Isolation of DNP-resistant sake yeast mutants The sake yeast strain K901
was used as a parental strain for isolation of DNP-resistant mutants. The strain K901
was cultured in 5 ml of YPD medium [20 g/L (w/v) glucose, 20 g/L (w/v) polypeptone,
and 10 g/L (w/v) yeast extract] at 30C for 24 h. The cultured yeast cells were
collected by centrifugation at 5800 g for 1 min and washed twice with distilled
water. Then, the collected cells were adjusted to OD660 nm ¼ 1.0, and 100 ml of cell
suspension was spread onto minimum medium [20 g/L (w/v) glycerol, 6.7 g/L (w/v)
yeast nitrogen base without amino acids] containing 0.1 mM DNP because the
minimum inhibitory concentration of DNP in the medium is 0.08 mM. The plates
were irradiated using a CX-2000 UV-cross linker (UVP, LLC, Upland, CA, USA). The
irradiation level was determined as 2.0 104 mJ/cm2 with a 99.8% death rate. As a
consequence of UV mutagenesis, 90 DNP-resistant sake yeasts were obtained by
incubation for 3 days at 30C.
การแยกยีสต์สายพันธุ์ เพื่อร่วมป้องกันสาเกยีสต์สายพันธุ์ k901
ถูกใช้เป็นสายพันธุ์แม่แยกสายพันธุ์ทน 2553 สายพันธุ์ k901
เลี้ยงใน 5 มล. ypd ขนาดกลาง [ 20 g / l ( w / v ) กลูโคส 20 กรัมต่อลิตร ( w / v ) polypeptone
, 10 g / l ( w / v ) สารสกัดจากยีสต์ ] 30 C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ยีสต์เซลล์เพาะเลี้ยงมี
รวบรวมโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 5800 กรัม ต่อ 1 นาที และล้างด้วยน้ำกลั่นสองครั้ง
น้ำ แล้วรวบรวมเซลล์มีการปรับ od660 nm ¼ 1.0 , และ 100 ml ของเซลล์
ระงับได้กระจายลงบนขั้นกลาง [ 20 g / l ( w / v ) กลีเซอรอล 6.7 g / L ( w / v )
ยีสต์ไนโตรเจนเบสไม่มีกรดอะมิโน ] ที่มี DNP 0.1 mm เพราะ
การแสดงนิทรรศการ 2553 ในระดับคือ 0.08 มิลลิเมตร จาน
คือการฉายรังสี UV ใช้ cx-2000 ข้ามสนามกอล์ฟ ( uvp , LLC , ไร่ , CA , USA )
ระดับรังสีถูกกำหนดเป็น 2.0 104 MJ / cm2 ที่มีอัตราตายคาด . ผลของการกลายพันธุ์เป็น
UV 90 DNP ทนสาเกยีสต์ที่ได้จาก
บ่มเป็นเวลา 3 วัน ที่ 30
C
การแปล กรุณารอสักครู่..
