Flow CytometryLactobacilli were add

Flow Cytometry
Lactobacilli were added to non-confluent ME-180 cells.
Unbound bacteria were removed after 2 hours of incubation,
and the cells were incubated for an additional 22 hours. The cells
were washed in PBS and detached by the addition of 0.2% trypsinEDTA
(Invitrogen, Carlsbad, CA, USA). The cells were collected
by centrifugation at 7786g for 10 min at 4uC. The supernatant
was decanted, and the cells were fixed in ice-cold 70% ethanol at
4uC. For the analysis, the cells were washed in PBS, treated with
RNase (40 mg/ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) and
stained with propidium iodide (40 mg/ml, BD Biosciences) for
30 min at 37uC. The total DNA profile was generated by flow
cytometry (FACSCalibur), and the data were analyzed using the
Cell Quest Pro software package (BD Biosciences, Franklin Lakes,
NJ, USA). Flow cytometry experiments were performed four times
in at least duplicate, and for each sample, 10,000 events were
recorded.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Flow Cytometry
Lactobacilli ถูกเพิ่มเข้าไปในที่ไม่ได้ไหลมารวมกันเซลล์ ME-180.
แบคทีเรียหลุดถูกลบออกหลังจาก 2 ชั่วโมงของการบ่ม
และเซลล์ถูกบ่มเป็นเวลา 22 ชั่วโมงเพิ่มเติม เซลล์
ถูกล้างในพีบีเอสและเดี่ยวโดยนอกเหนือจาก 0.2% trypsinEDTA
(Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) เซลล์ที่ถูกเก็บรวบรวม
โดยการหมุนเหวี่ยงที่ 7786g เป็นเวลา 10 นาทีที่ 4uC ใส
ถูก decanted และเซลล์ได้รับการแก้ไขในเย็นเอทานอล 70% ที่
4uC สำหรับการวิเคราะห์เซลล์ถูกล้างในพีบีเอส, การรักษาด้วย
RNase (40 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) และ
ย้อมด้วยไอโอไดด์ propidium (40 mg / ml, BD Biosciences) สำหรับ
30 นาทีที่ 37uC รายละเอียดดีเอ็นเอทั้งหมดถูกสร้างขึ้นโดยการไหล
cytometry (FACSCalibur) และวิเคราะห์ข้อมูลโดยใช้
เซลล์เควสแพคเกจซอฟต์แวร์ Pro (BD ชีววิทยาศาสตร์, แฟรงคลินเลคส์,
นิวเจอร์ซีย์ประเทศสหรัฐอเมริกา) โฟทดลองได้ดำเนินการครั้งที่สี่
ในเวลาอย่างน้อยที่ซ้ำกันและสำหรับแต่ละตัวอย่าง 10,000 เหตุการณ์ที่ถูก
บันทึกไว้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การไหล (
Lactobacilli เพิ่มไม่ me-180 กระจู๋กระจี๋เซลล์
หลุดแบคทีเรียถูกลบออกหลังจาก 2 ชั่วโมงระยะเวลา
และเซลล์ถูกบ่มเป็นเวลาอีก 22 ชั่วโมง เซลล์
ถูกล้างใน PBS และแฝด โดยเพิ่ม 0.2% trypsinedta
( Invitrogen Carlsbad , CA , USA ) เซลล์เก็บ
โดยการเหวี่ยงแยกที่ 7786g สำหรับ 10 นาทีที่ 4uc .
คือริน และน่าน ,และเซลล์ที่ถูกกำหนดในเย็น 70% เอทานอลที่
4uc . สำหรับการวิเคราะห์เซลล์ก็ล้างใน PBS , รักษาด้วย
เลส ( มิลลิกรัม / 40 มิลลิลิตร ซิกม่า Aldrich St . Louis , MO , USA ) และ
เปื้อน propidium ไอโอไดด์ ( 40 mg / ml BD BIOSCIENCES )
37uc 30 นาทีที่ . โปรไฟล์ดีเอ็นเอทั้งหมดถูกสร้างขึ้นโดยเซลล์ไหล
( facscalibur ) และวิเคราะห์ข้อมูลโดยใช้
เซลล์ซอฟต์แวร์แพคเกจโปรเควส ( BD BIOSCIENCES Franklin Lakes ,
NJ , USA ) การทดลองการไหล ( จำนวน 4 ครั้ง
อย่างน้อยที่ซ้ำกัน และแต่ละกลุ่มตัวอย่าง 10 , 000 เหตุการณ์
บันทึก