2.5. Characterization of plant grow

2.5. Characterization of plant growth promoting traits
Siderophore productions of isolates were determined by the Chrome Azurole S (CAS) method of Schwyn and Neilands (1987). The production of siderophore was indicated by a change in color of the medium from blue to orange. Phosphate solubilizing activity of isolates was evaluated on Sperber medium: 0.5 g L−1 yeast extract, 0.1 g L−1 CaCl2, 0.25 g L−1 MgSO4·7H2O, 2.5 g L−1 Ca3(PO4)2, 10 g L−1 glucose, 15 g L−1 agar (Sperber, 1958). The medium was spot inoculated with 7 μL of inocula and incubated at 28 °C for 7 days. The development of a clear zone around the bacteria was taken as an index of phosphate solubilization. It was computed as the ratio of total diameter (colony + halo zone) to colony diameter (Edi-Premono et al., 1996). Isolates were inoculated in nutrient broth containing 2.5 g L−1 Ca3(PO4)2 and incubated at 27 °C in shaker incubator for seven days. Each day the change in pH in the broth culture was determined with a pH meter.

Isolates were also screened for the productions of hydrogen cyanide (HCN) using NGA-plate amended with 4.4 g L−1 glycine following the method described in Lorck (1948). A Whatman filter paper No.1 soaked in 2% sodium carbonate in 0.5% picric acid solution was placed at the top of the plate. Plates were sealed with Parafilm and incubated at 28 °C for four days. Development of orange to red color indicated HCN production.

The productions of indole acetic acid (IAA) by the isolates were determined following the method of Bric et al. (1991). A 48 h old test bacterial culture grown on NGA-plate was inoculated into nutrient broth supplied with 3 mM tryptophan and incubated at 28 °C for 48 h. Bacterial cells were centrifuged at 3000 rpm for 30 min. 2 mL of the supernatant were mixed with 100 μL of ortho-phosphoric acid and 4 mL of Solawaski’s reagent (50 mL 35% perchloric acid; 1 mL 0.5 M FeCl3) and incubated for 30 min. Development of a pink color indicates IAA production. The pink color was quantified using a spectrophotometer (Beckmann DU640, USA) at 535 nm. The concentrations of IAA produced by isolates were determined using a standard curve prepared from pure IAA.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5. คุณสมบัติของลักษณะการส่งเสริมการเจริญเติบโตพืชการผลิต Siderophore ของแยกถูกกำหนด โดยวิธี S Azurole โครเมี่ยม (CAS) ของ Schwyn และ Neilands (1987) การผลิตของ siderophore ถูกตามการเปลี่ยนแปลงในสีกลางสีฟ้ากับสีส้ม ฟอสเฟต solubilizing การแยกถูกประเมินในกลาง Sperber: สารสกัด L−1 ยีสต์ 0.5 g, 0.1 g L−1 CaCl2, 0.25 g L−1 MgSO4·7H2O, 2.5 g L−1 Ca3 (PO4) 2, 10 g L−1 กลูโคส 15 g L−1 agar (Sperber, 1958) สื่อถูกจุด inoculated กับ μL 7 ของ inocula และ incubated ในวันที่ 28 ° C พัฒนาของโซนล้างสถานแบคทีเรียถูกนำมาเป็นดัชนีของฟอสเฟต solubilization จะถูกคำนวณเป็นอัตราส่วนของเส้นผ่าศูนย์กลางรวม (โคโลนี + halo โซน) ให้เส้นผ่าศูนย์กลางโคโลนี (Edi Premono et al., 1996) แยกถูก inoculated ในธาตุอาหารซุปประกอบด้วย 2.5 g L−1 Ca3 (PO4) 2 และ incubated ที่ 27 ° C ในการบ่มเพาะวิสาหกิจเชคเกอร์ 7 วัน แต่ละวันการเปลี่ยนแปลงค่า pH ในซุปที่ถูกกำหนด ด้วยเครื่องวัดค่า pHแยกได้ยังฉายสำหรับการผลิตไฮโดรเจนไซยาไนด์ (HCN) การใช้แก้ไข ด้วยวิธีการอธิบายไว้ใน Lorck (ค.ศ. 1948) ดังต่อไปนี้ glycine 4.4 g L−1 แผ่นรับ กระดาษกรอง Whatman No.1 ที่เปี่ยมล้นไปด้วยใน 2% โซเดียมคาร์บอเนตในโซลูชัน picric กรด 0.5% ถูกวางไว้ที่ด้านบนของจาน แผ่นถูกปิดผนึก ด้วย Parafilm และ incubated สำหรับสี่วันที่ 28 ° C การพัฒนาของสีส้มสีแดงระบุผลิต HCNการผลิตของอินโดลกรดอะซิติก (IAA) โดยจะแยกได้กำหนดตามวิธีการของกลุ่มประเทศ Bric และ al. (1991) 48 h เก่าทดสอบแบคทีเรียวัฒนธรรมปลูกบนแผ่นพังงาถูก inoculated เป็นซุปธาตุอาหารให้กับทริปโตเฟน 3 mM และ incubated สำหรับเซลล์แบคทีเรีย 48 h. ถูก centrifuged ที่ 3000 rpm สำหรับ 30 นาทีมล. 2 ของ supernatant ถูกผสมกับ μL 100 mL 4 ของรีเอเจนต์ของ Solawaski และกรด ortho phosphoric ที่ 28 ° C (50 mL 35% perchloric กรด 1 mL 0.5 M FeCl3) และ incubated สำหรับผลิต IAA บ่งชี้ 30 นาทีพัฒนาสีชมพู สีชมพูถูก quantified โดยใช้เป็นเครื่องทดสอบกรดด่าง (Beckmann DU640 สหรัฐอเมริกา) ที่ 535 นาโนเมตร ความเข้มข้นของ IAA ที่ผลิต โดยแยกถูกกำหนดโดยใช้เส้นโค้งมาตรฐานเตรียมจาก IAA บริสุทธิ์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 การส่งเสริมการเจริญเติบโตของพืช ลักษณะของไซเดอโรฟอร์
การผลิตไอโซเลทที่กำหนดโดย Chrome azurole s ( CAS ) และวิธีการ schwyn neilands ( 1987 ) การผลิตสารละลายถูกระบุโดยการเปลี่ยนสี ของอาหาร จาก สีฟ้า สีส้ม ละลายฟอสเฟตไอโซเลทคือการประเมินเกี่ยวกับกิจกรรมของ sperber กลาง L − 1 : 0.5 กรัมยีสต์สกัด 0.1 g L − 1 CaCl2 , 0 .25 g L − 1 MgSO4 ใด้วย 7h2o 2.5 G L − 1 ca3 ( po4 ) 2 , 10 g L − 1 = 15 g L − 1 ( sperber 1958 ) กลางคือจุดที่ใส่μ 7 ลิตร inocula บ่มที่ 28 °องศาเซลเซียสเป็นเวลา 7 วัน การพัฒนาบริเวณใสรอบแบคทีเรียถูกถ่ายเป็นดัชนีของการสกัดฟอสเฟต มันคำนวณเป็นอัตราส่วนของเส้นผ่านศูนย์กลางทั้งหมด ( อาณานิคมรัศมีโซน ) เส้นผ่าศูนย์กลางโคโลนี ( EDI premono et al . ,1996 ) ไอโซเลตเป็นสารอาหารที่ใส่ในอาหารที่มี 2.5 G L − 1 ca3 ( po4 ) 2 และบ่มที่อุณหภูมิ 27 องศา C ใน incubator shaker สำหรับเจ็ดวัน ในแต่ละวัน การเปลี่ยนแปลงในค่า pH ในน้ำซุป วัฒนธรรมถูกกำหนดด้วยเครื่องวัด

ไอโซเลทยังเพิ่มการผลิตไฮโดรเจนไซยาไนด์ ( กรดไฮโดรไซยานิก ) ใช้งาแผ่นผสมกับ 4.4 กรัม L − 1 ที่มีต่อวิธีการที่อธิบายไว้ใน lorck ( 2491 )เป็น whatman กระดาษกรอง 1 แช่ 2% โซเดียมคาร์บอเนต 0.5% สารละลายกรดพิคริกถูกวางไว้ที่ด้านบนของจาน จานถูกผนึกด้วยพาราฟิล์ม และ บ่มที่ 28 องศา C เป็นเวลาสี่วัน การพัฒนาของสีส้มสีแดงแสดงการผลิตกรดไฮโดรไซยานิก

การผลิตของกรดอินโดล ( IAA ) โดยแยกวิเคราะห์ตามวิธีของ BRIC et al . ( 1991 )48 ชั่วโมงขึ้นไปทดสอบแบคทีเรียวัฒนธรรมที่ปลูกบนแผ่นงาเป็นเชื้อน้ำธาตุอาหารให้กับทริป 3 มม. และบ่มที่อุณหภูมิ 28 องศา C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง เซลล์แบคทีเรียที่เป็นระดับที่ 3 , 000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 30 นาที และน่าน 2 มิลลิลิตร ผสม 100 μ l ortho กรดฟอสฟอริค และ 4 solawaski เป็นรีเอเจนต์ ( 50 มิลลิลิตร ml 35 % เปอร์คลอริกแอซิด 1 มิลลิลิตร ต่อ 0.5 m FeCl3 ) และบ่มเป็นเวลา 30 นาทีการพัฒนาสีชมพูบ่งบอกว่าผลิต IAA . สีชมพู คือ ปริมาณการใช้วัสดุ ( เบ็คมันน์ du640 สหรัฐอเมริกา ) ที่ 535 นาโนเมตร ความเข้มข้นของ IAA ที่ผลิตโดยแยกวิเคราะห์โดยใช้มาตรฐานเส้นโค้งที่เตรียมจากเพียวเอ .