The plates were incubated for 3 h at 28◦C to determine theGA3, ABA and ZR concentrations and overnight at 4◦C to determinethe IAA concentration. Plates were then washed four times withPBS + Tween 20 [0.1% (v/v)] buffer (pH 7.4). IgG-horseradish per-oxidase substrate (100 L of 1.25 g/mL) was added to each well,and plates were incubated for 1 h at 30◦C. Plates were rinsed fivetimes with PBS + Tween 20 buffer, and 100 L of colour-appearingsolution containing 1.5 mg mL−1o-phenylenediamine and 0.008%(v/v) H2O2was added to each well. When 2000 and 0 ng/mL ofthe standard showed pale and deep colours in the wells, respec-tively, the reaction was stopped by adding 50 L of 6 N H2SO4perwell. Colour development in each well was detected using an ELISAReader (Model DG-5023, Huadong Electron Tube Factory, Nanjing,China) at an optical density of A490. The concentrations of IAA, GA3,ABA and ZR in the leaves and the concentrations of ABA and ZR inthe xylem sap were calculated according to the method previouslydescribed
จานถูกบ่มเป็นเวลา 3 ชม. 28 ◦ C เพื่อตรวจสอบ thega3 ABA และ ZR , ความเข้มข้นและค้างคืนที่ 4 ◦ C หา IAA ความเข้มข้น แผ่น ) จากนั้นล้าง 4 ครั้ง withpbs + 0.1% Tween 20 [ ( v / v ) ] บัฟเฟอร์ pH 7.4 ) IgG ต่อเอนไซม์มะรุมพื้นผิว ( 100 ลิตร 1.25 g / ml ) ที่ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละแผ่นเป็นอย่างดี และบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมง 30 ◦ C จานถูกล้าง fivetimes กับ PBS + Tween 20 บัฟเฟอร์ และ 100 ลิตร สี appearingsolution ที่มี 1.5 มก. / มล. − 1o ฟีนิลีนไดอะมีน และ 0.2% ( v / v ) h2o2was เพิ่มแต่ละครั้งได้อีกด้วย เมื่อปี 2000 และ 1 ng / ml พบว่ามาตรฐานของสีซีด และลึกลงไปในบ่อ respec มี ปฏิกิริยาถูกหยุดโดยเพิ่ม 50 ลิตร 6 N h2so4perwell . การพัฒนาสีในแต่ละหลุมถูกตรวจพบใช้ elisareader ( แบบ dg-5023 , Huadong อิเล็กตรอนโรงงานท่อ , หนานจิง , จีน ) ที่ความหนาแน่นของแสงของ a490 . ความเข้มข้นของ IAA GA3 ABA , และ , ZR ในใบและความเข้มข้นของ ABA และ ZR ในไซเลม SAP คำนวณตามวิธีการ previouslydescribed
การแปล กรุณารอสักครู่..