Five microliters of this solution w

Five microliters of this solution was used for PCR amplification. After agarose gel electrophoresis, the PCR-amplified fragments were transferred to GeneScreen Plus (Dupont, Boston, Mass.) with a vacuum blotter (Pharmacia, Woerden, Holland). Prehybridization and hybridization were performed in 0.5 M sodium phosphate buffer (pH 7.2) containing 3% sodium dodecyl sulfate and 1% bovine serum albumin. After 30 min of prehybridization at 40°C, the probe, which had been 5'-end labeled with [.y-32P]ATP (Radiochemical Centre, Amersham, England), was added and the incubation was continued for 4 h. The blots were washed with 0.3 M NaCl-0.03 M sodium citrate at 37°C until a clear signal was found and then were exposed to Kodak X-ray films. Figure 2 shows that it is possible to identify and discriminate various Lactococcus strains with DNA probes that are based on the highly variable Vl region. The specificity of these probes was tested on some closely related LAB (Table 2). The PLl1 probe did not give a signal with L. lactis subsp.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Microliters ห้าของโซลูชันนี้ใช้สำหรับขยาย PCR หลัง agarose เจ electrophoresis ชิ้นส่วนขยาย PCR ได้แล้วกับ GeneScreen พลัส (ดูปองท์ บอสตัน มวล.) พร้อมดูดซึมเครื่องดูดฝุ่น (Pharmacia, Woerden ฮอลแลนด์) Prehybridization และ hybridization ได้ดำเนินการใน 0.5 M โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.2) มี 3% โซเดียม dodecyl ซัลเฟตและ 1% วัว serum albumin หลังจาก 30 นาทีของ prehybridization ที่ 40° C โพรบ ซึ่ง 5' สิ้นเพิ่มป้ายด้วย [.y - 32P] ATP (ศูนย์ Radiochemical, Amersham อังกฤษ), และคณะทันตแพทยศาสตร์ที่มีต่อสำหรับ 4 h กันบล็อทถูกล้าง ด้วย 0.3 M NaCl-0.03 M โซเดียมซิเตรตที่ 37° C จน กว่าสัญญาณชัดเจนพบแล้ว ได้สัมผัสกับฟิล์มโกดักเอ็กซ์เรย์ รูปที่ 2 แสดงว่า คุณจะสามารถระบุ และเหยียดสายพันธุ์ Lactococcus ต่าง ๆ ด้วยคลิปปากตะเข้ดีเอ็นเอที่มีภูมิภาค Vl สูงตัวแปร Specificity ของคลิปปากตะเข้เหล่านี้ได้รับการทดสอบในบางห้องปฏิบัติการที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิด (ตาราง 2) โพรบ PLl1 ไม่ได้ให้สัญญาณกับ L. lactis ถั่ว

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ห้า microliters ของการแก้ปัญหานี้ใช้สำหรับการขยาย PCR หลังจากข่าวคราว agarose ที่ PCR-ขยายเศษถูกย้ายไป GeneScreen พลัส (Dupont, บอสตัน, Mass.) ที่มีการสูญญากาศกระดาษซับหมึก (ที่ Pharmacia, เวอร์เดน, ฮอลแลนด์) Prehybridization และผสมพันธุ์ได้ดำเนินการใน 0.5 M โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.2) ที่มีโซเดียมโดเดซิลซัลเฟต 3% และ 1% ซีรั่มอัลบูมิวัว หลังจาก 30 นาที prehybridization ที่ 40 องศาเซลเซียสการสอบสวนที่ได้รับ 5'-end ที่กำกับด้วย [.y-32P] เอทีพี (radiochemical ศูนย์ Amersham อังกฤษ) ได้รับการเพิ่มและการบ่มได้อย่างต่อเนื่องเป็นเวลา 4 ชั่วโมง blots ถูกล้างด้วยโซเดียมคลอไรด์ 0.3 M-0.03 M โซเดียมซิเตรทที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสจนสัญญาณที่ชัดเจนถูกพบแล้วได้สัมผัสกับโกดักฟิล์มเอ็กซ์เรย์ รูปที่ 2 แสดงให้เห็นว่ามันเป็นไปได้ที่จะระบุและแยกแยะสายพันธุ์ Lactococcus ต่างๆที่มีดีเอ็นเอโพรบที่ขึ้นอยู่กับภูมิภาค Vl ตัวแปร ความจำเพาะของยานสำรวจเหล่านี้ได้รับการทดสอบในบางส่วนเกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิด LAB (ตารางที่ 2) สอบสวน PLl1 ไม่ได้ให้สัญญาณกับ L. lactis subsp

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ห้าตัวเลขของโซลูชั่นนี้ใช้เทคนิคขยาย . หลังจากเจลอิเลคโตรโฟรีซีส , ชิ้นส่วนของดีเอ็นเอที่ถูกโอนไปยัง genescreen พลัส ( Dupont , บอสตัน , มวล . ) กับเครื่องดูดฝุ่นดูดซึม ( มุ่งมั่น Woerden , ฮอลแลนด์ ) และมีการปฏิบัติใน prehybridization ( 0.5 M โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 72 ) ที่มี 3 % โซเดียมโดเดซิลซัลเฟตและ 1% อัลบูมินและเซรั่ม หลังจาก 30 นาทีของ prehybridization ที่ 40 ° C , การสอบสวน ซึ่งมี 5 ' - จบข้อความด้วย [ . y-32p ] เอทีพี ( radiochemical ศูนย์ , ชาม , อังกฤษ ) , เพิ่มและบ่มเพาะได้ อย่างต่อเนื่อง 4 . blots ถูกล้างด้วย 0.3 M nacl-0 .03 M โซเดียมซิเตรตที่ 37 ° C จนกระทั่งสัญญาณชัดเจน พบแล้วมีการเปิดรับ KODAK ฟิล์มเอ็กซเรย์ . รูปที่ 2 แสดงให้เห็นว่ามันเป็นไปได้ที่จะระบุและจำแนกสายพันธุ์แลคโตค คัสต่างๆที่มี DNA probes ที่ขึ้นอยู่กับตัวแปรอย่างสูง 6 ภูมิภาค ความจำเพาะของ probes เหล่านี้ได้รับการทดสอบในแล็บที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิด ( ตารางที่ 2 ) การ pll1 สอบสวนไม่ได้ให้สัญญาณกับ L
lactis subsp .