเวลา 30 วินาทีและ 72 ° C