The rinsed coupons were fixed in 1 M sodium cacodylate
buffer containing 2.5% glutaraldehyde and 4% paraformaldehyde at
4 °C for at least 30 min and washed three times in 0.1 M sodium
cacodylate buffer for 10 min at 21 ± 2 °C. The fixed coupons were
dehydrated using a graded series of ethanol concentrations (50, 60,
70, 80, and 90, and twice with 100%) for 10 min each. Coupons
with dehydrated biofilms were soaked in mixtures of ethanol and
isoamyl acetate at ratios 3:1, 1:1, and 1:3 for 20 min, and finally
treated twice with 100% isoamyl acetate solution for 30 min. After
treatment with isoamyl acetate solution, the coupons were dried in
a critical point dryer (13200-AB, SPI supplies, West Chester, PA,
USA) using carbon dioxide and coated with platinum (40 nm thick)
using sputter coating (Cressington 208HR, Cressington Scientific
Instruments, Watford, UK). The samples were visualized using a
Hitachi S-4700 scanning electron microscope (Hitachi Ltd., Tokyo,
Japan).
คูปองล้างได้รับการแก้ไขใน 1 M โซเดียม cacodylate
บัฟเฟอร์ที่มี glutaraldehyde 2.5% และ 4% paraformaldehyde ที่
4 องศาเซลเซียสเป็นเวลาอย่างน้อย 30 นาทีและล้างสามครั้งใน 0.1 M
โซเดียมบัฟเฟอร์cacodylate เป็นเวลา 10 นาทีวันที่ 21 ± 2 องศาเซลเซียส คูปองคงเป็นแห้งโดยใช้ชุดจัดลำดับความเข้มข้นของเอทานอล (50, 60, 70, 80, 90, และครั้งที่สอง 100%) เป็นเวลา 10 นาทีในแต่ละ คูปองที่มีไบโอฟิล์มแห้งแช่ในสารผสมเอทานอลและอะซิเตทisoamyl ในอัตราส่วน 3: 1, 1: 1 และ 1: 3 สำหรับ 20 นาทีและในที่สุดได้รับการรักษาเป็นครั้งที่สอง100% วิธีการแก้ปัญหาอะซิเตท isoamyl เป็นเวลา 30 นาที หลังจากที่มีการรักษาวิธีการแก้ปัญหาอะซิเตท isoamyl คูปองได้แห้งในเครื่องเป่าจุดวิกฤติ (13200-AB, อุปกรณ์ SPI, เวสต์เชสเตอร์, PA, สหรัฐอเมริกา) ใช้ก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์และเคลือบด้วยทองคำขาว (40 นาโนเมตรหนา) ใช้เคลือบพ่น (Cressington 208HR, Cressington วิทยาศาสตร์เครื่องมือเฟิร์ดสหราชอาณาจักร) กลุ่มตัวอย่างที่ได้รับการมองเห็นโดยใช้ฮิตาชิ S-4700 สแกนกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน (ฮิตาชิ จำกัด โตเกียวญี่ปุ่น)
การแปล กรุณารอสักครู่..
