Mono Q-Sepharose anion-exchange chr

Mono Q-Sepharose anion-exchange chromatography
The active fractions from Sephadex G-100 were applied to a
Mono Q-Sepharose column (2 cm  10 cm) previously equilibrated
with buffer C (25 mM Tris–HCl, pH 8.0). After being washed with
the same buffer, until A280 was below 0.05, bound proteins were
eluted with a linear gradient of sodium chloride in the range of
00.5 M in the equilibrating buffer. Fractions of 5 mL were collected
at a flow rate of 70 mL/h and analysed for protease activity
and protein concentration.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โมโนคิว Sepharose anion exchange chromatographyส่วนงาน Sephadex G-100 ถูกนำไปใช้เพื่อการคอลัมน์ Q Sepharose โมโน (2 ซม. 10 ซม.) ก่อนหน้านี้ equilibratedมีบัฟเฟอร์ซี (25 มม.ตรี – HCl, pH 8.0) หลังจากการล้างด้วยบัฟเฟอร์ที่เดียวกัน จนกว่า A280 ไม่ต่ำกว่า 0.05 โปรตีนที่ถูกผูกไว้ได้eluted กับการไล่ระดับโซเดียมคลอไรด์ในช่วงเชิงเส้น0.5 0 M ในบัฟเฟอร์ equilibrating มีการรวบรวมเศษ 5 mLที่อัตราการไหลของ 70 mL/h และ analysed สำหรับกิจกรรมรติเอสและความเข้มข้นของโปรตีน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Mono Q-Sepharose
โคไอออนแลกเปลี่ยนโดยเศษที่ใช้งานจากSephadex G-100
ถูกนำไปใช้กับคอลัมน์โมโนQ-Sepharose (2 ซม. 10 ซม.) equilibrated
ก่อนหน้านี้ที่มีบัฟเฟอร์C (25 มิลลิ Tris-HCl, pH 8.0) หลังจากได้รับการล้างด้วยบัฟเฟอร์เดียวกันจน A280 ต่ำกว่า 0.05 โปรตีนที่ถูกผูกไว้ถูกชะด้วยลาดเชิงเส้นของโซเดียมคลอไรด์ในช่วงของ0? 0.5 M ในบัฟเฟอร์ equilibrating เศษส่วน 5 มิลลิลิตรถูกเก็บในอัตราการไหลของ70 มิลลิลิตร / ชั่วโมงและวิเคราะห์กิจกรรมโปรติเอสและความเข้มข้นของโปรตีน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แลกเปลี่ยนไอออน chromatography ซึ่งโมโน
เศษส่วนปราดเปรียวจาก Sephadex G-100 ถูกใช้กับ
โมโนคอลัมน์ ( ซึ่ง  2 ซม. 10 ซม. ) ก่อนหน้านี้ equilibrated
บัฟเฟอร์ซี ( 25 มม. นอกจากนี้ –กรดไฮโดรคลอริก pH 8.0 ) หลังจากการล้างด้วย
บัฟเฟอร์เดียวกัน จน a280 ต่ำกว่า 0.05 ผูกพันโปรตีนกับเส้นลาดถูก
ตัวอย่างของโซเดียมคลอไรด์ในช่วง
0  0.5 m ในเดือนก่อนบัฟเฟอร์เศษส่วน 5 ml จำนวน
ที่อัตราการไหล / H 70 ml และวิเคราะห์
กิจกรรมโปรและความเข้มข้นของโปรตีน