The human pregnane X receptor (hPXR

The human pregnane X receptor (hPXR) regulates the expression of CYP3A4, which plays a vital role in hepatic drug metabolism and has considerably reduced expression levels in proliferating hepatocytes. We have recently shown that cyclin-dependent kinase 2 (CDK2) negatively regulates hPXR-mediated CYP3A4 gene expression. CDK2 can be dephosphorylated and inactivated by protein phosphatase type 2C beta isoform long (PP2Cβl), a unique phosphatase that was originally cloned from human liver. In this study, we sought to determine whether PP2Cβl is involved in regulating hPXR's transactivation activity and whether PP2Cβl affects CDK2 regulation of this activity in HepG2 liver carcinoma cells. In transactivation assays, transiently coexpressed PP2Cβl significantly enhanced the hPXR-mediated CYP3A4 promoter activity and decreased the inhibitory effect of CDK2 on hPXR transactivation activity. In addition, shRNA-mediated down-regulation of endogenous PP2Cβl promoted cell proliferation, inhibited the interaction of hPXR with steroid receptor coactivator-1, and attenuated the hPXR transcriptional activity. The levels of PP2Cβl did not affect hPXR expression. Our results show for the first time that PP2Cβl is essential for hPXR activity and can positively regulate this activity by counteracting the inhibitory effect of CDK2. Our results implicate a novel and important role for PP2Cβl in regulating hPXR activity and CYP3A4 expression by inhibiting or desensitizing signaling pathways that negatively regulate the function of pregnane X receptor in liver cells and are consistent with the notion that both the activity of hPXR and the expression of CYP3A4 are regulated in a cell cycle-dependent and cell proliferation-dependent manner.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตัวรับมนุษย์ pregnane X (hPXR) กำหนดนิพจน์ของ CYP3A4 ซึ่งมีบทบาทสำคัญในเมแทบอลิซึมของยาตับ และมีมากลดระดับนิพจน์ใน proliferating hepatocytes เราเพิ่งได้แสดง kinase cyclin ขึ้นอยู่กับการที่ 2 (CDK2) hPXR mediated CYP3A4 ยีนที่กำหนดส่ง CDK2 สามารถ dephosphorylated และยกเลิก โดยโปรตีนฟอสฟาเตสชนิด 2 ซีเบต้า isoform ยาว (PP2Cβl), ฟอสฟาเตสเฉพาะที่ถูกเดิมโคลนจากตับมนุษย์ ในการศึกษานี้ เราพยายามที่จะกำหนดว่าการเกี่ยวข้องกับ PP2Cβl ในการควบคุมกิจกรรมของ hPXR transactivation และว่า PP2Cβl มีผลต่อ CDK2 ระเบียบของกิจกรรมนี้ในเซลล์ carcinoma ตับ HepG2 ใน transactivation assays, PP2Cβl transiently coexpressed อย่างมีนัยสำคัญเพิ่ม hPXR mediated CYP3A4 โปรโมเตอร์กิจกรรม และลดลงผลลิปกลอสไขของ CDK2 กิจกรรม transactivation hPXR นอกจากนี้ shRNA mediated ลงระเบียบของ endogenous PP2Cβl ส่งเสริมการงอกของเซลล์ ห้ามโต้ตอบของ hPXR กับสเตอรอยด์ตัวรับ coactivator-1 กกิจกรรม transcriptional hPXR ไฟฟ้าเคร... ระดับของ PP2Cβl ไม่มีผลกับนิพจน์ hPXR ผลของเราแสดงเป็นครั้งแรกว่า PP2Cβl เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับกิจกรรม hPXR และสามารถควบคุมกิจกรรมนี้ โดย counteracting CDK2 ลิปกลอสไขผลบวก ผลของเราอ้างอิงนวนิยายและบทบาทสำคัญสำหรับ PP2Cβl ในการควบคุมกิจกรรม hPXR และนิพจน์ CYP3A4 inhibiting หรือ desensitizing มนต์ตามปกติที่ควบคุมการทำงานของตัวรับ pregnane X ในเซลล์ตับ และสอดคล้องกับแนวคิดที่กำหนดว่า การ hPXR และนิพจน์ของ CYP3A4 ในเซลล์รอบตัวขึ้นอยู่กับในเชิงลบ และลักษณะขึ้นอยู่กับการขยายตัวของเซลล์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

pregnane รับ X มนุษย์ (hPXR) ควบคุมการแสดงออกของ CYP3A4 ซึ่งมีบทบาทสำคัญในการเผาผลาญยาเสพติดตับและได้ลดลงอย่างมากระดับการแสดงออกในเซลล์ตับ proliferating เราได้แสดงให้เห็นเร็ว ๆ นี้ว่าไคเนส cyclin ขึ้นอยู่กับ 2 (CDK2) ลบควบคุมการแสดงออกของยีน CYP3A4 hPXR พึ่ง CDK2 สามารถ dephosphorylated และใช้งานโดยโปรตีนชนิด phosphatase 2C ไอโซฟอร์มเบต้ายาว (PP2Cβl) phosphatase ไม่ซ้ำกันที่เป็นโคลนมีพื้นเพมาจากตับของมนุษย์ ในการศึกษาครั้งนี้เราพยายามที่จะตรวจสอบว่ามีส่วนเกี่ยวข้องPP2Cβlในการควบคุมกิจกรรม transactivati​​on hPXR และไม่ว่าจะมีผลกระทบต่อการควบคุมPP2Cβl CDK2 ของกิจกรรมนี้ในเซลล์ HepG2 มะเร็งตับ ในการตรวจ transactivati​​on, transiently coexpressed PP2Cβlอย่างมีนัยสำคัญเพิ่มกิจกรรมก่อการ CYP3A4 hPXR สื่อและลดลงของผลยับยั้ง CDK2 กิจกรรม hPXR transactivati​​on นอกจากนี้ shRNA พึ่งลงระเบียบของภายนอกPP2Cβlการส่งเสริมการเพิ่มจำนวนเซลล์, ยับยั้งการทำงานร่วมกันของ hPXR กับตัวรับสเตียรอย coactivator-1 และยับยั้งกิจกรรมการถอดรหัส hPXR ระดับของPP2Cβlไม่ได้ส่งผลกระทบต่อการแสดงออก hPXR ผลของเราแสดงให้เห็นเป็นครั้งแรกว่าPP2Cβlเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับกิจกรรม hPXR และบวกสามารถควบคุมกิจกรรมนี้โดย counteracting ผลยับยั้งของ CDK2 ผลของเรามีส่วนที่แปลกใหม่และมีบทบาทสำคัญสำหรับPP2Cβlในการควบคุมกิจกรรม hPXR และการแสดงออกโดยการยับยั้ง CYP3A4 หรือ desensitizing เส้นทางการส่งสัญญาณที่ลบควบคุมการทำงานของ pregnane รับ X ในเซลล์ตับและมีความสอดคล้องกับความคิดที่ว่าทั้งกิจกรรมของ hPXR และการแสดงออก ของ CYP3A4 ถูกควบคุมในเซลล์วงจรและขึ้นอยู่กับลักษณะการแพร่กระจายของเซลล์ขึ้นอยู่กับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

มนุษย์ pregnane x รีเซพเตอร์ ( hpxr ) ควบคุมการแสดงออกของยีน ( ซึ่งมีบทบาทสำคัญในการเผาผลาญอาหารและเอนไซม์ยามีมากลดระดับการแสดงออกใน proliferating เซลล์ตับ . เราเพิ่งพบว่าตัวแปรที่มีไคเนส 2 ( cdk2 ) ถูกควบคุมโดยยีน ( hpxr .มนุษย์ pregnane x รีเซพเตอร์ ( hpxr ) ควบคุมการแสดงออกของยีน ( ซึ่งมีบทบาทสำคัญในการเผาผลาญอาหารและเอนไซม์ยามีมากลดระดับการแสดงออกใน proliferating เซลล์ตับ . เราเพิ่งพบว่าตัวแปรที่มีไคเนส 2 ( cdk2 ) ถูกควบคุมโดยยีน ( hpxr .cdk2 สามารถ dephosphorylated การศึกษาโปรตีน phosphatase และชนิดเบต้า 2 ไอโซฟอร์มยาว ( pp2c บีตา L ) , ฟอสฟาเตสที่เป็นเอกลักษณ์ที่ถูกโคลนจากตับมนุษย์ ในการศึกษานี้เราพยายามที่จะตรวจสอบว่า pp2c บีตาผมมีส่วนร่วมในการควบคุมกิจกรรม transactivation hpxr และไม่ว่า pp2c บีตา L ต่อระเบียบ cdk2 ของกิจกรรมนี้ในตับมะเร็งตับมะเร็งเซลล์ใน transactivation หรือบุคคลหรือสิ่งที่อยู่ชั่วคราว , coexpressed pp2c บีตา L อย่างมีนัยสำคัญเพิ่ม hpxr ) กิจกรรมการสร้างและลดผลการยับยั้งของ cdk2 กิจกรรม transactivation hpxr . นอกจากนี้ ระดับของ shrna down-regulation ภายใน pp2c บีตาผมเลื่อนเซลล์ proliferation ยับยั้งการปฏิสัมพันธ์ของ hpxr กับ coactivator-1 ยาสเตอรอยด์เป็น hpxr particle และกิจกรรม ระดับของ pp2c บีตาผมไม่มีผลต่อการแสดงออก hpxr . ผลของเราแสดงเป็นครั้งแรกที่ pp2c บีตา L เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับกิจกรรมและ hpxr บวกสามารถควบคุมกิจกรรมนี้โดย counteracting ผลยับยั้งของ cdk2 .ผลของเรากลายเป็นนวนิยายและที่สำคัญบทบาทในการควบคุมกิจกรรม pp2c บีตา L hpxr และการแสดงออกโดยยับยั้งการสร้างหรือ desensitizing ที่จะลบควบคุมการทำงานของ pregnane x ตัวรับในเซลล์ตับ และมีความสอดคล้องกับแนวคิดที่ว่า ทั้งกิจกรรมของ hpxr และการแสดงออก ( มีการควบคุมในแบบวัฏจักรเซลล์และเซลล์


ลักษณะ