2.2. In vitro screening of plant ex

2.2. In vitro screening of plant extracts for its antimicrobial activity against test pathogens
Aqueous extracts of 72 different medicinal plants were obtained as described by Kurucheve et al. (1997). The plant species used in this study were listed in Table 1. Briefly, 100 g fresh leaves of selected plant species were collected and washed in distilled water and then in sterile water. Leaves were ground with 100 ml of sterile water (1:1 w/v), using pestle and mortar and filtered through double-layered cheesecloth, followed by centrifugation at 5000 rpm for 10 min at 4 C. Leaf extracts were filter sterilized using a 0.22 lm Millipore filter. Aqueous extracts from tubers, roots, and nuts were similarly prepared and filter sterilized.
Initial screening of plant extracts was carried out by paper discolor assay and inhibition of mycelial growth was measured (Mauch et al., 1988). The plant products exhibiting P0.5 cm diameter zone of inhibition against the test pathogens were selected. Further evaluation of plant extracts at various concentrations (1%, 5%, 10%, 25% and 50% concentration) against L. theobromae and C. musae was carried out by ‘poisoned food technique’. The required concentrations of plant extracts were prepared by mixing the requisite quantity of plant extract from stock and then making up the volume to 100 ml with previously sterilized and cooled PDA medium in 250 ml conical flasks. For preparing 1%, 5%, 10%, 25% and 50% conc. of plant extract, 1, 5, 10, 25, 50 ml of plant extract from stock was added to 99, 95, 90, 75, 50 ml of PDA medium respectively. After thorough mixing, 15 ml of media was poured into sterilized Petri dishes of 9 cm diameter. Using a 0.8 mm cork borer, fungal plugs were removed from the growing margin of one week old pure cultures of each test pathogen and placed at the center of the test plate. PDA medium without plant extract and with either sterile distilled water or benomyl (0.1%) served as controls. The observation on linear growth of the fungus was recorded after 96 h of incubation. Each treatment was replicated three times with five plates per treatment. Data were expressed as growth rate (mm/day) relative to growth of respective pathogen in control plate by plotting mean colony diameter against time (Thangavelu et al., 2004).
Spore germination assay of test pathogens was carried out with various concentration (1%, 5%, 10%, 25% and 50%) of plant extracts. Conidia were considered to have germinated if the germ tubes were equal to or longer than the length of the conidia itself (Khan et al., 2001).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2 การโรงงานเพาะเลี้ยงคัดแยกสำหรับกิจกรรมของจุลินทรีย์กับการทดสอบโรค
อควีสารสกัดของพืชสมุนไพรต่าง ๆ 72 ได้รับตามที่อธิบายไว้โดย Kurucheve et al. (1997) ชนิดพืชที่ใช้ในการศึกษานี้ได้แสดงในตารางที่ 1 สั้น ๆ สด 100 กรัมใบพืชเลือกชนิดถูกเก็บ และล้าง ในน้ำกลั่น แล้วใส่น้ำ ใบไม้มีพื้นดินที่ มี 100 มลใส่น้ำ (1:1 w/v), pestle และปูน และกรองผ่านชั้นสอง cheesecloth ตาม centrifugation ที่ 5000 รอบต่อนาทีใน 10 นาทีที่ 4 C. สารสกัดจากใบมีกรอง sterilized ใช้ตัวกรองมาก lm 0.22 ในทำนองเดียวกันได้เตรียมสารสกัดอควีจาก tubers ราก และถั่ว และกรอง sterilized
ดำเนินการการคัดกรองเบื้องต้นของสารสกัดจากพืชออกจากกระดาษสีวิเคราะห์ และยับยั้งการเจริญเติบโต mycelial เป็นวัด (Mauch et al., 1988) โรงงานผลิตภัณฑ์อย่างมีระดับ P0.5 ซม.เส้นผ่าศูนย์กลางโซนของยับยั้งกับโรคทดสอบได้เลือก ประเมินเพิ่มเติมของโรงงานแยกที่ (เข้มข้น 1%, 5%, 10%, 25% และ 50%) ความเข้มข้นต่าง ๆ กับ L. theobromae และ c musae ถูกดำเนิน โดย 'เทคนิคอาหารยาพิษ' ความเข้มข้นต้องใช้สารสกัดจากพืชเตรียมไว้ โดยผสมปริมาณจำเป็นของพืชสกัดจากหุ้นแล้ว ทำค่าปริมาตร 100 ml ด้วยก่อนหน้านี้ sterilized และเย็น ๆ กลาง PDA ในน้ำ 250 ml ทรงกรวย สำหรับเตรียม 1%, 5%, 10%, 25% และ 50% conc. ของโรงงานสกัด 1, 5, 10, 25 50 ml ของสารสกัดจากพืชจากหุ้นถูกเพิ่ม 99, 95, 90, 75, 50 ml ของ PDA กลางตามลำดับ หลังจากผสมอย่างละเอียด 15 ml ของสื่อถูก poured เป็น sterilized Petri จานเส้นผ่าศูนย์กลาง 9 ซม. ใช้ borer คอร์กเป็น 0.8 mm เชื้อราถูกลบออกจากกำไรเติบโตวัฒนธรรมบริสุทธิ์หนึ่งสัปดาห์เก่าของแต่ละการศึกษาทดสอบ และวางไว้ที่ศูนย์กลางของแผ่นทดสอบ กลางของ PDA โดยสารสกัดจากพืช และน้ำกลั่นฆ่าเชื้อหรือ benomyl (0.1%) เป็นตัวควบคุม สังเกตบนเส้นเจริญเติบโตของเชื้อราถูกบันทึกหลังจาก h 96 ของคณะทันตแพทยศาสตร์ ทรีตเมนท์ถูกจำลองแบบแล้วสามครั้ง มี 5 แผ่นต่อการรักษา ข้อมูลที่แสดงเป็นอัตราการเติบโต (mm/วัน) สัมพันธ์กับการเจริญเติบโตของการศึกษาที่เกี่ยวข้องในแผ่นควบคุม โดยพล็อตเส้นผ่าศูนย์กลางโคโลนีเฉลี่ยกับเวลา (Thangavelu et al., 2004) .
ทดสอบการงอกสปอร์ของทดสอบโรคได้ดำเนินการ ด้วยความเข้มข้นต่าง ๆ (1%, 5%, 10%, 25% และ 50%) สารสกัดจากพืช Conidia ได้ถือมีเปลือกงอกถ้าจมูกหลอดก็เท่ากับไป หรือนานเกินกว่าความยาวของ conidia เอง (Khan et al., 2001) .

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2 ในการคัดกรองหลอดทดลองของสารสกัดจากพืชสำหรับกิจกรรมที่ยาปฏิชีวนะต่อต้านเชื้อโรคทดสอบ
สารสกัดน้ำจาก 72 พืชสมุนไพรที่แตกต่างกันที่ได้รับตามที่อธิบาย Kurucheve ตอัล (1997) พันธุ์พืชที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ได้รับการระบุไว้ในตารางที่ 1. สั้น ๆ , 100 กรัมใบสดของการคัดเลือกพันธุ์พืชถูกเก็บรวบรวมและล้างในน้ำกลั่นแล้วในน้ำหมัน ใบมาบด 100 มล. ของน้ำหมัน (1:1 w / v) โดยใช้สากและปูนและกรองผ่านผ้าสองชั้นตามด้วยการหมุนเหวี่ยงที่ 5000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาทีที่ 4 สารสกัดจากใบ C. ถูกกรองผ่านการฆ่าเชื้อโดยใช้ 0.22 LM กรองค สารสกัดด้วยน้ำจากหัวรากและถั่วที่เตรียมกันและผ่านการฆ่าเชื้อตัวกรอง
การคัดกรองเบื้องต้นของสารสกัดจากพืชได้รับการดำเนินการโดยวิธีเปลี่ยนสีกระดาษและยับยั้งการเจริญเติบโตของเส้นใยวัด (Mauch และคณะ. 1988) ผลิตภัณฑ์พืชแสดง P0.5 โซน ซม. เส้นผ่าศูนย์กลางของการยับยั้งเชื้อโรคทดสอบได้รับการแต่งตั้ง การประเมินผลต่อไปของสารสกัดจากพืชที่ระดับความเข้มข้นต่างๆ (1%, 5%, 10%, 25% และความเข้มข้น 50%) ต่อลิตรและ theobromae C. musae ได้ดำเนินการโดย 'เทคนิคอาหารเป็นพิษ' ความเข้มข้นที่จำเป็นของสารสกัดจากพืชที่ถูกจัดทำขึ้นโดยการผสมปริมาณที่จำเป็นของสารสกัดจากพืชจากหุ้นแล้วทำให้ปริมาณ 100 มล. ที่มีการฆ่าเชื้อก่อนหน้านี้และการระบายความร้อนขนาดกลางใน PDA 250 มล. ขวดรูปกรวย สำหรับการเตรียม 1%, 5%, 10%, 25% และ 50% ความเข้มข้น ของสารสกัดจากพืช, 1, 5, 10, 25, 50 มิลลิลิตรของสารสกัดจากพืชจากสต็อกเพิ่มขึ้นถึง 99, 95, 90, 75, 50 มิลลิลิตรของ PDA กลางตามลำดับ หลังจากการผสมอย่าง 15 มล. ของสื่อถูกเทลงในจานเพาะเชื้อผ่านการฆ่าเชื้อจาก 9 ซม. เส้นผ่าศูนย์กลาง ใช้เจาะรู 0.8 มม. ก๊อกปลั๊กเชื้อราที่ถูกถอดออกจากขอบที่เพิ่มขึ้นของวัฒนธรรมบริสุทธิ์หนึ่งสัปดาห์เก่าของการทดสอบแต่ละเชื้อโรคและวางไว้ที่ศูนย์กลางของแผ่นทดสอบ PDA กลางโดยไม่ต้องสารสกัดจากพืชและมีทั้งน้ำหมันกลั่นหรือ benomyl (0.1%) ทำหน้าที่เป็นตัวควบคุม การสังเกตการเจริญเติบโตของเชื้อราเชิงเส้นถูกบันทึกไว้หลังจาก 96 ชั่วโมงของการบ่ม การรักษาแต่ละคนถูกทำซ้ำสามครั้งกับห้าแผ่นต่อการรักษา ข้อมูลแสดงเป็นอัตราการเจริญเติบโต (มม. / วัน) เมื่อเทียบกับการเจริญเติบโตของเชื้อโรคที่เกี่ยวข้องในจานควบคุมโดยวางแผนอาณานิคมเส้นผ่าศูนย์กลางเฉลี่ยกับเวลา (Thangavelu และคณะ. 2004)
สปอร์ทดสอบการงอกของเชื้อโรคทดสอบได้รับการดำเนินการที่มีความเข้มข้นต่างๆ (1 %, 5%, 10%, 25% และ 50%) ของสารสกัดจากพืช สปอร์ที่ได้รับการพิจารณาให้มีการงอกถ้าหลอดเชื้อโรคได้เท่ากับหรือยาวกว่าความยาวของสปอร์ของตัวเอง (Khan et al,., 2001)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2 . การคัดกรองฤทธิ์ต้านจุลชีพของสารสกัดจากพืชเพื่อการต่อต้านเชื้อโรคทดสอบ
น้ำสกัดสมุนไพร 72 ต่าง ๆได้ตามที่อธิบายไว้โดย kurucheve et al . ( 1997 ) พืชชนิดที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ ได้ระบุไว้ในตารางที่ 1 สั้น 100 กรัม ใบสดของการเลือกชนิดพืชถูกเก็บและล้างในน้ำกลั่นและน้ำหมันใบพื้น 100 มิลลิลิตรของน้ำหมัน ( 1 : 1 w / v ) ใช้ครกและกรองผ่านผ้า 2 ชั้น ตามด้วยเหวี่ยงแยกที่ 5 , 000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 10 นาทีที่ 4 . สารสกัดจากใบถูกกรองฆ่าเชื้อใช้ 0.22 มิลลิ LM ตัวกรอง น้ำสกัดจากมันฝรั่ง ราก และถั่วถูกเตรียมและกรองและฆ่าเชื้อ .
การตรวจคัดกรองเบื้องต้นของสารสกัดจากพืช ทำโดยกระดาษเปลี่ยนสีในการยับยั้งการเจริญวัด ( เมาช์ et al . , 1988 ) ผลิตภัณฑ์จากพืช p0.5 ซม. โซนของการต่อต้านเชื้อโรคแบบเลือก การประเมินเพิ่มเติมสารสกัดจากพืชที่ความเข้มข้นต่างๆ ( 1% , 5% , 10% , 25% และ 50% ของ ) กับเชื้อรา L . theobromae และคmusae กระทำโดยเทคนิค ' พิษ ' ใช้ความเข้มข้นของสารสกัดจากพืชที่เตรียมโดยการผสมปริมาณที่จำเป็นของพืชสารสกัดจากตลาดหลักทรัพย์ และสร้างปริมาณ 100 ml ด้วยก่อนหน้านี้ฆ่าเชื้อและเย็นขนาดกลาง 250 ml ขวดกรวยใน PDA . สำหรับการเตรียม 1% , 5% , 10% , 25% และ 50% เข้มข้น . สารสกัดจากพืช , 1 , 5 , 10 , 25 ,50 มิลลิลิตร สารสกัดจากพืช จากหุ้นเพิ่มถึง 99 , 95 , 90 , 75 , 50 ml ของ PDA ปานกลางตามลำดับ หลังจากอย่างละเอียดผสม 15 ml ของสื่อถูกเทลงในจานเลี้ยงเชื้อฆ่าเชื้อเส้นผ่าศูนย์กลางซม. 9 . ใช้ 0.8 มิลลิเมตรหนอนเจาะไม้ก๊อก , ปลั๊กถูกเอาออกจากเชื้อราเติบโตขอบของวัฒนธรรมเก่าหนึ่งสัปดาห์ที่บริสุทธิ์ของแต่ละการทดสอบเชื้อโรคและวางไว้ที่ตรงกลางของแผ่นทดสอบ .สารสกัดจากพืชและขนาดกลางไม่มี PDA ด้วยน้ำกลั่นฆ่าเชื้อหรือสารเคมีเบโนมิล ( 0.1% ) ทำหน้าที่ควบคุม การสังเกตการเจริญเติบโตเชิงเส้นของเชื้อรา บันทึกไว้หลัง 96 H ของการบ่ม การรักษาแต่ละครั้งเป็นจำนวน 3 ครั้ง มี 5 แผ่น ต่อ การรักษาข้อมูลที่แสดงเป็นอัตราการเติบโต ( มม. / วัน ) เมื่อเทียบกับการเจริญเติบโตของเชื้อในแต่ละจานควบคุมโดยวางแผนหมายถึงอาณานิคมเส้นผ่าศูนย์กลางกับเวลา ( thangavelu et al . , 2004 ) .
สปอร์งอก assay ของเชื้อโรคต่าง ๆทดสอบกับความเข้มข้น ( 1% , 5% , 10% , 25% และ 50% ) สารสกัดจากพืชผลการศึกษาได้พิจารณาให้มีการงอก ถ้าเชื้อโรคหลอด เท่ากับ หรือยาวกว่าความยาวของโคนิเดียเอง ( ข่าน et al . , 2001 ) .