2. Materials and methods2.1. Isolat

2. Materials and methods
2.1. Isolation and identification of Salmonella
The sample collection was conducted in farms, abattoirs and mar-
kets of pig, chicken and duck from June 2010 to May 2011 in Sichuan
Province, Southwest China. The number of farms, abattoirs and markets
are described inTable 1, and the number of samples in each farm, abat-
toir or market was not constant and was proportional to the scale of
production. At farms, rectal swabs were collected randomly from an in-
dividual animal of different pigpens or coops. At abattoirs, carcasses
were sampled by swabbing from rump to cheek along the surface of
the carcass. At markets, carcass rinse samples (25 mL buffered peptone
water) were collected for chicken and duck, and grounded meat sam-
ples (25 g) were collected for pork. All the samples were collected ran-
domly and every sampling site was visited only once. The sampling
strategy was defined according to previous researches (Kirchner et al.,
2011; Visscher et al., 2011; Yang et al., 2010 ). A total of 1382 samples
were collected. The samples were analyzed for Salmonella according
to the method as described by Yan et al. (2010) with some modifica-
tions. Brie fly, 25 g (mL) of samples or swabbing cottons samples were
placed into a sterile plastic bag containing 225 mL of buffered peptone
water and shaken vigorously. The rinse was incubated at 37 °C in a
shaking incubator at 120 rpm for 8 h, and then 1 mL of rinse was
a d d ed t o 1 0 m L s el en it e c ys t ei n e b ro th . B ro t h s we re in c u ba te d a t
3 7 ° C f or 2 4 h , f ol lo we d b y s t re a k in g of i n o c u lu m f r om t h e s el e n it e
cysteine broth onto CHROMagar Salmonella plates (CHROMagar, Paris,
France) and incubating at 37 °C for 24 h. Isolates with typical pheno-
type (mauve colony) were confirmed by PCR using a previously de-
scribed method ( Rahn et al., 1992).
2.2. Serotyping
Sal monel la isolates were serotyped by slide agglutination using
commer c ially available a nti se rum ( Ti a nrun Bi o-Phar ma ce ut ical, N ingbo,
China), accor din g to m anufact u rer 's instruct ions.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1 การแยกและระบุระดับวิธีการเก็บตัวอย่างในฟาร์ม abattoirs และมี.ค.-kets หมู ไก่ และเป็ดจากเดือน 2010 มิถุนายนถึง 2011 พฤษภาคมในเสฉวนจังหวัด ตะวันตกเฉียงใต้ของจีน จำนวนฟาร์ม abattoirs และตลาดอธิบาย inTable 1 และจำนวนตัวอย่างในแต่ละฟาร์ม abattoir หรือตลาดไม่คง และเป็นสัดส่วนกับขนาดของการผลิต ที่ฟาร์ม swabs ไส้ถูกเก็บรวบรวมได้จากความใน-สัตว์ dividual pigpens อื่นหรือ coops ที่ abattoirs ซากมีตัวอย่างจาก swabbing จากเนื้อที่ให้แก้มตามพื้นผิวของซาก ที่ตลาด ตัวอย่างล้างซาก (peptone buffered 25 mLน้ำถูกรวบรวมสำหรับไก่และเป็ด และสูตรสามเนื้อ -ples (25 กรัม) ถูกเก็บรวบรวมสำหรับหมู ทั้งหมดที่ถูกเก็บรวบรวมตัวอย่างการวิ่ง-domly และทุกไซต์สุ่มที่ถูกชมเพียงครั้งเดียว การสุ่มตัวอย่างมีกำหนดกลยุทธ์ตามงานวิจัยก่อนหน้านี้ (Kirchner et al.,2011 Visscher et al., 2011 ยาง et al., 2010) จำนวนตัวอย่าง 1382ถูกรวบรวมไว้ ตัวอย่างได้วิเคราะห์ในสายตามวิธีตามที่อธิบายไว้โดย Yan et al. (2010) และบาง modifications มี 25 กรัม (มิลลิลิตร) ของตัวอย่างหรือตัวอย่างผ้าฝ้าย swabbing บรีฮาร์ดดิ้งบินอยู่ในถุงพลาสติกที่ใส่ประกอบด้วย 225 mL ของ peptone ถูกบัฟเฟอร์น้ำ และผลสะเทือนอย่างดุเดือดเช่นกัน ล้างถูก incubated ที่ 37 ° C ในการสั่น incubator ที่ 120 rpm สำหรับ 8 h, 1 mL ของล้างได้d d ed t o 1 0 m L s เอลน้ำมันอี c ys t ei n e b ro th บีโร t h s เรากลับใน c u บาติต.3 7 ° C f หรือ 2 4 h, f ol หล่อ เรา d b y s t re k ใน g ของผม n o c u ลู m f r ออม t h e s เอลอี n มันอีcysteine ซุปบนจานซัล CHROMagar (CHROMagar ปารีสฝรั่งเศส) และ incubating ที่ 37 ° C ใน 24 h. แยกกับ pheno ทั่วไป -ชนิด (บอลรูมอาณานิคม) ได้รับการยืนยัน โดย PCR ใช้ตัวก่อนหน้านี้เดอ -scribed วิธี (Rahn et al., 1992)2.2. serotypingแซลสถานีลาแยกถูก serotyped โดยใช้ agglutination ภาพนิ่งially ว่าง commer c เป็น nti เซรัมเพื่อการ nrun Bi o-แครงมา ce ut ical, N ingboจีน), แอคคอร์ดิน g กับ m anufact u rer ของแนะนำกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 การแยกและบัตรประจำตัวของเชื้อ Salmonella
คอลเลกชันตัวอย่างได้ดำเนินการในฟาร์มและโรงฆ่าสัตว์ มี.ค.
kets หมูไก่และเป็ดตั้งแต่เดือนมิถุนายน 2010 ถึงพฤษภาคม 2011
ในมณฑลเสฉวนจังหวัดภาคตะวันตกเฉียงใต้ของจีน จำนวนฟาร์มโรงฆ่าสัตว์และตลาดจะมีการอธิบาย inTable 1 และจำนวนของกลุ่มตัวอย่างในแต่ละฟาร์มที่ abat- toir หรือตลาดไม่ได้อย่างต่อเนื่องและเป็นสัดส่วนกับขนาดของการผลิต ที่ฟาร์ม swabs ทวารหนักได้รับการสุ่มเก็บจากหสัตว์dividual ของ pigpens แตกต่างกันหรือเล้า ที่โรงฆ่าสัตว์, ซากถูกเก็บตัวอย่างโดยswabbing จากตะโพกแก้มไปตามพื้นผิวของซาก ที่ตลาดซากตัวอย่างล้าง (25 มิลลิลิตรเปปโตนบัฟเฟอร์น้ำ) ที่ถูกเก็บรวบรวมสำหรับไก่และเป็ดและเนื้อสัตว์ที่มีเหตุผล sam- Ples (25 กรัม) ถูกเก็บเนื้อหมู ตัวอย่างทั้งหมดถูกเก็บรวบรวม ran- domly และเว็บไซต์ที่เก็บตัวอย่างทุกคนที่เข้าชมเพียงครั้งเดียว กลุ่มตัวอย่างกลยุทธ์ถูกกำหนดตามงานวิจัยก่อนหน้า (Kirchner, et al. 2011; Visscher et al, 2011;.. ยาง et al, 2010) ทั้งหมด 1,382 ตัวอย่างที่ถูกเก็บรวบรวม กลุ่มตัวอย่างที่ได้มาวิเคราะห์หาเชื้อ Salmonella ตามวิธีการตามที่อธิบายไว้โดยยันet al, (2010) ที่มี modifica- บางข้อ Brie บิน 25 กรัม (มิลลิลิตร) ของกลุ่มตัวอย่างหรือ swabbing ตัวอย่างผ้าฝ้ายถูกวางลงในถุงพลาสติกที่ผ่านการฆ่าเชื้อที่มี225 มิลลิลิตรเปปโตนบัฟเฟอร์น้ำและเขย่าแรงๆ ล้างได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสในศูนย์บ่มเพาะเขย่าที่120 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 8 ชั่วโมงแล้ว 1 มิลลิลิตรล้างเป็นววเอ็ด1 0 เมตร L s เอ en มัน ec ys ทีเนโร Neb ครั้ง B โร ths เราอีกครั้งในลูกบาศ์กบาเต้ที่3 7 ° C ฉหรือ 2 4 ชั่วโมงฉเฒ่าแท้จริงเรา dbyst ใหม่อลาสกาในกรัม inocu ลู mfr อ้อมเหล่าเอ en มัน e น้ำซุป cysteine ​​ลงบนแผ่น CHROMagar Salmonella (CHROMagar ปารีสฝรั่งเศส) และบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง แยกกับ pheno- ทั่วไปประเภท(โคโลนีสีม่วง) ได้รับการยืนยันโดยวิธี PCR โดยใช้ de- ก่อนหน้านี้วิธีscribed (Rahn et al., 1992). 2.2 serotyping Sal โมเนลลาที่แยกถูก serotyped โดยสไลด์เกาะติดกันโดยใช้commer c ใช้ได้ ially NTI SE รัม (Ti nrun Bi o-Phar แม่ซีอียูทาห์ iCal, N ingbo, จีน) ดินแดง accor g เพื่อเมตร anufact ยู RER 's สั่งไอออน .

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . การแยกและจำแนกเชื้อ Salmonella
ตัวอย่างการเก็บในฟาร์ม โรงฆ่าสัตว์ และมาร์ -
เคลื่อนย้ายสุกร ไก่ และเป็ด จาก มิถุนายน 2553 - พฤษภาคม 2554 ในมณฑลเสฉวน
จังหวัดตะวันตกเฉียงใต้ของจีน จำนวนฟาร์ม โรงฆ่าสัตว์ และตลาด
อธิบาย intable 1 และจำนวนกลุ่มตัวอย่างในแต่ละฟาร์ม น้อยลง -
toir หรือตลาดไม่คงที่และได้สัดส่วนกับขนาดของ
ผลิต ที่ฟาร์ม , ทวารจากจำนวนสุ่มจากใน -
dividual สัตว์ต่าง pigpens หรือเล้า . ที่โรงฆ่าสัตว์ , ซาก
สุ่ม ตัวอย่างโดยซับมือจากสะโพกไปตามผิวแก้ม
ซาก ที่ตลาด ซากบ้วนตัวอย่าง ( 2
น้ำ 25 มิลลิลิตร ตามลำดับ ) ได้รวบรวม ไก่เนื้อ และเป็ดเนื้อป่นและแซม -
ples ( 25 กรัม ) ในการเก็บรวบรวมสำหรับหมู ทั้งหมด จำนวนรัน -
domly และทุกตัวอย่างเว็บไซต์มีการเข้าชมเพียงครั้งเดียว ตัวอย่างกลยุทธ์ที่กำหนด
ตามที่งานวิจัยก่อนหน้านี้ ( เคิร์ชเนอร์ et al . ,
2011 ; visscher et al . , 2011 ; ยาง et al . , 2010 ) ทั้งหมด 947 ตัวอย่าง
กำลังรวบรวม ตัวอย่างวิเคราะห์ Salmonella ตาม
วิธีการตามที่อธิบายไว้โดยยัน et al . ( 2010 ) กับบาง modifica -
ยินดีด้วย . บรี บิน 25 กรัม ( ml ) ของตัวอย่างหรือซับมือผ้าฝ้ายจำนวน
วางไว้ให้เป็นหมันถุงพลาสติกที่มี 225 มิลลิลิตร ตามลำดับใน
น้ำและเขย่าอย่างจริงจัง ล้างถูกบ่มที่ 37 ° C ใน
เขย่าตู้ที่ 120 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 8 ชั่วโมง แล้วล้างออก 1 มิลลิลิตร คือ
D D Ed T o 1 0 M L S El en มัน E C T N E B EI YS ro th บีโร T H S เราอีกครั้งใน C u บาเต D T
3 7 ° C F หรือ 4 H , F ol ดูเถิดเรา D b y s t re K ในกรัมของข้า N O C U Lu M F R T H E S E EL โอมมัน E
8-12 ซุปบน แผ่น chromagar ซาลโมเนลลา ( chromagar , ปารีส ,
ฝรั่งเศส ) และ เพาะที่อุณหภูมิ 37 องศา C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ไอโซเลท pheno - ทั่วไป
ประเภท ( อาณานิคมสีม่วง ) ได้รับการยืนยันโดยวิธี PCR ที่ใช้ก่อนหน้านี้ de -
วิธี scribed Rahn et al . , 1992 ) .
2.2 . การสำรวจ
แซลโมเนล ลา serotyped ไอโซเลทโดยการจับกลุ่มภาพนิ่งใช้
โคมเมอร์ซี ially ใช้ได้ NTI เซรัม ( Ti เป็นไปบี o-phar มา CE UT iCal , N ingbo
, จีน ) ในดิน G M anufact u Ph D ' s สั่งไอออน .