ifty plants of 60 day-old cole (Zhe

ifty plants of 60 day-old cole (Zheyou No. 18) or rice (Ezhong
No. 5) were collected from the crop field rotated by rice and cole.
Five gram of the stems and leaves were cut into pieces (1 cm).
The fragments were surface-sterilized by soaking in 75% ethanol
for 1 min, and in 0.1% mercuric chloride (leaves for 2 min, stems
for 4 min). They were washed several times in sterile water,
transferred to an autoclaved mortar, and homogenized with
a mixture of quartz sand and sterile water. An aliquot (100 ml) of
the homogeneous suspension was spread on sterile potato
dextrose agar (PDA), and incubated at 27 C. After incubation for
48 h, single colonies were picked up and tested their inhibiting
activity against fungal pathogens. Among seven endophytic
isolates, only strain CHM1 significantly (p < 0.01) inhibited
growth of six species of fungal pathogens in vitro, as mentioned
in Section 2.1.
The culture solution of CHM1 was prepared by shaking LB liquid
culture at 30 C, 170 rpm for 36 h. It was further centrifuged at
6000  g for 5 min at 4 C and the supernatant collected and
passed through a 0.22-mm filter, yielding CHM1 culture filtrate. The
sterile culture filtrate was obtained by autoclaving the resultant
culture filtrate at 121 C for 30 min.The effects in vitro of CHM1 on mycelial growth inhibition of
plant pathogens were studied according to the method reported
by Leroux et al. (2002). Two ml of CHM1 culture solution, culture
filtrate or sterile culture filtrate were spread on 18 ml of PDA
medium. Three 5.0 mm diameter mycelial plugs, cut randomly
from the margin of a 5 day-old colony, and a plug, containing only
2 ml LB agar as negative control, were placed on a medium on
which one of six fungi was spread. Each experiment was conducted
in triplicate and the experimental design was a CRD.
Eighteen of these Petri dishes were sealed with parafilm and
incubated at 27 C in darkness. The radial growth of mycelia (cm)
was measured in two perpendicular directions on each cultured plate after 48 h of incubation, and the diameter (0.5 cm) of the
inoculation plug was subtracted. The resultant data were averaged.
The antifungal index was determined in comparison with
growth on non-amended medium, and calculated by the
following formula

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ifty พืชเก่าโคล (Zheyou หมายเลข 18) หรือข้าว (Ezhong 60หมายเลข 5) ได้รวบรวมจากฟิลด์ครอบตัดหมุนข้าวและโคลกรัม 5 ของลำต้นและใบถูกตัดเป็นชิ้น (1 ซม.)ชิ้นส่วนถูก sterilized ผิว โดยแช่ในเอทานอล 75%1 นาที และ 0.1% mercuric คลอไรด์ (ใบไม้ใน 2 นาที ลำใน 4 นาที) พวกเขาถูกล้างหลายครั้งในการฆ่าเชื้อน้ำโอนย้ายไปครก autoclaved และ homogenized เป็นกลุ่มด้วยส่วนผสมของควอตซ์ทราย และใส่น้ำ เป็นส่วนลงตัว (100 มล.) ของการระงับเหมือนได้แพร่กระจายไปบนมันฝรั่งใส่ขึ้น agar (PDA), และ incubated ที่ c. 27 หลังจากบ่มใน48 h เดียวอาณานิคมได้รับ และทดสอบของ inhibitingกิจกรรมต่อต้านโรคเชื้อรา ระหว่างเจ็ด endophyticล เฉพาะสายพันธุ์ CHM1 อย่างมีนัยสำคัญ (p < 0.01) ห้ามเจริญเติบโตของโรคเชื้อราในการเพาะเลี้ยง ตาม 6 ชนิดในส่วน 2.1การแก้ปัญหาวัฒนธรรมของ CHM1 ถูกเตรียม โดยการสั่นของเหลวปอนด์วัฒนธรรมที่ 30 C, rpm 170 สำหรับ 36 h เพิ่มเติมถูก centrifuged ที่g 6000 ใน 5 นาทีที่ 4 C และ supernatant รวบรวม และผ่านตัวกรอง$ 0.22 มม. ผลผลิตสารกรองวัฒนธรรม CHM1 ที่วัฒนธรรมใส่สารกรองกล่าว โดย autoclaving resultant การวัฒนธรรมสารกรองที่ 121 C สำหรับ 30 นาทีผลการเพาะเลี้ยงของ CHM1 ในการยับยั้งการเจริญเติบโต mycelialมีศึกษาโรคพืชตามวิธีการรายงานโดย Leroux et al. (2002) Ml สองของ CHM1 วัฒนธรรม วัฒนธรรมสารกรองหรือวัฒนธรรมใส่สารกรองได้แพร่กระจายใน 18 ml ของ PDAสื่อ สาม 5.0 มม.เส้นผ่าศูนย์กลาง mycelial ปลั๊ก ตัดแบบสุ่มจากขอบของโคโลนีเก่า 5 และปลั๊ก ประกอบด้วยเท่านั้นagar ml 2 ปอนด์เป็นค่าลบควบคุม ใส่ในสื่อในการที่หนึ่งของเชื้อราที่หกถูกแพร่กระจาย ได้ดำเนินการทดลองแต่ละใน triplicate และการออกแบบการทดลองเป็นแบบ CRDเอททีน Petri อาหารเหล่านี้ได้ถูกปิดผนึก ด้วย parafilm และincubated ที่ 27 C ในที่มืด การเติบโตรัศมีของ mycelia (ซม.)ถูกวัดในทิศทางตั้งฉากทั้งสองในแต่ละจานอ่างหลัง 48 h ของคณะทันตแพทยศาสตร์ และเส้นผ่าศูนย์กลาง (0.5 เซนติเมตร) ของการปลั๊ก inoculation ถูกลบออก ข้อมูลผลแก่มี averagedกำหนดเปรียบเทียบกับดัชนีต้านเชื้อราเจริญเติบโตในการแก้ไขไม่ใช่กลาง และที่คำนวณได้โดยการสูตรต่อไปนี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

พืช ifty 60 วันเก่าโคล (Zheyou ฉบับที่ 18) หรือข้าว (Ezhong
ฉบับที่ 5) ที่ถูกเก็บรวบรวมจากสนามพืชหมุนโดยข้าวและโคล.
ห้ากรัมของลำต้นและใบที่ถูกตัดเป็นชิ้น (1 ซม.)
ชิ้นส่วนที่ถูกผิวฆ่าเชื้อโดยการแช่ในเอทานอล 75%
เป็นเวลา 1 นาทีและใน 0.1% คลอไรด์เมอร์คิว (ใบสำหรับ 2 นาทีลำต้น
4 นาที) พวกเขาถูกล้างหลายครั้งในน้ำหมัน
โอนไปปูนอิฐและหดหายด้วย
ส่วนผสมของทรายและน้ำหมัน aliquot (100 มล.) ของ
ระบบกันสะเทือนที่เป็นเนื้อเดียวกันได้รับการแพร่กระจายบนมันฝรั่งผ่านการฆ่าเชื้อ
วุ้นเดกซ์โทรส (PDA) และบ่มที่อุณหภูมิ 27 องศาเซลเซียส หลังจากการบ่มสำหรับ
48 ชั่วโมงอาณานิคมเดียวถูกหยิบขึ้นมาและผ่านการทดสอบของพวกเขายับยั้ง
การต่อต้านเชื้อโรคเชื้อรา ในหมู่เจ็ดเอนโดไฟต์
ไอโซเลทเพียงสายพันธุ์ CHM1 อย่างมีนัยสำคัญ (p <0.01) ยับยั้ง
การเจริญเติบโตของหกสายพันธุ์ของเชื้อโรคเชื้อราในหลอดทดลองดังกล่าว
ในมาตรา 2.1.
การแก้ปัญหาวัฒนธรรมของ CHM1 ถูกจัดทำขึ้นโดยการเขย่า LB ของเหลว
วัฒนธรรมวันที่ 30? C, 170 รอบต่อนาที 36 ชั่วโมง มันถูกปั่นเพิ่มเติมได้ที่
6000 กรัมเป็นเวลา 5 นาทีที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสและใสเก็บรวบรวมและ
ส่งผ่านตัวกรอง 0.22 มมยอมกรองวัฒนธรรม CHM1
กรองวัฒนธรรมผ่านการฆ่าเชื้อได้จากการนึ่งฆ่าเชื้อผลลัพธ์
กรองวัฒนธรรมที่ 121 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 ผลกระทบ min.The ในหลอดทดลองของ CHM1 ในการยับยั้งการเจริญเติบโตของเส้นใยของ
เชื้อสาเหตุโรคพืชได้รับการศึกษาตามวิธีการที่มีการรายงาน
โดย Leroux และคณะ (2002) สองมิลลิลิตรของสารละลาย CHM1 วัฒนธรรม
กรองหรือกรองวัฒนธรรมผ่านการฆ่าเชื้อกระจายอยู่ใน 18 มิลลิลิตร PDA
กลาง สาม 5.0 มมปลั๊กเส้นใยเส้นผ่าศูนย์กลางตัดสุ่ม
จากขอบของอาณานิคม 5 วันเก่าและปลั๊กที่มีเพียง
2 มิลลิลิตร LB agar การควบคุมเชิงลบถูกวางไว้บนกลางบน
ซึ่งหนึ่งในหกของเชื้อรากระจาย แต่ละการทดลองดำเนินการ
ในเพิ่มขึ้นสามเท่าและการออกแบบการทดลองเป็น CRD.
สิบแปดของเหล่านี้จานเลี้ยงเชื้อถูกปิดผนึกด้วย parafilm และ
บ่มที่อุณหภูมิ 27 องศาเซลเซียสในความมืด การเจริญเติบโตในแนวรัศมีจากเส้นใย (ซม.)
วัดในสองทิศทางตั้งฉากในแต่ละจานเพาะเลี้ยงหลังจาก 48 ชั่วโมงของการบ่มและเส้นผ่าศูนย์กลาง (0.5 ซม.) ของ
ปลั๊กฉีดวัคซีนมาหักออก ข้อมูลผลถูกเฉลี่ย.
ดัชนีเชื้อราถูกกำหนดในการเปรียบเทียบกับ
การเจริญเติบโตในสื่อที่ไม่ได้แก้ไขเพิ่มเติมและคำนวณโดย
สูตรต่อไปนี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ifty พืช 60 วันเก่า โคล ( zheyou หมายเลข 18 ) หรือข้าว ( Ezhong
. 5 ) ถูกเก็บจากข้าวและพืชไร่หมุนโดยโคล .
5 กรัมของลำต้นและใบที่ถูกตัดเป็นชิ้น ( 1 ซม. )
ชิ้นส่วนถูกฆ่าเชื้อที่ผิวด้วยการแช่ในแอลกอฮอล์ 75 %
1 มิน และ 0.1% เมอร์คิวริกคลอไรด์ ( ใบสำหรับ 2 นาทีต้น
4 นาที ) พวกเขาล้างหลายครั้งในน้ำหมัน
ย้ายไปสังเคราะห์กับปูนและบด
ส่วนผสมของทรายควอตซ์และน้ำหมัน เป็นส่วนลงตัว ( 100 มล. ) ของการกระจายเป็นเนื้อเดียวกันได้

งาน Potato Dextrose Agar ( PDA ) และบ่มที่อุณหภูมิ 27 องศาเซลเซียสจากการทดสอบ 
48 ชั่วโมง อาณานิคมเดียวถูกหยิบขึ้นมาและการทดสอบของพวกเขายับยั้ง
กิจกรรมต่อต้านเชื้อราเชื้อโรค ราเอนโดไฟต์ที่แยกระหว่าง 7
,แต่เมื่อย chm1 อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ ( p < 0.01 ) สามารถยับยั้งการเจริญเติบโตของเชื้อรา
6 ชนิดก่อโรคในหลอดทดลอง ตามที่กล่าวไว้ในมาตรา ๑
.
วัฒนธรรมการแก้ไข chm1 เตรียมเขย่าอาหารเหลว
ปอนด์ใน 30  C 170 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 36 ชั่วโมงมันก็อีกระดับที่
6000  G สำหรับ 5 นาที ที่ 4  C และนำข้อมูล
ผ่านแผ่นกรองกรอง 0.22-mm , วัฒนธรรม chm1 .
วัฒนธรรมการเป็นหมันโดยนำ้หนักอัตราส่วนโฟกัสวัฒนธรรม
ที่ 121  C เป็นเวลา 30 นาที ผลในหลอดทดลองของ chm1 ต่อการยับยั้งการเจริญของเชื้อโรคพืช
ศึกษาตามวิธีการรายงาน
โดยเลอรู et al . ( 2002 ) 2 มิลลิลิตรของสารละลาย chm1 วัฒนธรรม วัฒนธรรมจากวัฒนธรรมหรือเป็นหมันโดย
ถูกแพร่กระจายใน 18 ml ของ PDA
) 3 50 มม. เส้นผ่าศูนย์กลางของปลั๊ก , ตัดสุ่ม
จากขอบของ 5 วันอาณานิคมเก่าและปลั๊ก ที่มีเพียง
2 ml ปอนด์วุ้นควบคุมลบ ถูกวางไว้บนกลางบน
ซึ่งหนึ่งในหกราถูกแพร่กระจาย แต่ละการทดลอง
ทั้งสามใบ และใช้แผนการทดลองแบบ CRD .
18 จาน Petri เหล่านี้ถูกผนึกด้วยพาราฟิล์มและ
 บ่มที่อุณหภูมิ 27 องศาเซลเซียสในที่มืดการเจริญเติบโตของเส้นใยแบบเรเดียล ( ซม. )
วัดในสองทิศทางตั้งฉากกับแต่ละแผ่นหลังเพาะบ่ม 48 ชั่วโมง และขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 0.5 ซม. )
( เสียบถูกหักออก ข้อมูลดังกล่าวได้จากเชื้อรา .
ดัชนีถูกกำหนดในการเปรียบเทียบกับการไม่แก้ไข

) และคำนวณด้วยสูตรต่อไปนี้