The extraction processes were carri

The extraction processes were carried out as recommended by the manufacturer.
Templates were tested further for concentration and purity with a spectrophotometer (Eppendorf, Germany).
The primer sequences used in the present work were previously reported by .
The primers for the first-round PCR were WSSV1 out: 5 ATCATGGCTGCTTCA CAGAC 3 and WSSV2 out: 5 GGCTGGAGAGGACAAGACAT 3 and for the second-round of amplification (the inner primers)WSSV1 in: 5 TCT
TCATCAGAT GCTACTGC 3 and WSSV2 in: 5 TAACGCTATCCAGTATCACG 3.
The expected size of the amplified fragment was 982 bp for the first-round PCR reaction and 570 bp for the second-round
PCR.
The PCR reactions were carried out in a final volume of 30 l
containing 5 ltemplate DNA, 3 l 10× STR buffer (including dNTP,
Mg2+, Promega, USA), 0.2 l Taq DNA polymerase, 2 l primers mix
(2 M) and 19.8 l sterile water. In the first-round PCR, 3 ng of target DNA were used. For the second-round PCR, 1 l of a 1:100
dilution of the first-round PCR product was used as target DNA.
Amplifications were performed starting with a 4 min denaturation
step at 95 ◦C, followed by 40 cycles of denaturation at 95 ◦C
for 1 min, annealing at 55 ◦C for 30 s, extension at 72 ◦C for 1 min,
and final extension at 72 ◦C for 5 min. The amplified products were
detected by using a 1.5% agarose gel followed by UV visualization
after ethidium bromide staining.
2.4. S

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กระบวนการสกัดถูกดำเนินการแนะนำ โดยผู้ผลิต แบบทดสอบความเข้มข้นและความบริสุทธิ์กับสเปค (Eppendorf เยอรมนี)ลำดับไพรเมอร์ที่ใช้ในการทำงานที่ปัจจุบันมีรายงานก่อนหน้านี้โดย ไพรเมอร์สำหรับ PCR รอบแรกถูก WSSV1 ออก: 5 ATCATGGCTGCTTCA CAGAC 3 และ WSSV2 ออก: 5 GGCTGGAGAGGACAAGACAT 3 และ รอบสองของขยาย (ไพรเมอร์ภายใน) WSSV1 ใน: 5 TCTTCATCAGAT GCTACTGC 3 และ WSSV2 ใน: 5 TAACGCTATCCAGTATCACG 3 ขนาดที่คาดของส่วนขยายถูก 982 bp สำหรับปฏิกิริยา PCR รอบแรกและ 570 bp สำหรับรอบสองPCR ปฏิกิริยา PCR ได้ดำเนินการในปริมาณสุดท้ายของ 30 lที่ประกอบด้วย 5 ltemplate ดีเอ็นเอ 3 l 10 × STR บัฟเฟอร์ (dNTP รวมทั้งMg2 + Promega สหรัฐอเมริกา), 0.2 l Taq DNA พอลิเมอเรส ไพรเมอร์ 2 ลิตรผสม(2 เมตร) และ 19.8 ลิตรผ่านการฆ่าเชื้อ ในรอบแรก PCR, 3 ฉบับของเป้าหมายดีเอ็นเอถูกนำมาใช้ สำหรับ PCR รอบสอง 1 ลิตรเป็น 1: 100เจือจางผลิตภัณฑ์ PCR รอบแรกถูกใช้เป็นดีเอ็นเอเป้าหมายAmplifications ดำเนินการเริ่มต้น ด้วยการแปรสภาพ 4 นาทีขั้นตอนที่ 95 ◦C ตาม ด้วยรอบ 40 ของการแปรสภาพที่ 95 ◦C1 นาที หลอมที่ ◦C 55 30 s นามสกุลที่ ◦C 72 1 นาทีและสุดท้ายขยายที่ ◦C 72 5 นาที ผลิตภัณฑ์ขยายตรวจพบ โดยใช้ 1.5% agarose เจลตาม ด้วยการแสดง UVหลังจากย้อมโบรไมด์ ethidium2.4. S

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กระบวนการสกัดได้ดำเนินการตามคำแนะนำของผู้ผลิต.
แม่ได้มีการทดสอบต่อไปสำหรับความเข้มข้นและความบริสุทธิ์ด้วย spectrophotometer (Eppendorf, เยอรมนี).
ลำดับไพรเมอร์ที่ใช้ในการทำงานในปัจจุบันได้รับรายงานก่อนหน้านี้โดย.
ไพรเมอร์สำหรับรอบแรกวิธี PCR ถูก WSSV1 ออก: 5? ATCATGGCTGCTTCA CAGAC 3 หรือไม่? และ WSSV2 ออก: 5? GGCTGGAGAGGACAAGACAT 3 หรือไม่? และสำหรับรอบที่สองของการขยาย (ไพรเมอร์ด้านใน) ใน WSSV1: 5? TCT
TCATCAGAT GCTACTGC 3 หรือไม่? และใน WSSV2: 5? TAACGCTATCCAGTATCACG 3 ?.
ขนาดของชิ้นส่วนที่คาดว่าจะขยายเป็น 982 bp สำหรับรอบแรก PCR ปฏิกิริยาและ 570 bp สำหรับรอบที่สองที่
PCR.
ปฏิกิริยา PCR ได้ดำเนินการในปริมาณสุดท้ายของ 30 ลิตร
ที่มีดีเอ็นเอ 5 ltemplate 3 L 10 × STR บัฟเฟอร์ (รวม dNTP,
Mg2 + Promega, USA) 0.2 L Taq DNA Polymerase 2 ลิตรผสมไพรเมอร์
(2 เมตร) และ 19.8 ลิตรน้ำหมัน ในรอบแรก PCR 3 NG ดีเอ็นเอเป้าหมายถูกนำมาใช้ สำหรับรอบที่สอง PCR 1 ลิตร 1: 100
ลดสัดส่วนของผลิตภัณฑ์ PCR-รอบแรกถูกใช้เป็นดีเอ็นเอเป้าหมาย.
เครื่องขยายเสียงได้ดำเนินการเริ่มต้นด้วย denaturation 4 นาที
ขั้นตอนที่ 95 ◦Cตามด้วย 40 รอบของการสูญเสียสภาพธรรมชาติที่ 95 ◦C
เป็นเวลา 1 นาทีหลอมที่ 55 ◦Cเป็นเวลา 30 วินาทีส่วนขยายที่ 72 ◦Cเป็นเวลา 1 นาที
และการขยายสุดท้ายที่ 72 ◦Cเป็นเวลา 5 นาที ผลิตภัณฑ์ขยายถูก
ตรวจพบโดยใช้เจล agarose 1.5% ตามมาด้วยการสร้างภาพรังสียูวี
หลังจาก ethidium bromide ย้อมสี.
2.4 S