Continuous A549 cells were grown in

Continuous A549 cells were grown in the culture medium containing DMEM medium with 10% FBS, and 1% Pen-Strep antibiotics, and incubated at 37 °C in a humidified incubator with 5% CO2. Confluent A549 cell was tripsinized and seeded at 5×104 cells/well in 96-well microplates, incubated for 24 h at 37 °C to allowed cell attached onto the plate. Then the culture medium was discarded and fresh medium culture contained different concentrations of the extract were added and incubated for 24 h. The 50% inhibitory concentration (IC50) was defined by the MTT method. Briefly, the medium of the treated cells was removed, then 100 μL of medium containing 0.5 mg/mL MTT was added to each well. After incubation at 37 °C with 5% CO2 incubator for 4 h, 100 μL of 10% SDS was added and mixed to release the purple color from the cells. Last incubation was performed again in the dark for 24 h, before optical density was measured at 570 nm using ELISA reader (Sadeghi-aliabadi et al. 2008; Heny et al. 2012).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เซลล์ A549 ต่อเนื่องเติบโตในวัฒนธรรมสื่อที่ประกอบด้วย DMEM ปานกลาง 10% FBS และยาปฏิชีวนะ Strep ปากกา 1% และรับการกกที่ 37 ° C ในตู้อบที่ณอุณหภูมิกับ 5% CO2 เซลล์ A549 confluent เป็น tripsinized และฟิตเนสที่ 5 × 104 เซลล์/ดีใน 96 หลุม microplates ได้รับการกกตลอด 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 ° C เพื่อให้ติดบนแผ่นเซลล์ สื่อวัฒนธรรมถูกละทิ้ง แล้วเพิ่มความเข้มข้นแตกต่างกันสดปานกลางวัฒนธรรมอยู่ของสารสกัด และรับการกก 24 ชม เข้มข้นยับยั้ง 50% (IC50) ถูกกำหนด โดยวิธี MTT สั้น ๆ กลางเซลล์บำบัดแก้ไขออก แล้วเพิ่ม μL 100 ขนาดกลางที่ประกอบด้วย 0.5 mg/mL MTT ไปดีละกัน หลังจากบ่มที่ 37 ° C ด้วยตู้อบ 5% CO2 สำหรับ 4 h, μL 100 ของ 10% SDS แก้ไขเพิ่ม และผสมจะปล่อยสีม่วงจากเซลล์ กกไข่สุดท้ายดำเนินการอีกครั้งในมืดสำหรับ 24 ชั่วโมง ก่อนโดยวัดความหนาแน่นออปติคัลที่ 570 nm ใช้ ELISA อ่าน (Sadeghi-aliabadi et al. 2008 Heny et al. 2012)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เซลล์ A549 ต่อเนื่องได้รับการเจริญเติบโตในอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีขนาดกลาง DMEM 10% FBS และ 1% ยาปฏิชีวนะปากกา Strep และบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสในศูนย์บ่มเพาะความชื้น 5% CO2 เซลล์ A549 ไหลมารวมกันถูก tripsinized และเมล็ดที่ 5 × 104 เซลล์ / ดีใน 96 หลุม microplates บ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 ° C ถึงได้รับอนุญาตมือถือที่แนบมาใส่จาน แล้วสื่อวัฒนธรรมที่ถูกทิ้งและวัฒนธรรมกลางสดที่มีความเข้มข้นแตกต่างกันของสารสกัดที่ถูกเพิ่มและบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ความเข้มข้นของการยับยั้ง 50% (IC50) ถูกกำหนดโดยวิธี MTT สั้น ๆ กลางของเซลล์ที่ได้รับการรักษาจะถูกลบออกแล้ว 100 ไมโครลิตรของกลางที่มี 0.5 mg / ml MTT ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละดี หลังจากการบ่มที่อุณหภูมิ 37 ° C มีศูนย์บ่มเพาะ CO2 5% เป็นเวลา 4 ชั่วโมง 100 ไมโครลิตร 10% SDS ถูกบันทึกและผสมที่จะปล่อยสีม่วงออกมาจากเซลล์ บ่มล่าสุดได้ดำเนินการอีกครั้งในที่มืดเป็นเวลา 24 ชั่วโมงก่อนที่ความหนาแน่นของแสงวัดที่ 570 นาโนเมตรโดยใช้วิธี ELISA อ่าน (Sadeghi-aliabadi et al, 2008.. Heny et al, 2012)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เซลล์ a549 อย่างต่อเนื่องเติบโตในวัฒนธรรมอาหารที่มี dmem ปานกลาง 10% FBS และ 1% เป็น Strep ยาปฏิชีวนะและบ่มที่ 37 ° C ใน humidified ฟักไข่ด้วยคาร์บอนไดออกไซด์ 5% กระจู๋กระจี๋ a549 เซลล์ tripsinized และเมล็ดที่ 5 × 104 เซลล์ / ดีใน 96 ดี microplates บ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 ° C เพื่อให้เซลล์แนบลงบนจาน แล้วสื่อวัฒนธรรมถูกทิ้งและสื่อวัฒนธรรมสดมีความเข้มข้นที่แตกต่างกันของสารสกัดและบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมง พบว่า ความเข้มข้น 50% ( ic50 ) ถูกกำหนดโดยวิธี MTT . สั้น ๆ , ปานกลางในการรักษาเซลล์ออก จากนั้นμ 100 ลิตร BAP ความเข้มข้น 0.5 mg / ml MTT ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละครั้งได้อีกด้วย หลังจากบ่มที่ 37 ° C 5% CO2 Incubator 4 h 100 μผม 10% SDS คือเพิ่มและผสมตัวม่วง จากเซลล์ เมื่อบ่มแสดงอีกครั้งในที่มืดเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ก่อนทำการวัดความหนาแน่นของแสงที่ 570 nm ใช้เครื่องอ่านอีไล ( Sadeghi aliabadi et al . 2008 ; heny et al . 2012 )