2.4. Inoculum preparationPrior to e

2.4. Inoculum preparation
Prior to each experiment replication, the frozen culture was streaked onto tryptic soy agar (TSA; Difco, Becton Dickinson, Sparks, MD, USA) with 50 μg/ml of NA (TSAN) and incubated at 37 °C for 24 h. All strains of E. coli O157:H7 and Salmonella were transferred to 10 ml of tryptic soy broth (TSB; Difco, Becton Dickinson) with 50 μg/ml of NA (TSBN) two times at 24-h intervals, incubated at 37 °C prior to their use as inocula. Each strain was subjected to centrifugation at 3000×g for 10 min (Allegra X-12, Beckman Coulter, Fullerton, CA, USA). The cells were washed two times by removing the supernatant and suspending the cell pellet in 10 ml of 0.1% peptone (Difco, Becton Dickinson). Washed cells were suspended in 0.1% peptone at half the original culture volume. Serial dilutions were carried out in 0.1% peptone (9 ml) to dilute E. coli O157:H7 and Salmonella inocula, and the population of each strain was enumerated on TSAN. Equal volumes (1 ml) of each E. coli O157:H7 strain or Salmonella serotype were combined to obtain final inoculum concentrations of 4, 6, and 8 log CFU/ml. Inocula were stored on ice for up to 1 h, prior to inoculating cut mangoes and papayas.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4 เตรียม inoculumก่อนแต่ละการทดลองจำลอง วัฒนธรรมแข็งเป็นลายบนถั่วเหลือง tryptic agar (TSA Difco, Becton สัน สปาร์ค MD สหรัฐอเมริกา) กับ μg 50 ml ของนา (TSAN) และ incubated ที่ 37 ° C ใน 24 ชม สายพันธุ์ทั้งหมดของ O157:H7 E. coli และสายถูกโอนย้ายไป 10 ml ของซุปถั่วเหลือง tryptic (TSB Difco, Becton สัน) กับ 50 μg/ml ของนา (TSBN) สองครั้งในช่วง 24-h, incubated ที่ 37 ° C ก่อนที่จะใช้เป็น inocula ต้องใช้แต่ละถูกยัดเยียดให้ centrifugation ที่ 3000 × g สำหรับ 10 นาที (Allegra X 12, Beckman Coulter ฟูลเลอร์ตัน CA, USA) เซลล์ถูกล้างครั้งที่สอง ด้วยการเอา supernatant ระงับเม็ดเซลล์ใน 10 ml ของ 0.1% peptone (Difco, Becton สัน) เซลล์หินถูกหยุดชั่วคราวใน 0.1% peptone ที่ครึ่งวัฒนธรรมไดรฟ์ข้อมูลต้นฉบับ Dilutions ประจำถูกดำเนินใน peptone 0.1% (9 ml) การ dilute E. coli O157:H7 และสาย inocula และประชากรของแต่ละต้องใช้ถูกระบุบน TSAN วอลุ่มเท่า (1 มล.) ของแต่ละความเครียด O157:H7 E. coli หรือ serotype ซัลได้รวมกันเพื่อให้ได้ความเข้มข้นของ inoculum ขั้นสุดท้ายของ 4, 6 และ 8 ล็อก CFU / ml. Inocula ถูกเก็บไว้ในน้ำแข็งถึง 1 h ก่อน inoculating มะม่วงตัดและ papayas

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 หัวเชื้อการเตรียมความพร้อมก่อนที่จะมีการทำแบบจำลองการทดลองแต่ละวัฒนธรรมแช่แข็งได้รับลายลงบนถั่วเหลือง tryptic วุ้น (TSA; Difco, Becton ดิกคินสันปาร์กส์, MD, USA) 50 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร NA (Tsan) และบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง .
ทุกสายพันธุ์ของเชื้อ E. coli O157: H7 และ Salmonella ถูกย้ายไป 10 มล. ของน้ำซุปถั่วเหลือง tryptic (TSB; Difco, Becton ดิกคินสัน) 50 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร NA (TSBN) สองครั้งในช่วงเวลา 24 ชั่วโมงบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศา C ก่อนที่จะมีการใช้งานของพวกเขาเป็น inocula แต่ละสายพันธุ์ก็จะถูกหมุนเหวี่ยงที่ 3000 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาที (Allegra X-12, Beckman Coulter, Fullerton, CA, USA) เซลล์ที่ถูกล้างครั้งที่สองโดยการเอาใสและระงับเม็ดเซลล์ใน 10 มิลลิลิตร 0.1% เปปโตน (ที่ Difco, Becton ดิกคินสัน) ล้างเซลล์ที่ถูกระงับใน 0.1% เปปโตนที่ครึ่งปริมาณวัฒนธรรมเดิม เจือจางอนุกรมได้ดำเนินการใน 0.1% เปปโตน (9 มล.) เจือจาง O157 เชื้อ E. coli: H7 และ Salmonella inocula และประชากรของแต่ละสายพันธุ์ที่ถูกระบุใน Tsan ปริมาณที่เท่ากัน (1 มล.) ของแต่ละเชื้อ E. coli O157: H7 หรือสายพันธุ์เชื้อ Salmonella serotype มารวมกันเพื่อให้ได้ความเข้มข้นของเชื้อสุดท้ายของ 4, 6, 8 และ log CFU / ml Inocula ถูกเก็บไว้บนน้ำแข็งได้นานถึง 1 ชั่วโมงก่อนที่จะฉีดวัคซีนมะม่วงและมะละกอตัด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . การเตรียมเชื้อ
ก่อนการทดลองแต่ละซ้ำ , แช่แข็งวัฒนธรรมเป็นลายบนวุ้นอาหารถั่วเหลือง ( TSA ; difco เบคตอน , ดิกคินสัน , ประกายไฟ , MD , USA ) กับ 50 μ g / ml ( tsan ) บ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ทุกสายพันธุ์ของเชื้ออีโคไล และเชื้อซัลโมเนลลาที่เป็นสมาชิก ) คือ 10 ml ของน้ำซุปถั่วเหลืองอาหาร difco ( TSB ; ,เบคตอน Dickinson ) กับ 50 μ g / ml ( tsbn ) 2 ครั้ง ในช่วงเวลา 24-h บ่มที่ 37 ° C ก่อนที่จะใช้เป็น inocula . แต่ละสายพันธุ์ก็ต้องปั่นที่ 3000 ×กรัมต่อ 10 นาที ( Allegra x-12 , เบคแมน คูลเตอร์ ฟูลเลอร์ตัน แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา ) เซลล์ก็ล้าง 2 ครั้ง โดยการเอานำพักงานเซลล์ เม็ด 10 ml 0.1% ( difco เบคตอน extract , ดิกคินสัน )ล้างเซลล์ที่ถูกระงับใน 0.1% เปปโตนที่ครึ่งหนึ่งเดิม วัฒนธรรม ปริมาณ ซีเรียลเจือจางได้ดําเนินการใน 0.1% ตามลำดับ ( 10 ml ) เจือจางเชื้อ E . coli Salmonella inocula เป็นสมาชิก ) และจำนวนประชากรของแต่ละสายพันธุ์ที่ระบุใน tsan . ปริมาณเท่ากับ ( 1 มล. ) ของแต่ละเชื้อ E . coli ) หรือซัลโมเนลลาสายพันธุ์เป็นสมาชิกหรือร่วมรับสุดท้ายเชื้อความเข้มข้น 4 , 6และ 8 log CFU / ml inocula ถูกเก็บไว้ในน้ำแข็งได้ถึง 1 ชั่วโมง ก่อนการฉีดวัคซีน มะม่วงและมะละกอ
ตัด .