Six concentrations 100, 50, 25, 12.

Six concentrations 100, 50, 25, 12.5, 6.25, and 3.125 %(v/v effluent/distilled water) of the effluent were considered together with 20 % dimethyl sulfoxide (DMSO) and distilled water as positive and negative control.
Single-cell gel electrophoresis (SCGE) was adopted to perform the assay as described by Tice et al.
with slight modifications (Tice et al. 2000).
Lymphocytes (2×105) exposed to effluent were allowed to mix with low melting point agarose (LMPA).
The cells were placed in the cavity of a decreased slide previously dipped and filled with 1 %normal melting point agarose (NMPA).
Eighty-five microliters of LMPA was layered on the top and slides were positioned in lysing solution of pH 10 at 4 °C in a dark place for 10 h.
DNA unwinding was done by setting the slides in alkaline buffer solution of pH>13 to express the DNA damage.
The damaged DNA was allowed to unwind by placing the slides in electrophoresis buffer giving a voltage of 24 V, 300 mA for 30 min.
Slides were neutralized to remove alkali and detergent. Slides were stained with 70 μL ethidium bromide followed by washing to remove excessive stain.
The samples were examined under fluorescent microscope at 400×. Fifty cells per each of three replicates were captured.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

หกความเข้มข้น 100, 50, 25, 12.5, 6.25 และ 3,125% (v/v น้ำกลั่นน้ำ) น้ำ 20% dimethyl sulfoxide (DMSO) ร่วมกับการพิจารณาว่า และกลั่นน้ำควบคุมบวก และลบ อิเจเซลล์เดียว (SCGE) ถูกนำมาใช้เพื่อทำการทดสอบตามที่อธิบายไว้โดยผ่าน et al การแก้ไขเล็กน้อย (ผ่าน et al. 2000) เซลล์เม็ดเลือดขาว (2 × 105) สัมผัสกับน้ำได้รับอนุญาตให้ผสมกับจุดหลอมเหลวต่ำ agarose (LMPA) เซลล์ถูกวางไว้ในช่องของภาพนิ่งลดลงจุ่มลงก่อนหน้านี้ และเต็มไป ด้วย agarose จุดหลอมเหลวปกติ 1% (NMPA) แปดสิบห้า microliters ของ LMPA เป็นชั้นด้านบน และภาพนิ่งที่ถูกวางในก lysing ของ pH 10 ที่ 4 ° C ในมืดสำหรับ 10 ชม ดีเอ็นเอคลายทำ โดยการตั้งค่าภาพนิ่งในสารละลายด่างบัฟเฟอร์ pH > 13 แสดงความเสียหายของดีเอ็นเอ ดีเอ็นเอเสียหายได้รับอนุญาตให้ผ่อนคลาย โดยการวางภาพนิ่งในบัฟเฟอร์อิให้แรงดันไฟฟ้า 24 V, 300 mA 30 นาที ภาพนิ่งถูก neutralized เอาด่างและผงซักฟอก ภาพนิ่งถูกย้อม ด้วยโบรไมด์ ethidium μL 70 ตาม ด้วยล้างเพื่อเอาคราบมากเกินไป ตัวอย่างตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์ที่ 400 × เซลล์ 50 ต่อละเหมือนกับสามถูกยึด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

หกความเข้มข้น 100, 50, 25, 12.5, 6.25 และ 3.125% (v / V น้ำทิ้ง / น้ำกลั่น) ของน้ำทิ้งได้รับการพิจารณาร่วมกับ 20% dimethyl sulfoxide (DMSO) และน้ำกลั่นเป็นตัวควบคุมบวกและลบ
เซลล์เดียว gel electrophoresis (SCGE) ถูกนำมาใช้ในการดำเนินการทดสอบตามที่อธิบาย Tice et al,
มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย (Tice et al. 2000)
เซลล์เม็ดเลือดขาว (2 × 105) สัมผัสกับน้ำทิ้งได้รับอนุญาตให้ผสมกับ agarose จุดหลอมเหลวต่ำ (LMPA)
เซลล์ที่ถูกวางไว้ในโพรงสไลด์ลดลงลดลงก่อนหน้านี้และเต็มไปด้วย 1% agarose จุดหลอมเหลวปกติ (NMPA)
แปดสิบห้าไมโครลิตรของ LMPA ถูกชั้นบนและภาพนิ่งอยู่ในตำแหน่งในการแก้ปัญหา lysing ค่า pH 10 ใน 4 องศาเซลเซียสในที่มืดเป็นเวลา 10 ชั่วโมง
คลี่คลายดีเอ็นเอที่ได้กระทำโดยการตั้งค่าภาพนิ่งในสารละลายบัฟเฟอร์ด่างค่า pH> 13 ในการแสดงความเสียหายของดีเอ็นเอ
ดีเอ็นเอที่เสียหายได้รับอนุญาตให้ผ่อนคลายโดยการวางภาพนิ่งในบัฟเฟอร์อิเล็กให้แรงดันไฟฟ้าของ 24 V ที่ 300 มิลลิแอมป์เป็นเวลา 30 นาที
สไลด์ถูกเป็นกลางในการลบอัลคาไลและผงซักฟอก สไลด์ถูกย้อมด้วยสี 70 ไมโครลิตรโบรไมด์ ethidium ตามด้วยการซักผ้าที่จะลบคราบมากเกินไป
กลุ่มตัวอย่างที่มีการตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสงที่ 400 × ห้าสิบเซลล์ต่อแต่ละสามถูกจับซ้ำ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

6 , 100 , 50 , 25 , 12.5 , 6.25 และ 3.125 % ( ปริมาตร / ปริมาตรน้ำ / น้ำ ) ของน้ำที่กำลังพิจารณาร่วมกับ 20% เต๊ะ ( DMSO ) และน้ำกลั่นเป็นตัวควบคุมบวกและลบเซลล์อิเล็กเดียว เจล ( scge ) เป็นลูกบุญธรรมเพื่อทำการทดสอบตามที่อธิบายไว้โดยไทซ์ et al .กับการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ( ไทซ์ et al . 2000 )ลิมโฟซัยต์ ( 2 × 105 ) สัมผัสกับน้ำให้ละลายผสมกับจุดตกต่ำ , ( lmpa )เซลล์อยู่ในโพรงของภาพนิ่งก่อนหน้านี้ลดลงจุ่มและเต็มไปด้วย 1% ปกติจุดหลอมเหลว ( ( nmpa )แปดสิบห้าตัวเลขของ lmpa เป็นชั้นด้านบนและภาพนิ่งที่ถูกวางในสารละลาย pH 10 ต่อ 4 °องศาเซลเซียสในที่มืดเป็นเวลา 10 ชั่วโมงดีเอ็นเอคลี่คลายได้ โดยการตั้งค่าสไลด์ในด่างสารละลายบัฟเฟอร์ pH > 13 แสดงความเสียหายของดีเอ็นเอความเสียหายของดีเอ็นเอได้รับอนุญาตที่จะผ่อนคลายโดยการวางสไลด์ในบัฟเฟอร์เรสให้แรงดันไฟฟ้าของ 24 V , 300 มาเป็นเวลา 30 นาทีภาพนิ่งเป็นแล้วเอาด่างและผงซักฟอก ภาพนิ่งที่ถูกย้อมด้วยสีμทิเดียมโบรไมด์ 70 L ตามด้วยล้างเอาคราบที่มากเกินไปจำนวนการตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสงที่ 400 × . 50 เซลล์ต่อทั้ง 3 แบบที่ถูกจับ