Then, the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา isolated as above were named ยูกลีนา gracilis strain EOD-1.
[0077]
Culture of ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา
10 In order to culture the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา, the following
materials were prepared and were subjected to a culture step under the following culture conditions.
ไมโครแอลจี strains of the จีนัส ยูกลีนา of the การประดิษฐ์นี้:
ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา (ยูกลีนา gracilis) strain EOD-1 (Accession 15 No.: FERM BP-11530) (deposited at the Patent Organism Depositary at the
National Institute of Technology and Evaluation)
Known ไมโครแอลจี strains of the จีนัส ยูกลีนา: ไมโครแอลจี of the
จีนัส ยูกลีนา (ยูกลีนา gracilis) strain NIES-48 (obtained from the Microbial Culture Collection at the National Institute for Environmental Studies)
20 Culture container: as described below, such as a 300-to-500 mL flask
Gas supply to บรอธ: shaking at 130 rpm; air is supplied into the บรอธ by shaking the บรอธ.
Culture temperature: 28°C
Culture period: as described below
25 pH of บรอธ: as described below
Components in บรอธ for culture: The compositions shown in Table 2 and Table 3 were employed as basic compositions.
The composition shown in Table 2 was obtained by adding components
of the composition of "P IV metals" อาหารเพาะเลี้ยง (disclosed by the Microbial 30 Culture Collection at the National Institute for Environmental Studies) to the
composition of "อาหารเพาะเลี้ยง AF-6 " disclosed by the Microbial Culture
22
Collection at the National Institute for Environmental Studies. Further, the component other than nutrients contained in the บรอธ was water.
Further, the composition shown in Table 3 was based on the
composition of Cramer-Myers อาหารเพาะเลี้ยง.
5 [0078]
Table 2
Composition based on อาหารเพาะเลี้ยง AF-6
Initial weight of ไมโครแอลจี before culture: 0.78 g/L (dry weight)
Organic nutrients: the following materials were appropriately changed depending on culture.
• Glucose
• Yeast extract (yeast autoไลเซต): "Dried Yeast Extract D-3" (product name),
10 manufactured by NIHON PHARMACEUTICAL CO., LTD.
Beer as a brewed beverage: Commercially available beer (with a malt use rate of 66.7% or more) containing 5 vol% of ethanol
In Examples 1 to 4 and Comparative Examples 1 to 4, เฮเทอโรโทรฟic
culture was performed under dark conditions, and photoเฮเทอโรโทรฟic culture 15 was performed in the other examples and comparative examples. The culture
conditions in the photoเฮเทอโรโทรฟic culture of ไมโครแอลจี are shown in detail
below.
Photoirradiation conditions: after photoirradiation for 12 hours, placed in the dark for 12 hours
20 Light intensity: photosynthetic photon flux density (PPFD) of about 100
24
pinol/m2•s or about 200 iimol/m2•s [0081]
Example 1
200 mL of the composition shown in Table 2 was put into a 500-mL
5 Sakaguchi flask. Further, glucose and yeast extract were added thereto at a
glucose concentration of 15 g/L and a yeast extract concentration of 5 g/L.
Further, the pH was adjusted to 4.0 by addition of hydrochloric acid. Thus, a บรอธ was prepared.
Then, the flask was shaken under the aforementioned culture
10 conditions and dark conditions (that is, under เฮเทอโรโทรฟic culture conditions),
and ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา (ยูกลีนา gracilis) strain EOD-1 were cultured for 3 days. The culture step was thus performed.
[0082]
Examples 2 to 4
15 The culture step was performed in the same manner as in Example 1,
except that the amount of glucose was changed so that the glucose
concentration in the บรอธ was 20 g/L, 25 g/L, and 30 g/L, respectively. [0083]
Comparative Example 1
20 The culture step was performed in the same manner as in Example 1,
except that ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา (ยูกลีนา gracilis) strain NIES-48 were cultured for 5 days instead of the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา
(ยูกลีนา gracilis) strain EOD-1.
[0084]
25 Comparative Examples 2 to 4
The culture step was performed in the same manner as in Comparative Example 1, except that the amount of glucose was changed so that the glucose concentration in the บรอธ was 20 g/L, 25 g/L, and 30 g/L, respectively.
[0085]
30 The dry weight of the ไมโครแอลจี after the culture step in each of the
examples and the comparative examples was measured. Further, the
25
conversion rate of added nutrients was determined by the following calculation formula.
Conversion rate (%) = Dry weight (g/L) of algae increased by culture/Concentration (g/L) of consumed glucose
5 [0086]
รูป 4 shows the results of the conversion rate and the dry weight of the algae after the culture in each of the examples and the comparative examples
As seen from รูป 4, the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา (ยูกลีนา
gracilis) strain EOD-1 have a higher biomass production than the known strain
10 NIES-48.
[0087]
Example 5
The culture step was performed by culturing the ไมโครแอลจี of the
จีนัส ยูกลีนา (ยูกลีนา gracilis) strain EOD-1 in the same manner as in
15 Example 1, except that a 300-m1 Erlenmeyer flask was used, a บรอธ obtained
by adding beer to 50 mL of the composition shown in Table 2 at a concentration
of ethanol derived from beer of 2.5 vol% was used, the yeast extract was not
added to the บรอธ, photoirradiation environment for 12 hours and dark
environment for 12 hours were repeated during the culture, and the culture 20 period was 7 days. The photosynthetic photon flux density (PPFD) was set to
about 100 limol/m2•s.
[0088]
Example 6
The culture step was performed in the same manner as in Example 5, 25 except that the yeast extract was added to the บรอธ at a concentration of the
yeast extract of 2 g/L.
[0089]
Comparative Example 5
The culture step was performed in the same manner as in Example 5, 30 except that ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา strain NIES-48 were cultured
instead of the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา (ยูกลีนา gracilis) strain EOD-1.
26
Comparative Example 6
The culture step was performed in the same manner as in Comparative Example 5, except that the yeast extract was added to the บรอธ at a
concentration of the yeast extract of 2 g/L.
5 [0090]
In the culture step of each of Examples 5 and 6, and Comparative
Examples 5 and 6, the dry weight of ไมโครแอลจี after the culture for 1, 2, 3, 4, 5, and 7 days was measured. รูป 5 shows the results.
As seen from รูป 5, the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา (ยูกลีนา
10 gracilis) strain EOD-1 have higher productivity than the known strain NIES-48,
even when they were cultured under photoเฮเทอโรโทรฟic culture conditions. [0091]
Examples 7 to 12
The culture step was performed in the same manner as in Example 5, 15 except that the composition shown in Table 3 was used instead of the
composition shown in Table 2, the initial pH of the บรอธ was changed to pH 5.5,
pH 6.0, pH 7.0, pH 8.0, pH 8.5, and pH 9.0, respectively, and the culture period
was changed to 10 days.
[0092]
20 In the culture step of each of Examples 7 to 12, the dry weight of the
ไมโครแอลจี after the culture was measured over time. รูป 6 shows the results.
[0093]
Examples 13 to 17
25 The culture step was performed in the same manner as in Example 5,
except that the composition shown in Table 3 was used instead of the
composition shown in Table 2, the photosynthetic photon flux density (PPFD) was set to about 200 panol/m2•s, the initial pH of the บรอธ was changed to pH
3.5, pH 4.0, pH 4.5, pH 5.0, and pH 5.5, respectively, and the culture period was
30 changed to 10 days.
[0094]
27
Examples 18 and 19
The culture step was performed in the same manner as in Example 5,
except that the composition shown in Table 3 was used instead of the
composition shown in Table 2, the initial pH of the บรอธ was changed to pH 3.5 5 and pH 5.5, respectively, and the culture period was changed to 10 days.
[0095]
In the culture step of each of Examples 13 to 19, the dry weight of the ไมโครแอลจี after the culture was measured over time. รูป 7 shows the
results.
10 [0096]
Example 20
The culture step was performed by culturing the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา (ยูกลีนา gracilis) strain EOD-1 in the same manner as in Example 5, except that the culture period was 7 days.
15 The culture was performed under aerobic conditions by shaking the
flask until two days after the culture start. Thereafter, the shaking was stopped, and the culture was performed under anaerobic conditions by supplying an inert gas (nitrogen gas).
[0097]
20 Comparative Example 7
The culture step was performed in the same manner as in Example 20, except that ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา (ยูกลีนา gracilis) strain NIES-48 were cultured instead of the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา (ยูกลีนา gracilis) strain EOD-1.
25 The culture was performed under aerobic conditions by shaking the
flask until 4 days after the culture start. Thereafter, the shaking was stopped, and the culture was performed under anaerobic conditions by supplying an
inert gas (nitrogen gas).
แล้ว ไมโครแอลจีของยูกลีนาจีนัสที่แยกต่างหากดังกล่าวมีชื่อว่ายูกลีนาต้องใช้จระเข้ EOD-1[0077]วัฒนธรรมของไมโครแอลจีจีนัสยูกลีนา10 เพื่อวัฒนธรรมไมโครแอลจีของยูกลีนาจีนัส ต่อไปนี้วัสดุเตรียมไว้ และขั้นตอนภายใต้สภาพวัฒนธรรมวัฒนธรรมถูกต้องสายพันธุ์ไมโครแอลจีของยูกลีนาจีนัสของการประดิษฐ์นี้:ไมโครแอลจียูกลีนาจีนัส (ยูกลีนาจระเข้) สายพันธุ์ EOD-1 (หมายเลขทะเบียน 15: FERM BP 11530) (ฝากที่ Depositary มีชีวิตสิทธิบัตรในการ ประเมินและสถาบันเทคโนโลยีแห่งชาติ)เรียกว่าสายพันธุ์ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนา: ไมโครแอลจีของการจีนัสยูกลีนา (ยูกลีนาจระเข้) สายพันธุ์ NIES-48 (ได้จากการรวบรวมวัฒนธรรมจุลินทรีย์แห่งชาติสถาบันสิ่งแวดล้อมศึกษา)ภาชนะวัฒนธรรม 20: ตามที่อธิบายไว้ด้านล่าง เช่นมี 300 500 mL หนาวแก๊สถึงบรอธ: สั่นที่ 130 rpm อากาศมาลงบรอธ โดยการสั่นบรอธวัฒนธรรมอุณหภูมิ: 28° Cวัฒนธรรมระยะเวลา: ตามที่อธิบายไว้ด้านล่าง25 pH บรอธ: ตามที่อธิบายไว้ด้านล่างในบรอธสำหรับวัฒนธรรม: องค์ที่แสดงในตาราง 2 และตาราง 3 ถูกจ้างเป็นพื้นฐานเท่านั้นองค์ประกอบที่แสดงในตารางที่ 2 ได้รับ โดยการเพิ่มส่วนประกอบ ขององค์ประกอบของ "P IV โลหะ" อาหารเพาะเลี้ยง (เปิดเผย โดยรวบรวมวัฒนธรรม 30 จุลินทรีย์แห่งชาติสถาบันสิ่งแวดล้อมศึกษา) เพื่อการ องค์ประกอบของ "อาหารเพาะเลี้ยง AF 6 " เปิดเผย โดยวัฒนธรรมจุลินทรีย์ 22ชุดที่ สถาบันการศึกษาด้านสิ่งแวดล้อม เพิ่มเติม ส่วนประกอบนอกเหนือจากสารอาหารที่อยู่ในบรอธมีน้ำ เพิ่มเติม องค์ประกอบที่แสดงในตารางที่ 3 เป็นไปตาม องค์ประกอบของไมเยอร์ Cramer อาหารเพาะเลี้ยง5 [0078]ตารางที่ 2องค์ประกอบตามอาหารเพาะเลี้ยง AF 6 เริ่มต้นน้ำหนักของไมโครแอลจีก่อนวัฒนธรรม: L 0.78 กรัม (น้ำหนักแห้ง)สารอาหารอินทรีย์: วัสดุต่อไปนี้มีการเปลี่ยนแปลงให้เหมาะสมตามวัฒนธรรม•น้ำตาลกลูโคส•ยีสต์สกัด (ยีสต์ autoไลเซต): "แห้งยีสต์สกัด D-3 " (ชื่อสินค้า),10 ผลิต โดยนิยา CO., ltdเบียร์เป็นเครื่องดื่มสตรอเบอรี่: เบียร์ใช้ได้ในเชิงพาณิชย์ (กับอัตราใช้มอลต์ 66.7% หรือมากกว่า) ที่มี 5 vol %ของเอทานอลในตัวอย่าง 1 ถึง 4 และเปรียบเทียบตัวอย่าง 1 ถึง 4, เฮเทอโรโทรฟic วัฒนธรรมมีดำเนินการภายใต้เงื่อนไขที่มืด และงานวัฒนธรรม photoเฮเทอโรโทรฟic 15 ในตัวอย่างและเปรียบเทียบตัวอย่างอื่น ๆ วัฒนธรรม แสดงรายละเอียดเงื่อนไขใน photoเฮเทอโรโทรฟic ของไมโครแอลจี ด้านล่างนี้Photoirradiation เงื่อนไข: หลังจาก photoirradiation 12 ชั่วโมง อยู่ในมืด 12 ชั่วโมงความเข้มแสง 20: โฟตอน photosynthetic ไหลความหนาแน่น (PPFD) ประมาณ 100 24pinol/m2•s หรือ 200 iimol m2•s [0081]ตัวอย่างที่ 1200 mL ขององค์ประกอบที่แสดงในตารางที่ 2 ถูกเก็บไว้ในตัว 500 mL5 Sakaguchi หนาว เพิ่มเติม สารสกัดจากยีสต์และน้ำตาลกลูโคสเพิ่มจุดในการความเข้มข้นกลูโคส 15 g/L และยีสต์เป็นสารสกัดเข้มข้น 5 g/lเพิ่มเติม pH ถูกปรับไป 4.0 โดยเพิ่มกรดไฮโดรคลอริก ดังนั้น บรอธถูกเตรียมไว้แล้ว หนาวถูกเขย่าภายใต้วัฒนธรรมดังกล่าว10 เงื่อนไขและมืด (นั่นคือ ภายใต้เงื่อนไขวัฒนธรรม เฮเทอโรโทรฟic),และไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนา (ยูกลีนาจระเข้) พันธุ์ EOD-1 มีอ่างสำหรับ 3 วัน ขั้นวัฒนธรรมที่ดำเนินการดังนั้น [0082]ตัวอย่าง 2-415 วัฒนธรรมขั้นตอนมีดำเนินการในลักษณะเดียวกันเช่นในตัวอย่าง 1ยกเว้นว่ามีการเปลี่ยนแปลงจำนวนกลูโคสเพื่อให้น้ำตาลกลูโคสความเข้มข้นในบรอธเป็น 20 g/L, 25 g/L และ 30 g/L ตามลำดับ [0083]ตัวอย่างเปรียบเทียบ 120 วัฒนธรรมขั้นตอนมีดำเนินการในลักษณะเดียวกันเช่นในตัวอย่าง 1ยกเว้นว่าสายพันธุ์ไมโครแอลจียูกลีนาจีนัส (ยูกลีนาจระเข้) NIES 48 มีอ่างสำหรับ 5 วันแทนที่จะไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนา (ยูกลีนาจระเข้) สายพันธุ์ EOD-1[0084]ตัวอย่างเปรียบเทียบ 25 2-4ขั้นวัฒนธรรมที่ดำเนินการในลักษณะเดียวกันในการเปรียบเทียบตัวอย่าง 1 ยกเว้นว่าจำนวนกลูโคสถูกเปลี่ยนแปลงเพื่อให้ความเข้มข้นของกลูโคสในบรอธ มี 20 g/L, 25 g/L, 30 g/L ตามลำดับ [0085]30 ขั้นตอนที่น้ำหนักแห้งของไมโครแอลจีหลังจากวัฒนธรรมในแต่ละตัวอย่างและตัวอย่างเปรียบเทียบที่วัด เพิ่มเติม การ 25อัตราการเพิ่มสารอาหารที่ถูกกำหนด โดยสูตรการคำนวณดังต่อไปนี้แปลงอัตรา (%) = (g/L) น้ำหนักแห้งของสาหร่ายวัฒนธรรม/ความเข้มข้น (g/L) ใช้น้ำตาลกลูโคสเพิ่มขึ้น5 [0086]รูปที่ 4 แสดงผลของอัตราแลกเปลี่ยนและน้ำหนักแห้งของสาหร่ายหลังจากวัฒนธรรมในแต่ละตัวอย่างและตัวอย่างเปรียบเทียบ เห็นจากรูป 4 ไมโครแอลจีของยูกลีนาจีนัส (ยูกลีนา ต้องใช้จระเข้) EOD-1 มีการผลิตชีวมวลสูงกว่าสายพันธุ์ที่รู้จักกันNIES 10-48[0087]ตัวอย่างที่ 5ขั้นวัฒนธรรมที่ดำเนินการ โดย culturing ไมโครแอลจีของการจีนัสยูกลีนา (ยูกลีนาจระเข้) EOD-1 สายพันธุ์ในลักษณะเดียวกันในตัวอย่าง 15 1 ยกเว้นที่ใช้เป็น 300-m1 Erlenmeyer หนาว บรอธที่ได้รับโดยการเพิ่มเบียร์ขององค์ประกอบที่แสดงในตารางที่ 2 ที่มีความเข้มข้น 50 มล ของเอทานอลมาจากเบียร์ 2.5 ใช้ vol % สารสกัดจากยีสต์ไม่ เพิ่มบรอธ สิ่งแวดล้อม photoirradiation 12 ชั่วโมง และมืด สิ่งแวดล้อม 12 ชั่วโมงถูกซ้ำระหว่างวัฒนธรรม และวัฒนธรรมระยะเวลา 20 วันนั้น ความหนาแน่นฟลักซ์ photosynthetic โฟตอน (PPFD) ถูกตั้งค่าให้ limol 100/m2•s[0088]ตัวอย่างที่ 6ขั้นวัฒนธรรมถูกดำเนินการในลักษณะเดียวกันเช่นในตัวอย่าง 5, 25 แต่สารสกัดจากยีสต์ถูกเพิ่มบรอธที่ความเข้มข้นของการ สารสกัดจากยีสต์ของ 2 g/l[0089]ตัวอย่างเปรียบเทียบ 5ขั้นวัฒนธรรมมีดำเนินการในลักษณะเดียวกันเช่นในตัวอย่าง 5, 30 แต่ไมโครแอลจีของสายพันธุ์ยูกลีนาจีนัส NIES 48 มีอ่าง แทนที่จะไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนา (ยูกลีนาจระเข้) พันธุ์ EOD-1 26ตัวอย่างเปรียบเทียบ 6ขั้นวัฒนธรรมทำในลักษณะเดียวกันในการเปรียบเทียบตัวอย่าง 5 สารสกัดจากยีสต์ที่เพิ่มบรอธที่ว่าการ ความเข้มข้นของยีสต์แยกของ 2 g/l5 [0090]ในขั้นตอนของวัฒนธรรมของแต่ละตัวอย่าง 5 และ 6 และเปรียบเทียบตัวอย่างที่ 5 และ 6 แห้งน้ำหนักของไมโครแอลจีหลังจากวัฒนธรรม 1, 2, 3, 4, 5, 7 วันที่วัด รูปที่ 5 แสดงผลเห็นจากรูป 5 ไมโครแอลจีของยูกลีนาจีนัส (ยูกลีนาEOD-1 สายพันธุ์จระเข้ 10) มีผลผลิตสูงกว่าพันธุ์รู้จัก NIES-48แม้เมื่อพวกเขาอ่าง photoเฮเทอโรโทรฟic วัฒนธรรมสภาวะ [0091]ตัวอย่าง 7-12ขั้นวัฒนธรรมมีดำเนินการในลักษณะเดียวกันเช่นในตัวอย่าง 5, 15 ยกเว้นว่าองค์ประกอบที่แสดงในตารางที่ 3 ใช้แทน องค์ประกอบที่แสดงในตารางที่ 2, pH เริ่มต้นของบรอธถูกเปลี่ยน pH 5.5 pH 6.0, pH 7.0, pH 8.0, pH 8.5 และ pH 9.0 ตามลำดับ และวัฒนธรรมระยะเวลา เปลี่ยนเป็น 10 วัน[0092]20 ในขั้นตอนของวัฒนธรรมของแต่ละตัวอย่าง 7-12 น้ำหนักแห้งของใบไมโครแอลจีหลังจากวัฒนธรรมที่วัดช่วงเวลา รูป 6 แสดงผลลัพธ์[0093]ตัวอย่าง 13-1725 วัฒนธรรมขั้นตอนมีดำเนินการในลักษณะเดียวกันเช่นในตัวอย่าง 5ยกเว้นว่าองค์ประกอบที่แสดงในตารางที่ 3 ถูกใช้แทนองค์ประกอบที่แสดงในตารางที่ 2 ความหนาแน่นฟลักซ์ photosynthetic โฟตอน (PPFD) ถูกตั้งค่าให้ 200 panol m2•s, pH เริ่มต้นของบรอธถูกเปลี่ยน pH3.5, pH 4.0, pH 4.5, pH 5.0 และ pH 5.5 ตามลำดับ และวัฒนธรรมระยะเวลาเป็น30 เปลี่ยนเป็น 10 วัน[0094] 27ตัวอย่างที่ 18 และ 19ขั้นวัฒนธรรมที่ดำเนินการในลักษณะเดียวกันเช่นในตัวอย่าง 5 ยกเว้นว่าองค์ประกอบที่แสดงในตารางที่ 3 ถูกใช้แทน องค์ประกอบที่แสดงในตารางที่ 2, pH เริ่มต้นของบรอธมีการเปลี่ยนแปลง pH 3.5 5 และ pH 5.5 ตามลำดับ และวัฒนธรรมระยะเวลาเปลี่ยนเป็น 10 วัน [0095]ในวัฒนธรรมขั้นตอนของแต่ละตัวอย่าง 13 กับ 19 น้ำหนักแห้งของไมโครแอลจีหลังจากวัฒนธรรมที่วัดช่วงเวลา รูปที่ 7 แสดงการ ผลลัพธ์ที่10 [0096]ตัวอย่าง 20ขั้นวัฒนธรรมที่ดำเนินการ โดย culturing ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนา (ยูกลีนาจระเข้) สายพันธุ์ EOD 1 ในลักษณะเดียวกันใน 5 อย่าง ยกเว้นว่าวัฒนธรรมรอบระยะเวลา 7 วัน15 วัฒนธรรมมีดำเนินการภายใต้เงื่อนไขแอโรบิก โดยการสั่นหนาวจนสองวันหลังจากเริ่มต้นวัฒนธรรม หลังจากนั้น สั่นหยุด และวัฒนธรรมมีดำเนินการภายใต้เงื่อนไขที่ไม่ใช้ออกซิเจน โดยขายเป็นก๊าซเฉื่อย (ก๊าซไนโตรเจน)[0097]ตัวอย่างเปรียบเทียบ 20 7ขั้นวัฒนธรรมที่ดำเนินการในลักษณะเดียวกันเช่นในตัวอย่าง 20 ยกเว้นว่า EOD-1 สายพันธุ์ไมโครแอลจีพันธุ์จีนัสยูกลีนา (ยูกลีนาจระเข้) ที่ NIES 48 มีอ่างแทนไมโครแอลจีของยูกลีนาจีนัส (ยูกลีนาจระเข้)25 วัฒนธรรมที่ทำภายใต้เงื่อนไขแอโรบิก โดยการสั่นหนาวจนถึง 4 วันหลังจากเริ่มต้นวัฒนธรรม หลังจากนั้น สั่นหยุด และวัฒนธรรมมีดำเนินการภายใต้เงื่อนไขที่ไม่ใช้ออกซิเจน โดยการจัดหาการ ก๊าซเฉื่อย (ก๊าซไนโตรเจน)
การแปล กรุณารอสักครู่..

จากนั้นไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาที่แยกดังกล่าวถูกตั้งชื่อยูกลีนา gracilis ความเครียด EOD-1.
[0077]
วัฒนธรรมของไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนา
10 เพื่อวัฒนธรรมไมโครแอ
ลจีของจีนัสยูกลีนาต่อไปนี้วัสดุที่ได้รับการเตรียมความพร้อมและถูกยัดเยียดให้ขั้นตอนวัฒนธรรมภายใต้เงื่อนไขวัฒนธรรมต่อไป.
ไมโครแอลจีสายพันธุ์ของจีนัสยูกลีนาของการประดิษฐ์นี้:
ไมโครแอลจีของ จีนัสยูกลีนา (ยูกลีนา gracilis) สายพันธุ์ EOD-1 (ภาคยานุวัติ 15 No .: FERM BP-11530)
(ฝากไว้ที่ศูนย์รับฝากออสิทธิบัตรที่สถาบันเทคโนโลยีแห่งชาติและการประเมินผล)
หรือเป็นที่รู้จักไมโครแอลจีสายพันธุ์ของจีนัส ยูกลีนา:
ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนา(ยูกลีนา gracilis) สายพันธุ์ NIES-48 (ที่ได้รับจากการสะสมวัฒนธรรมจุลินทรีย์ที่สถาบันแห่งชาติเพื่อการศึกษาด้านสิ่งแวดล้อม)
20 ภาชนะวัฒนธรรม: ตามที่อธิบายไว้ด้านล่างเช่น 300 ต่อ 500
มิลลิลิตรขวดก๊าซให้กับบรอธ : เขย่าที่ 130 รอบต่อนาที; อากาศจะถูกส่งเข้ามาในบรอ ธ โดยเขย่าบรอ ธ .
อุณหภูมิวัฒนธรรม: 28 ° C
ระยะเวลาที่วัฒนธรรม: ตามที่อธิบายไว้ด้านล่าง
25 พีเอชของบรอ ธ :
ตามที่อธิบายไว้ด้านล่างส่วนประกอบในบรอธ วัฒนธรรม: องค์ประกอบที่แสดงในตาราง ที่ 2 และตารางที่ 3 ได้รับการว่าจ้างให้เป็นองค์ประกอบพื้นฐาน.
องค์ประกอบที่แสดงในตารางที่ 2
ที่ได้รับโดยการเพิ่มองค์ประกอบขององค์ประกอบของ"โลหะ P IV ที่" อาหารเพาะเลี้ยง (เปิดเผยโดยจุลินทรีย์ที่ 30 เก็บวัฒนธรรมที่สถาบันแห่งชาติเพื่อการศึกษาด้านสิ่งแวดล้อม) เพื่อ
องค์ประกอบของ "อาหารเพาะเลี้ยง AF-6" เปิดเผยโดยวัฒนธรรมจุลินทรีย์22 เก็บที่สถาบันแห่งชาติเพื่อการศึกษาด้านสิ่งแวดล้อม นอกจากนี้ส่วนประกอบอื่น ๆ นอกเหนือจากสารอาหารที่มีอยู่ในบรอ ธ ถูกน้ำ. นอกจากนี้องค์ประกอบที่แสดงในตารางที่ 3 ขึ้นอยู่กับองค์ประกอบของแครมเมอ-Myers อาหารเพาะเลี้ยง. 5 [0078] ตารางที่ 2 ประกอบขึ้นอยู่กับอาหารเพาะเลี้ยง AF -6 น้ำหนักเริ่มต้นของไมโครแอลจีก่อนที่วัฒนธรรม: 0.78 กรัม / ลิตร (น้ำหนักแห้ง) สารอาหารอินทรีย์: วัสดุดังต่อไปนี้มีการเปลี่ยนแปลงตามความเหมาะสมทั้งนี้ขึ้นอยู่กับวัฒนธรรม. •กลูโคส•สารสกัดจากยีสต์ (ยีสต์อัตโนมัติไลเซต): "สารสกัดจากยีสต์แห้ง D -3 "(ชื่อผลิตภัณฑ์), 10 ผลิตโดย NIHON PHARMACEUTICAL CO, LTD.. เบียร์เป็นเครื่องดื่มต้มเบียร์ใช้ได้ในเชิงพาณิชย์ (ที่มีอัตราการใช้งานของมอลต์ 66.7% หรือมากกว่า) ที่มี 5 ฉบับ% ของเอทานอลในตัวอย่าง1-4 และตัวอย่างเปรียบเทียบ 1-4, เฮเทอโรโทรฟไอซีวัฒนธรรมได้ดำเนินการภายใต้เงื่อนไขที่มืดและภาพเฮเทอโรโทรฟวัฒนธรรมไอซี15 ได้ดำเนินการในตัวอย่างอื่น ๆ และตัวอย่างเปรียบเทียบ วัฒนธรรมเงื่อนไขในภาพเฮเทอโรโทรฟวัฒนธรรมไอซีของไมโครแอลจีจะแสดงในรายละเอียดด้านล่าง. เงื่อนไข Photoirradiation: หลังจาก photoirradiation 12 ชั่วโมงที่วางไว้ในที่มืดเป็นเวลา 12 ชั่วโมง20 ความเข้มแสง: สังเคราะห์ความหนาแน่นของของเหลวโฟตอน ( PPFD) ประมาณ 100 24 Pinol / m2 •หรือประมาณ 200 iimol / m2 • s [0081] ตัวอย่างที่ 1 200 มิลลิลิตรขององค์ประกอบที่แสดงในตารางที่ 2 ถูกนำไป 500 มิลลิลิตร5 ขวดซาคา นอกจากกลูโคสและสารสกัดจากยีสต์ที่ถูกเพิ่มดังกล่าวที่ความเข้มข้นของกลูโคส 15 กรัม / ลิตรและความเข้มข้นของสารสกัดจากยีสต์ 5 กรัม / ลิตร. นอกจากนี้ค่า pH ปรับ 4.0 โดยการเติมกรดไฮโดรคลอ ดังนั้นบรอ ธ ถูกจัดทำขึ้น. จากนั้นขวดถูกเขย่าภายใต้วัฒนธรรมดังกล่าว10 เงื่อนไขและเงื่อนไขที่มืด (นั่นคือภายใต้เฮเทอโรโทรฟเงื่อนไขวัฒนธรรมไอซี) และไมโครแอลจีของจีนัสยูกลี นา (ยูกลีนา gracilis) สายพันธุ์ EOD-1 เพาะเลี้ยงเป็นเวลา 3 วัน ขั้นตอนที่วัฒนธรรมได้ดำเนินการจึง. [0082] ตัวอย่าง 2-4 15 ขั้นตอนวัฒนธรรมได้ดำเนินการในลักษณะเช่นเดียวกับในตัวอย่างที่ 1, ยกเว้นว่าปริมาณของน้ำตาลกลูโคสที่มีการเปลี่ยนแปลงเพื่อให้กลูโคสความเข้มข้นในบรอ ธ เป็น 20 กรัม / L 25 กรัม / ลิตรและ 30 กรัม / ลิตรตามลำดับ [0083] เปรียบเทียบตัวอย่างที่ 1 20 ขั้นตอนการเพาะเลี้ยงที่ได้รับการดำเนินการในลักษณะเดียวกับในตัวอย่างที่ 1, ยกเว้นว่าไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนา (ยูกลีนา gracilis) สายพันธุ์ NIES-48 มาเลี้ยงเป็นเวลา 5 วันแทน ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนา(ยูกลีนา gracilis) สายพันธุ์ EOD-1. [0084] 25 ตัวอย่างเปรียบเทียบ 2-4 ขั้นตอนการเพาะเลี้ยงที่ได้รับการดำเนินการในลักษณะเดียวกับในการเปรียบเทียบตัวอย่างที่ 1 ยกเว้นว่าจำนวนเงินที่ ของน้ำตาลกลูโคสที่มีการเปลี่ยนแปลงเพื่อให้ความเข้มข้นของกลูโคสในบรอ ธ 20 กรัม / ลิตร, 25 กรัม / ลิตรและ 30 กรัม / ลิตรตามลำดับ. [0085] 30 น้ำหนักแห้งของไมโครแอลจีหลังจากขั้นตอนที่วัฒนธรรม ในแต่ละตัวอย่างและตัวอย่างเปรียบเทียบวัด นอกจากนี้25 อัตราการแปลงของสารอาหารที่เพิ่มถูกกำหนดโดยสูตรการคำนวณดังต่อไปนี้. อัตราการแปลง (%) = น้ำหนัก (กรัม / ลิตร) ของสาหร่ายที่เพิ่มขึ้นจากวัฒนธรรม / ความเข้มข้น (กรัม / ลิตร) ของกลูโคสบริโภค5 [0086] รูป 4 แสดงผลของอัตราการแปลงและน้ำหนักแห้งของสาหร่ายหลังจากวัฒนธรรมในแต่ละตัวอย่างและตัวอย่างเปรียบเทียบเท่าที่เห็นจากรูป4, ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนา (ยูกลีนาgracilis) สายพันธุ์ EOD-1 มีการผลิตชีวมวลที่สูงกว่าสายพันธุ์ที่รู้จักกัน10 NIES-48. [0087] ตัวอย่างที่ 5 ขั้นตอนวัฒนธรรมได้ดำเนินการโดยการเพาะเลี้ยงไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนา (ยูกลีนา gracilis) สายพันธุ์ EOD- 1 ในลักษณะเช่นเดียวกับใน 15 ตัวอย่างที่ 1 ยกเว้นว่า 300-m1 ขวด Erlenmeyer ถูกนำมาใช้เป็นบรอ ธ ได้โดยการเพิ่มเบียร์50 มลขององค์ประกอบที่แสดงในตารางที่ 2 ที่ความเข้มข้นของเอทานอลที่ได้มาจากเบียร์2.5 ฉบับ% ถูกนำมาใช้สารสกัดจากยีสต์ที่ไม่ได้เพิ่มให้กับบรอธ สิ่งแวดล้อม photoirradiation 12 ชั่วโมงและความมืดสภาพแวดล้อม12 ชั่วโมงซ้ำระหว่างวัฒนธรรมและระยะเวลา 20 วัฒนธรรมเป็น 7 วัน ความหนาแน่นของโฟตอนการสังเคราะห์แสงฟลักซ์ (PPFD) ถูกกำหนดให้ประมาณ100 limol / m2 • s. [0088] ตัวอย่างที่ 6 ขั้นตอนการเพาะเลี้ยงที่ได้รับการดำเนินการในลักษณะเดียวกับในตัวอย่างที่ 5, 25, ยกเว้นว่าสารสกัดจากยีสต์ที่ถูกเพิ่มเข้ามาในบรอ ธ ที่มีความเข้มข้นของสารสกัดจากยีสต์2 กรัม / ลิตร. [0089] เปรียบเทียบตัวอย่างที่ 5 ขั้นตอนการเพาะเลี้ยงที่ได้รับการดำเนินการในลักษณะเดียวกับในตัวอย่างที่ 5, 30, ยกเว้นว่าไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาความเครียด NIES- 48 ได้รับการเพาะเลี้ยงแทนของไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนา(ยูกลีนา gracilis) สายพันธุ์ EOD-1. 26 เปรียบเทียบตัวอย่างที่ 6 ขั้นตอนวัฒนธรรมได้ดำเนินการในลักษณะเช่นเดียวกับในการเปรียบเทียบตัวอย่างที่ 5 ยกเว้นว่ายีสต์ สารสกัดจากถูกเพิ่มลงในบรอ ธ ที่มีความเข้มข้นของสารสกัดจากยีสต์2 กรัม / ลิตร. 5 [0090] ในขั้นตอนที่วัฒนธรรมของแต่ละตัวอย่างที่ 5 และ 6 และเปรียบเทียบตัวอย่างที่5 และ 6 น้ำหนักแห้งของไมโครแอ ลจีหลังจากวัฒนธรรม 1, 2, 3, 4, 5 และ 7 วันวัด รูปที่ 5 แสดงผล. เท่าที่เห็นจากรูปที่ 5 ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนา (ยูกลีนา10 gracilis) สายพันธุ์ EOD-1 มีผลผลิตสูงกว่าสายพันธุ์ที่รู้จักกัน NIES-48, แม้เมื่อพวกเขามาเลี้ยง ภายใต้ภาพเฮเทอโรโทรฟไอซีเงื่อนไขวัฒนธรรม [0091] ตัวอย่าง 7-12 ขั้นตอนการเพาะเลี้ยงที่ได้รับการดำเนินการในลักษณะเดียวกับในตัวอย่างที่ 5, 15 ยกเว้นว่าองค์ประกอบที่แสดงในตารางที่ 3 ถูกนำมาใช้แทนขององค์ประกอบที่แสดงในตารางที่2 ค่า pH เริ่มต้นของบรอ ธ WAS เปลี่ยนไปเป็นค่า pH 5.5 pH 6.0 pH 7.0 pH 8.0 pH 8.5 และ pH 9.0 ตามลำดับและระยะเวลาการเลี้ยงได้เปลี่ยนไปเป็น10 วัน. [0092] 20 ในขั้นตอนวัฒนธรรมของแต่ละตัวอย่าง 7-12 ที่ น้ำหนักแห้งของไมโครแอลจีหลังจากวัฒนธรรมวัดเมื่อเวลาผ่านไป รูปที่ 6 แสดงผล. [0093] ตัวอย่าง 13-17 25 ขั้นตอนการเพาะเลี้ยงที่ได้รับการดำเนินการในลักษณะเดียวกับในตัวอย่างที่ 5, ยกเว้นว่าองค์ประกอบที่แสดงในตารางที่ 3 ถูกนำมาใช้แทนขององค์ประกอบที่แสดงในตารางที่2, โฟตอนสังเคราะห์แสง ความหนาแน่นของของเหลว (PPFD) ถูกกำหนดให้ประมาณ 200 PANOL / m2 •วินาที, ค่า pH เริ่มต้นของบรอ ธ ได้เปลี่ยนไปเป็นค่า pH 3.5 pH 4.0 pH 4.5 pH 5.0 และ pH 5.5 ตามลำดับและระยะเวลาการเลี้ยงคือ30 การเปลี่ยนแปลงถึง 10 วัน. [0094] 27 ตัวอย่างที่ 18 และ 19 ขั้นตอนการเพาะเลี้ยงที่ได้รับการดำเนินการในลักษณะเดียวกับในตัวอย่างที่ 5, ยกเว้นว่าองค์ประกอบที่แสดงในตารางที่ 3 ถูกนำมาใช้แทนขององค์ประกอบที่แสดงในตารางที่2, pH เริ่มต้น ของบรอ ธ ได้เปลี่ยนไปเป็นค่า pH 3.5 ที่ 5 และค่า pH 5.5 ตามลำดับและระยะเวลาการเลี้ยงได้เปลี่ยนไปเป็น 10 วัน. [0095] ในขั้นตอนที่วัฒนธรรมของแต่ละตัวอย่าง 13-19 ของน้ำหนักแห้งของไมโครแอล หลังจากที่จีวัฒนธรรมวัดเมื่อเวลาผ่านไป รูปที่ 7 แสดงให้เห็นผล. 10 [0096] ตัวอย่าง 20 ขั้นตอนที่วัฒนธรรมได้ดำเนินการโดยการเพาะเลี้ยงไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนา (ยูกลีนา gracilis) สายพันธุ์ EOD-1 ในลักษณะเช่นเดียวกับในตัวอย่างที่ 5 ยกเว้น ที่ระยะเวลาการเลี้ยงเป็นเวลา 7 วัน. 15 วัฒนธรรมที่ได้รับการดำเนินการภายใต้เงื่อนไขแอโรบิกโดยเขย่าขวดจนสองวันหลังจากที่เริ่มต้นวัฒนธรรม หลังจากนั้นเป็นต้นมาเขย่าก็หยุดและวัฒนธรรมได้ดำเนินการภายใต้เงื่อนไขที่ไม่ใช้ออกซิเจนโดยการจัดหาก๊าซเฉื่อย (ก๊าซไนโตรเจน). [0097] 20 เปรียบเทียบตัวอย่าง 7 ขั้นตอนวัฒนธรรมที่ได้รับการดำเนินการในลักษณะเดียวกับในตัวอย่างที่ 20 ยกเว้นว่าไมโครแอ ลจีของจีนัสยูกลีนา (ยูกลีนา gracilis) สายพันธุ์ NIES-48 ได้รับการเพาะเลี้ยงแทนของไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนา (ยูกลีนา gracilis) สายพันธุ์ EOD-1. 25 วัฒนธรรมที่ได้รับการดำเนินการภายใต้ เงื่อนไขแอโรบิกโดยเขย่าขวดจนถึง4 วันหลังจากที่เริ่มต้นวัฒนธรรม หลังจากนั้นเป็นต้นมาเขย่าก็หยุดและวัฒนธรรมได้ดำเนินการภายใต้เงื่อนไขที่ไม่ใช้ออกซิเจนโดยการจัดหาก๊าซ (ก๊าซไนโตรเจน)
การแปล กรุณารอสักครู่..
